HYT 171-2014 海洋植物标准物质研制及保存技术规范（正式版）

海洋植物标准物质研制及保存技术规范2014-06-25发布I本标准依据GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家海洋局第二海洋研究所提出。本标准由全国海洋标准化技术委员会(SAC/TC283)归口。本标准起草单位：国家海洋局第二海洋研究所、浙江大学。本标准主要起草人：吕海燕、王正方、张仕勇、周青松。1海洋植物标准物质研制及保存技术规范本标准规定了海洋植物标准物质研制及保存的方法和技术要求。本标准适用于海洋中大型藻类(主要指海带、裙带菜、紫菜等大型藻类)无机成分分析标准物质的研制和保存，其他成分分析标准物质可参考本标准。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。JJF1005—2005标准物质常用术语和定义JJF1006—1994一级标准物质技术规范JJF1135—2005化学分析测量不确定度评定3术语和定义JJF1005—2005确立的以及下列术语和定义适用于本文件。海洋植物marineplants具有叶绿素、能进行光合作用、生产有机物的自养型生物，包括海洋藻类、菌类、地衣和维管束植物等。本标准中海洋植物主要指海带、裙带菜、紫菜等大型藻类。真空冷冻干燥vacuumfreeze-drying一种将物体首先进行冻结以固定其生物特性及结构，然后在真空条件下进行干燥(即将物体中的固体水分直接升华为气态),从而达到脱水目的的技术。通过给定比授[予]能的钴-60γ射线辐照，杀灭物体内细菌的“冷消毒”方法。4海洋植物标准物质的制备4.1海洋植物标准物质制备工艺流程进行分析之前，应将样品(包括均匀性、稳定性检验及多家定值)在(60±1)℃烘干2h。2海洋植物标准物质制备工艺流程见图1。采集的海洋植物鲜品采集的海洋植物鲜品图1海洋植物标准物质制备工艺流程图4.2海洋植物标准物质的候选物海洋植物标准物质的候选物宜选用分布地域广泛、较容易获取的新鲜海洋植物作为候选物，如：海带、裙带菜、紫菜等海洋大型藻类。4.3海洋植物样品的预处理在收获季节到养殖场采集海洋植物样品，候选物中含砂土、盐分、杂质等应小于2%。样品运回实验室后进行清洗，清洗程序分两步，粗洗：去根、芽和杂质，然后放入蒸馏水中浸泡，洗去浮盐和细沙；精洗：清除腐败烂叶等后，用蒸馏水浸泡、冲洗。将清洗过的海洋植物分割成2cm左右的碎段，放入匀浆机中匀浆2min取出，立即倒入清洁的聚乙烯塑料袋中，放入冷柜中速冻，备用。3采用真空冷冻干燥设备，将冰冻海洋植物浆料解冻后，再将浆料平铺在垫有聚乙烯塑料薄膜的冷冻干燥池中，厚度约为2cm,在浆料层上方覆盖一层脱脂纱布，在一40℃真空环境中脱水56h,制得海洋植物粉末，含水率约为1%。取出干粉样品立即放入清洁的二层聚乙烯塑料薄膜袋中，在两层之间放入干燥剂，置于密闭的清洁容器中贮存备用。海洋植物粉末采用高铝瓷球磨机粉碎，研磨49h后，样品通过0.198mm尼龙筛(通过部分占99.9%),再在球磨机中混磨8h,混匀备用。将混匀的样品分装入处理过的60mL棕色玻璃瓶中，每瓶内装海洋植物粉5g～15g,装瓶后的样将经过辐照的瓶装海洋植物粉样品套上专用铝箔塑料袋封装，并贮存于聚乙烯塑料桶中，置于阴凉处保存。海洋植物标准物质保存应根据标准物质的不同特性量选择特定的保存方法。保存容器应能避光、密封，宜选择棕色中性玻璃瓶；玻璃瓶用普通洗涤剂刷洗，自来水冲洗干净后用(1+3)硝酸浸泡，然5均匀性检验5.1检验及抽样要求凡成批制备并分装成最小包装单元的海洋植物标准物质，应进行均匀性检验。当总体单元数少于500个时，抽取单元数不少于15个；总体单元数大于500个时，抽取单元数不小于母体数的3%。根据需要分别在分装的开始、中间和最后抽取，保证总体样品有足够的代表性。5.2检验方法采用精密度高的试验方法，通过组间方差和组内方差的比较来判断各组测量值之间有无系统误差。当所研制的海洋植物标准物质具有多种特性量值时，应选择有代表性和不容易均匀的待测特性量值进行均匀性检验，并选择同等或高于定值方法的精密度和具有足够灵敏度的测量方法，在重复性的实验条件下进行均匀性检验。选择合适的统计模式进行统计检验。本标准推荐采用方差分析法即F检验法。F值的计算公式为：Q₁——组间差方和；4v₁——瓶间自由度Q₂——组内差方和；v₂——瓶内自由度m——抽取样品数；n——每个样品测定次数；x;——每个样品测定值的平均值；z——所有单个样品平均值的总平均值；x;——每个样品每次测定值。5.3结果判定分析按5.2F值的计算公式求得F值。当F<F。,则认为组间与组内无显著性差异，表示该标准物质均匀性合格。α为显著性水平，通常取0.05。根据给定的α和vi,v₂,可查《常用统计用表》得6稳定性检验6.1检验要求海洋植物标准物质在均匀性检验合格后，选择同等或高于定值方法的精密度和具有足够灵敏度的测量方法，进行稳定性检验，并注意操作及实验条件的一致性。稳定性检验的时间间隔应按先密后疏的原则。在有效期间应有多个时间间隔的检验数据，以确保标准物质的可靠性。6.2样品抽取考察稳定性所用检验样品应从最小包装单元的样品中随机抽取。