湖南省怀化市中方县一中高三第五次模拟考试新高考生物试卷及答案解析

湖南省怀化市中方县一中高三第五次模拟考试新高考生物试卷请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．如图为某基因型为AaBb的动物部分组织切片显微图像，下列叙述错误的是（）A．该组织切片来源于卵巢B．甲细胞中有2套遗传信息C．丙细胞基因型为AABB或AAbb或aaBB或aabbD．按分裂过程判断，图中标号的先后顺序为甲→丙→乙2．下列关于人体内激素的叙述，错误的是（）A．甲状腺产生甲状腺激素包括T3和T4B．卵巢产生雌激素包括孕激素和性激素C．胰岛产生调节血糖的激素包括胰岛素和胰高血糖素D．垂体产生促性腺激素包括促卵泡激素和黄体生成素3．RNA在生物的遗传和变异中发挥重要的作用。下列与RNA相关的叙述正确的是（）A．有细胞结构的生物遗传物质主要是DNA，少数是RNAB．mRNA可以沿着多个核糖体移动从而迅速合成大量蛋白质C．tRNA上的反密码子共有64种D．有细胞结构的生物参与翻译过程的多种RNA均由DNA控制合成4．雾霾是特定气候条件与人类活动相互作用的结果。高密度人口的经济及社会活动必然会排放大量细颗粒物（PM1．5），一旦排放超过大气循环能力和承载度，细颗粒物浓度将持续积聚，此时如果受静稳天气等影响，极易出现大范围雾霾。下列有关叙述错误的是（）A．从生态系统的成分分析，雾霾属于非生物的物质和能量B．从生态系统的信息传递分析，雾霾可作为物理信息影响种群繁殖C．从生态系统稳定性分析，雾霾说明生态系统的自我调节能力丧失D．从生态系统的保护分析，雾霾是人类生产和生活所造成的环境污染5．一种感染螨虫的新型病毒，研究人员利用放射性同位素标记的方法，以体外培养的螨虫细胞等为材料，设计可相互印证的甲、乙两组实验，以确定该病毒的核酸类型。下列有关实验设计思路的叙述错误的是A．应选用35S、32P分别标记该病毒如蛋白质和核酸B．先将甲、乙两组螨虫细胞分别培养在含同位素标记的尿嘧啶或胸腺嘧啶的培养基中C．再将病毒分别接种到含有甲、乙两组螨虫细胞的培养液中D．一定时间后离心并收集、检测病毒的放射性，以确定病毒的类型6．稻飞虱以刺吸水稻的汁液为生，成虫有短翅型和长翅型两种，长翅利于稻飞虱在水稻发育晚期迁移到适宜生存的环境。研究人员在含糖量不同的封闭环境中饲养稻飞虱若虫（幼虫），探究种群密度对成虫翅形比例的影响，结果如下图。下列说法错误的是（）A．水稻和稻飞虱共同组成生物群落B．稻飞虱属于生态系统中的消费者C．稻飞虱种群在高糖、高密度情况下迁移能力提高D．水稻与稻飞虱在相互选择中共同（协同）进化二、综合题：本大题共4小题7．（9分）猪感染猪博卡病毒会导致严重腹泻。猪博卡病毒DNA是单链，长度仅为1．2kb，但能编码4种蛋白质（NSl、NPl、VP2、VP1），该病毒DNA与编码的蛋白质对应关系如下图。（1）猪博卡病毒DNA虽短，但可以编码4种蛋白质，据图分析原因是___________。（2）基因工程制备疫苗，获取NS1基因片段采用PCR技术的目的是___________，以便于与载体DNA连接。（3）基因工程的核心步骤是___________，可用___________将目的基因导入动物细胞。若在分子水平上检测基因是否表达，可采用___________方法。（4）该基因工程制备的疫苗是否有效，个体生物学水平上的鉴定过程是：___________。8．（10分）回答下列（一）、（二）小题：（一）混菌发酵是指利用两种以上具有共同作用的微生物，联合完成某种发酵的新型技术，回答下列与发酵有关的问题。芒果挑选和清洗→打浆→___?___→加热→过滤→灭菌→果酒发酵→果醋发酵→澄清→成品芒果醋（1）某研究所打算开展芒果醋的研究，若该研究考虑混合菌发酵，则最可能选择________菌。如图为芒果醋酿造的工艺流程图，图中“?”处应填写为_________。（2）芒果醋发酵过程中需提供的氧气条件是________________________________________，影响其产物风味的原因有___________________________（至少写两点）。（3）为提高乙酸含量和缩短发酵时间，科研人员开展了酵母菌接种量对发酵影响的实验，实验结果见图：当酵母菌接种量超过1．15%时，___________明显下降，原因最可能是___________________________。（4）发酵结束后，发酵液常需进行_______________处理，若滤液还是浑浊，可采取静置沉淀、加热或___________等方法获得澄清果醋。（二）回答下列关于植物克隆方面的问题：（1）在不断搅动或摇动的液体培养基中进行的培养叫植物细胞液体悬浮培养，通过该方法可获得药用植物细胞的______________产物，如抗癌药物紫杉醇等。（2）进行培养的细胞大多数来自愈伤组织，愈伤组织通过长时期的___________培养，多个细胞之间发生了_____________差异，筛选出生长速度快、次生代谢产物积累多的细胞系。该培养基可选择含有大量元素、___________和有机物的MS基本培养基。（3）在培养方法上可选择先使用适用________________的生长培养基，然后再使用产物合成培养基。（4）如图表示某植物体内物质的合成图：由代谢过程图可知，可通过人工增加______________物质来提高C物质的产量，原理是______________。