动物细胞培养+高二下生物人教版（2019）选择性必修3

动物细胞培养

治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。如何解决？通过动物细胞培养构建的人造皮肤从社会中来目录01动物细胞工程02动物细胞培养03动物细胞融合04动物核移植05（基础）一、动物细胞培养1.概念：指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。2.原理：细胞增殖3.培养条件：营养条件环境条件无菌、无毒的环境、适宜的温度、pH和渗透压、适宜的气体环境糖类、氨基酸、无机盐、维生素···任务1：请结合体内细胞生活的内环境，说说体外培养动物细胞需要满足哪些条件将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。①状态：一般用液体培养基，也称培养液②成分：合成培养基＋血清人们对细胞所需的营养条件尚未研究清楚原因糖类、氨基酸、无机盐、维生素···营养条件①无菌、无毒的环境a、对培养液和所有培养用具进行灭菌b、在无菌环境下进行操作c、定期更换培养液环境条件②适宜的温度、pH和渗透压a、培养温度：36.5+0.5℃b、多数动物细胞生存的适宜pH：7.2~7.4c、细胞必须生存在等渗环境中：培养液中的无机盐可维持渗透压，如Na+③适宜的气体环境a、气体组成：O2+CO2细胞代谢必需维持培养液pHb、培养装置：培养皿或松盖培养瓶

置于CO2培养箱

95%空气和5%CO24.培养过程：取动物组织细胞悬液原代培养传代培养分瓶任务2：初步构建动物细胞培养流程图任务3：请结合培养流程，阅读课本P44-45，思考回答以下问题①取什么样的组织进行培养？为什么？②为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？用什么方法？③常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？④胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？⑤体外培养动物细胞分为两类，分为哪两类？⑥什么是细胞贴壁？⑦什么是接触抑制？⑧为什么要进行分瓶培养？⑨进行传代培养时，如何处理？取动物组织→制成细胞悬液→原代培养

→分瓶

→传代培养②为什么动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？

用什么方法？①取什么样的组织进行培养？为什么？这些细胞分化程度低，分裂能力强，容易培养。成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和繁殖。①机械的方法；②胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理。一般取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官培养取动物组织→制成细胞悬液→原代培养

→分瓶

→传代培养③常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。蛋白质④胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗，为什么？细胞膜的成分中含有蛋白质，而胰蛋白酶能够水解蛋白质，所以胰蛋白酶会把细胞消化掉。取动物组织→制成细胞悬液→原代培养

→分瓶

→传代培养取动物组织→制成细胞悬液→原代培养

→分瓶

→传代培养⑤体外培养动物细胞分为两类第1类：悬浮生长细胞细胞能够悬浮在培养液中生长增殖⑥什么是细胞贴壁悬液中大多数分散的细胞很快就贴附在瓶壁上生长增殖，这种现象称为细胞贴壁。第2类：贴壁生长细胞细胞需贴附于某些基质（如培养瓶壁）表面才能增殖（主要类型）当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，取动物组织→制成细胞悬液→原代培养

→分瓶

→传代培养⑦什么是接触抑制？这种现象称为接触抑制形成一层细胞可形成多层细胞⑧为什么要进行分瓶培养？取动物组织→制成细胞悬液→原代培养

→分瓶

→传代培养⑨进行传代培养时，如何处理？悬浮培养细胞贴壁细胞细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等出现接触抑制细胞分裂受阻分瓶培养

悬浮培养细胞

贴壁细胞

胰蛋白酶处理

制成细胞悬液分瓶培养离心法收集取动物组织用机械法和用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞加培养液细胞悬液在培养皿或培养瓶内原代培养贴壁细胞细胞分裂受阻传代培养分瓶培养细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等出现接触抑制悬浮培养细胞悬浮培养细胞

贴壁细胞

胰蛋白酶处理制成细胞悬液

分瓶培养离心法收集学习任务3：完善动物细胞培养流程图3、分布：1、概念：4、分类：电镜下的胚胎干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中包括胚胎干细胞和成体干细胞等干细胞是一类具有分裂和分化能力的细胞。2、特点：体积较小，细胞核大，核仁明显二、干细胞的培养和应用在一定条件下，可以分化成其他类型的细胞。3、分布：1、概念：4、分类：存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中胚胎干细胞

和

成体干细胞等干细胞是一类具有分裂和分化能力的细胞。2、特点：体积较小，细胞核大，核仁明显二、干细胞的培养和应用在一定条件下，可以分化成其他类型的细胞。具有发育的全能性，但涉及伦理问题移植取成纤维细胞等iPS细胞转入相关因子细胞发生转化分化胰岛细胞神经元血细胞肠上皮细胞心肌细胞病人iPS细胞用于治疗人类疾病示意图肝细胞5、诱导多能干细胞（