当标准物质有多个待定特性量值时，应选择那些易变的和有代表性的待定特性量值进行稳定性检验。6.3结果评价分装成最小包装后的样品按时间顺序进行测量，如测量结果在随机不确定度范围内波动，则该特性量在试验的时间间隔内是稳定的。可以用相应的统计检验方法，如t检验或平均值一致性检验等检验方法进行稳定性检验。标准物质稳定期至少1年。7最小取样量在规定的分析测量条件下保证标准物质均匀的最少的样品量。最小取样量越少，则显示样品越当一种标准物质有多个待定特性量时，以不易均匀待定特性量的最小取样量表示标准物质的最小取样量或分别给出每个特性量的最小取样量。8标准物质定值8.1质量控制在定值前，对协作定值实验室提出质量保证的要求，如：5a)仪器设备、人员素质、标准物质研制过程的监控及一些实验中的注意事项等；b)定值时应同时用同类标准物质作为质控样；c)每个定值方法所得的分析结果均进行格拉布斯(Grubbs)检验法检验，剔除离群值后方可报出数据。8.2定值要求定值过程应按照JJF1006—1994中有关技术及文书要求，均匀性、稳定性检验合格并具有一定数量的标准物质方可进行定值；定值的测量方法应在理论上和实践上经检验证明是准确可靠的方法；定值过程所用量具和仪器，应在检定/校准合格的有效期内。8.3定值方法海洋植物标准物质的定值方式可采用两种或两种以上不同原理的可靠方法定值。当采用多种测量方法时，独立定值组数一般不少于6个；当采用同一种测量方法时，独立定值组数一般不少于8个。汇总定值结果进行格拉布斯(Grubbs)检验法检验，用夏皮罗-威尔克(Shapiro-Wilk)检验法进行正态分布检验，在数据服从正态分布或近似正态分布的情况下，再将每个实验室的测定数据的平均值视为单次测量值，构成一组新的测量数据，进行格拉布斯(Grubbs)检验法检验，剔除离群值后将该组数据的平均值作为标准值。对非正态分布的元素以中位值定值。9定值结果表示定值结果一般表示为：认定值士总不确定度。认定值常被称为标准值，不确定度的评定方法按照JJF1135—2005中的有关技术及文书要求。10海洋植物标准物质的保存10.1保存期的监控在海洋植物标准物质的保存有效期内应该不断注意观察外观是否有异常，如标准物质是否吸潮变质，若有异常应停止出售和使用；在标准物质保存有效期的中、后期继续观察标准物质的变化，以积累数据，延长标准物质的有效期。10.2标准物质启用过程中的保存海洋植物标准物质开封后可多次使用。使用时应注意环境的清洁，开瓶后取出足够的标准物质量放入称量瓶中，立即盖紧瓶口。称量瓶中的标准物质放置烘箱中烘干，烘干的温度和时间应符合标准物质认定证书的要求，烘干后的称量瓶立即置于干燥器中待称量。称量后的标准物质不再倒回原来装标准物质的瓶中。10.3标准物质的管理标准物质售出和使用时应有台账登记，并检查标准物质是否有异常，标签是否完整，标准物质认定证书一定要同时提供给客户。各种海洋植物标准物质应单独存放；标准物质发生过期、变质、包装破裂、标签破损等情况时，应及时将其从存放处所撤除，并用合适的方式处理，以免误用。611标准物质的包装、贮存与运输根据海洋植物标准物质的性质选择合适的包装容器材质，确保包装材质不会对标准物质的特性量值造成影响；包装容器应具有良好的密封性，避免潮湿，标准物质应存放于阴凉、洁净的环境中；在标准物质的运输途中，对于玻璃容器应有合适的外包装，并在外包装上写有“易碎品”字样。12标准物质认定证书标准物质认定证书是介绍标准物质的技术文件，是研制单位向用户提出的质量保证书和使用说明书，标准物质认定证书应随同标准物质一起提供给用户。标准物质认定证书中应提供如下基本信息：a)标准物质的制造计量器具许可证标志、编号(GBW)、证书编号、标准物质中英文名称、定值日期及有效期限；b)用途、制备方法、均匀性及稳定性说明、定值方法、标准值、总不确定度、溯源性说明；c)基体情况、包装量、正确使用说明、贮存要求、研制和定值单位以及联系方式等。13标准物质标签标签上应标出标准物质的制造计量器具许可证标志、编号(GBW)、标准物质中英文名称、研制单位等信息.[1]GB/T12763.1～GB/T12763.7—2007海洋调查规范[2]GB17378.3—2007海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输[3]JJF1186—2007标准物质认定证书和标签内容编写规则[4]JJF1218—2009标准物质研制报告编写规则[5]JJF1059.1—2012测量不确定度评定与表示[6]韩永志.标准物质手册.[M]北京：中国计量出版社，1998.1～37[7]李红梅，刘菲，李孟婉，等译.标准物质及其在分析化学中的应用.[M]北京：中国计量出版社，[8]吕海燕，王正方.海洋植物标准物质-海带的研制.科技通报，2004,20(4):363～367[9]罗旭.化学统计学.[M]北京：科学出版社，2001,64～172[10]全浩，韩永志.标准物质及其应用技术.[M]北京：中国标准出版社，2003.3[11]鄢明才，王春书等.地球化学标准物质的研制——植物、光谱、金.[M]北京：地质出版社，[12]IntergovernmentalOceanographicscience[M].Revi