《药用菌生产技术》课件-项目2 药用菌菌种生产

2-1菌种生产的基本设备《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu接种设备12CONTENTS目录中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu培养设备灭菌设备1接种设备1

接种室接种箱超净工作台接种工具酒精灯接种设备中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu接种设备超净工作台接种箱中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu枪匙钩铲镊耙针环接种接种设备接种工具中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu培养设备21、培养室2、培养箱中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu灭菌设备3装锅→加热排冷空气→升压→保压灭菌→降压出锅高压蒸汽灭菌锅常压蒸汽灭菌灶100℃灭菌12h中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu常压蒸汽灭菌灶高压蒸汽灭菌锅2-2培养基配制《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu培养基的种类12CONTENTS目录中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu培养基的配制原则中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu培养基的种类1液体培养基固体培养基固化培养基按物理状态分按营养物质种类分天然培养基合成培养基半合成培养基中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu培养基的配制原则21、含有该菌生长发育所必需的营养物资且比例合理；2、具有一定的生长环境；3、严格灭菌，保持无菌状态。中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu斜面培养基配制过程2-3消毒灭菌《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu消毒与灭菌的概念1CONTENTS目录中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu消毒与灭菌的一般方法2中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu消毒与灭菌的概念1消毒是指用物理或化学的方法，杀灭物料中、物体表面及环境中的部分微生物，不包括芽孢和孢子。灭菌是指用物理或化学的方法，杀灭物料中或设备中的所有微生物，包括芽孢和孢子。灭菌消毒中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu消毒与灭菌的一般方法2物理消毒灭菌法化学消毒灭菌法消毒与灭菌物理消毒灭菌热力灭菌辐射灭菌滤过除菌干热灭菌湿热灭菌灼烧热空气灭菌煮沸法巴氏消毒法间歇灭菌法高温蒸汽灭菌法常温蒸汽灭菌法紫外线电离辐射微波灭菌消毒与灭菌化学消毒灭菌重金属及其盐类氧化剂还原剂表面活性剂酸碱其他消毒剂2-4菌种分离技术——组织分离法《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu子实体组织分离1菌核组织分离2菌索组织分离3中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu特点：1、能保持原菌种优良性状；2、方法简便，容易成功；3、重复多易退化注意：不适于耳类（子实体组织分离概念：子实体组织分离是指选取一小部分菇体或耳片组织分离培养成菌丝体的方法。步骤种菇选择个体健壮、菇形美观、无病虫害、适度成熟（七八分成熟）分离操作纵剖（撕）菇体

尖头镊取柄盖交界处绿豆粒大的组织

放入新斜面中部种菇处理用酒精棉球（75%酒精）迅速擦拭质量检查适宜温度下培养2～4d，无杂菌生长，从组织块上长出洁白绒毛状、粗壮纯净的菌丝体步骤子实体组织分离转管法注意种块勿太大原老种块勿再接入传代次数勿太多将母种移入新的培养基过程概念过程无菌操作下接种铲取黄豆粒大、带少许培养基菌种块，

移入新斜面培养基中部，菌丝朝上方法：1、菌核表面洗净，75%酒精浸泡0.5～1min，无菌水冲洗数次；2、用无菌解剖刀将菌核从中切成两半，取黄豆粒大小组织块，接于斜面培养基中央；3、置于适宜温度下培养。（菌核组织分离茯苓（菌索组织分离方法：1、选棕红色新鲜活菌索，洗净，75%酒精浸泡0.5～1min，无菌水冲洗3次，吸干表面水分；2、用无菌剪刀剪成0.5cm小段，每支试管接入一段；3、置于适宜温度下培养。2-5菌种分离技术——孢子分离《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu孢子分离(有性繁殖）孢子

特点菌龄小

生命力强

变异率高孢子

分离法单孢分离多孢分离孢子弹射分离法孢子印分离法单孢分离显微镜操作分离法稀释法涂抹法毛细管法单孢分离多孢分离概念使许多孢子在同一培养基上，萌发后自由交配成次生菌丝的方法步骤种菇消毒采收孢子接种孢子整菇插种法

