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第第页安装色谱柱时你应当知道什么色谱柱如何操作液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分构成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工获得正确牢靠的试验数据的必经之路。
色谱柱的安装:1.将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱,并完全排出流路内的空气。装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下,使用双方都能相溶的液体做过渡。将盐溶液置换成有机溶剂的时候,需要通过纯水、丙酮的次序来进行置换。相反,从有机溶剂转换成盐溶液的情况下,需要通过丙酮、纯水的次序置换。2.色谱柱保存方法不对或者长期不使用的情况下,色谱柱的出入口可能会有空气残留。这种情况下,必需先把空气完全排出后才连接到装置中。避开快速加热,加热温度不要超过色谱柱的Z高负荷温度。把柱子入口侧的螺栓打开,然后加温(一般加温到手心感到暖和的程度就充分了),等液体满出来以后接到装置上。然后,打开出口处的螺栓,用泵送液,等确认出口处有液体流出后,连接到装置中。这样操作,就算后面再连接一根色谱柱也能完全除去空气。3.在泵运作的时候连接色谱柱。确保能让流动相依照色谱柱上箭头的方向流动的状态连接色谱柱。4.色谱柱加温使用的时候,先用0.2~0.3mL/min的低流量一边送液一边升温。达到所定温度后,再渐渐的加添流量至测定流量。
色谱柱安装时需要注意的事项
色谱是一种分别分析手段,分别是核心,因此担负分别作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均接受填充柱。色谱柱的分别效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。下面介绍色谱柱安装时需要注意的事项。
色谱柱的安装:
1)将液相色谱装置中的流动相完全置换后再连接色谱柱,并完全排出流路内的空气。
装置内的液体和所使用的流动相不能相溶的情况下,使用双方都能相溶的液体做过渡。比如从水置换到氯仿的情况,就需要使用丙酮做过渡,才能完全置换。
将盐溶液置换成有机溶剂的时候,需要通过纯水、丙酮的次序来进行置换。相反,从有机溶剂转换成盐溶液的情况下,需要通过丙酮、纯水的次序置换。
不仅仅是泵,流动相流动的全部流路都必需进行置换。例如,注入样品的情况,软管内的液体也需要置换。另外,假如使用压力计等别的软管的情况,取下来的管子也必需由流动相洗净后才能连续使用。
2)色谱柱保存方法不对或者长期不使用的情况下,色谱柱的出入口可能会有空气残留。这种情况下,必需先把空气完全排出后才连接到装置中。
避开快速加热,加热温度不要超过色谱柱的最高负荷温度。
把柱子入口侧的螺栓打开,然后加温(一般加温到手心感到暖和的程度就充分了),等液体满出来以后接到装置上。然后,打开出口处的螺栓,用泵送液,等确认出口处有液体流出后,连接到装置中。这样操作,就算后面再连接一根色谱柱也能完全除去空气。
3)在泵运作的时候连接色谱柱。确保能让流动相依照色谱柱上箭头的方向流动的状态连接色谱柱。
4)色谱柱加温使用的时候,先用0.2~0.3mL/min的低流量一边送液一边
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