钩悬法

贴附法孢子弹射分离法种菇选择1.种菇

选择个体健壮朵形正常外表清洁无病虫害七、八分成熟的种菇2.种菇

消毒

用消毒解剖刀从菌盖下1.0-1.5cm菌柄处切除下部菌柄，用75%酒精棉球擦擦拭外表3、采收孢子

整菇插种法无菌条件下将种菇菌褶朝下，插在孢子收集器中

使孢子散落于培养皿内的方法用

前

灭

菌钩悬法1、在350ml三角瓶内，装入50mlPDA培养基，瓶口处悬挂一根“S”型的铁丝勾，灭菌冷却；2、将银耳或木耳的子实体在流水中反复冲洗数次，吸干水，剪成1cm见方的小耳片，子实层面朝下放入；3、25℃下培养24h左右，取出耳片，28-30温度下培养。贴附法4、接种孢子用接种环

蘸孢子液或孢子粉

涂布于平板上适宜温度下培养孢子印分离法2-6菌种分离技术——菇木分离《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu从生长药用菌的菇木或耳木中获得纯菌丝体的方法菇木分离1、菇木选择2、腐木块风干3、菇木的消毒4、分离部位的判断5、分离培养基的选择与处理6、分离程序：分离——接种——培养——纯化菌种分离程序：分离——接种——培养——纯化菌种2-7母种制作与培养《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu培养基制备12CONTENTS目录中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu接种与培养菌种质量鉴定3中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu培养基制备1（1）配方：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15~20g、水1000m1（2）制法：马铃薯煮沸20min，取定量滤液；滤液沸时加入琼脂，融后加余料，定容。0.11MPa下灭菌30分钟。注意：勿污管口，控制装量

母种是通过孢子分离或组织分离等方式获得，并经鉴定为种性优良、遗传相对稳定的纯菌丝体。中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShuPDA斜面培养基配制过程中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu接种与培养2（1）无菌操作下接种（2）培养7～15d母种菌丝即可长好中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu(1)接种空间一定要彻底的消毒灭菌；(2)操作人员要戴口罩，换消毒工作服，双手用75%酒精棉球消毒；(3)菌种所暴露或通过的空间必须是无菌区，菌种管口、瓶口部分、必须用酒精灯火焰封闭；(4)各种接种工具和菌种接触前都应该经火焰燃烧灭菌冷却后再接种；(5)棉塞塞入管口或瓶口部分，拔出后不要与未经灭菌的物体接触；(6)操作过程要动作迅速无误。无菌操作中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu菌种质量鉴定3（1）形态鉴定（2）长势鉴定（3）出菇（耳）试验（4）温度适应性鉴定（5）干湿性鉴定2-8原种制作与培养《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu培养基制备12CONTENTS目录中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu接种与培养菌种质量鉴定3中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu培养基制备1（1）配方：麦粒78%、棉籽壳20%、蔗糖1%、碳酸钙1%（2）制法将麦粒洗净加水浸泡4～6h至膨胀，加热煮沸20min，煮至麦粒熟而不烂（即用手掰开麦粒，内无白心），捞出沥去多余水分，再加碳酸钙、白糖拌匀。装入干净的菌种瓶内，沿四周适当压实，装至齐瓶肩为止。（3）灭菌：0.15MPa下高压灭菌2h原种是由母种扩大繁殖得到的菌种。中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu接种与培养2（1）无菌操作下接种（2）培养25～30d原种菌丝即可长好中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu菌种质量鉴定3（1）外观要求（2）代数符合要求（3）菌龄适宜（4）重量和酸碱度符合要求2-9栽培种制作与培养《药用菌生产技术》药用菌生产技术YaoYongJunShengChanJiShu培养基制备12CONTENTS目录中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu接种与培养菌种质量鉴定3中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu培养基制备1（1）配方：棉籽壳78%，麸皮20%、过磷酸钙1%、石膏1%、水适量（2）制法将上述物资按比例称好，加入过磷酸钙、石膏等辅料，加水搅拌均匀，加水量以手握指缝有水泌出但不下滴为宜。装袋时要求外紧内松，袋壁光滑。（3）灭菌：0.15MPa下高压灭菌2h栽培种是由原种扩大繁殖得到的菌种。中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu接种与培养2（1）无菌操作下接种（2）培养25～30d原种菌丝即可长好中草药栽培技术ZhongChaoYaoZaiPeiJiShu菌种质量鉴定3（1）外观要求（2）代数符合要求（3）菌龄适宜（4）重量和酸碱度符合要求（1）配方：棉籽壳78%，麸皮