促进更多的B物质转化为C物质，也可以通过克隆酶2基因并进行________________，然后转基因构建出C物质高产细胞系。9．（10分）回答下列I、II两小题。I．抗虫的转基因植物，含有Bt蛋白，也叫毒蛋白，Bt蛋白本身其实没有任何毒性，但是鳞翅目幼虫的肠道壁上有一种特别的蛋白，喜欢与Bt蛋白结合，引起肠道壁穿孔，导致幼虫死亡。注：Cef，Carb抑菌类抗生素（1）抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关，用________________作为抗原，通过制备________________作为特异探针，对Bt蛋白表达进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有________________和________________等。（2）在农杆菌转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后，转化组织需要________________处理，据图分析，选择抗生素的________________很关键。光电比色法可用于细菌细胞密度的吸光值的测定，OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比，通常用于细菌细胞密度（OD600）测量；在测量过程中要保持溶液中的细菌处于____状态。如图可知，________________（填Cef或Carb）在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。II．回答与泡菜制作有关的问题：（1）泡菜发酵过程中的主要菌种是________________，在________________条件下，微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、________________和________________等。（2）在泡菜制作过程中________________，________________两部操作主要是为了减少杂菌，还可以采用________________，________________两种方法缩短腌制时间。10．（10分）人类胰岛素基因位于第11号染色体上，长度8416bp，包含3个外显子和2个内含子，人类胰岛素的氨基酸序列已知。回答相关问题：（1）上图是利用PCR技术获取人胰岛素基因的方法，除了此方法外，还可以利用的方法是____________。（2）利用PCR技术获取人胰岛素基因，在缓冲液中除了要添加模板和引物外，还需要添加的物质有_____________________________。（3）经过______轮循环可以得到所需的目的基因，一个DNA分子经过5轮循环，需要引物A_____个，从PCR的过程和DNA分子的特点，试着写出设计引物需要注意的问题_____、_____（答出2点即可）。（4）利用SDS-凝胶电泳分离不同DNA分子，迁移速度取决于__________________。（5）利用图示方法获取的目的基因，直接构建基因表达载体后导入大肠杆菌，（选能或不能）___________表达出人胰岛素，理由是______________________________。11．（15分）干种子萌发过程中，CO2释放量()和O2吸收量(Qo。)的变化趋势如图所示（假设呼吸底物都是葡萄糖）。回答下列问题：（1）种子在萌发过程中的0～12h之间，需要吸收大量的水分，以___细胞代谢的速率。（2）在种子萌发过程中的12～30h之间，细胞呼吸的方式有___，依据是_____。（3）胚芽出土后幼苗的正常生长还需要吸收无机盐离子。研究发现，水稻幼苗吸收大量的SiO44-，而番茄幼苗几乎不吸收SiO44-，请设计实验对这种选择性进行验证，要求写出实验思路：____。（4）实验结果表明植物对无机盐离子的吸收具有选择性，此特性与细胞膜上蛋白质的___密切相关。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

分析图：动物组织切片显微图象表明细胞正在进行减数分裂；甲处于减数第一次分裂中期、乙处于减数第二次分裂后期、丙处于减数第二次分裂前期。【详解】A、据图中乙细胞可知，细胞质不均等分裂，该动物为雌性动物，且进行减数分裂，该组织切片来源于卵巢，A正确；B、甲细胞中有2个染色体组，4套遗传信息，B错误；C、丙细胞正在进行减数第二次分裂，所以其基因型为AABB或AAbb或aaBB或aabb，C正确；D、按分裂过程判断，图中标号的先后顺序为甲→丙→乙，D正确。故选B。【点睛】本题结合图解，考查细胞的减数分裂，要求考生识记细胞减数分裂不同时期的特点，掌握减数分裂过程中染色体和DNA含量变化规律，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。2、B【解析】

甲状腺分泌两种甲状腺激素：甲状腺素（T4）和三碘甲腺原氨酸（T3）。人体内只有这两种激素含碘，T3比T4少一个碘原子。饮食中缺碘可引起甲状腺功能减退症。甲状腺激素（T3、T4）的作用遍及全身所有的器官。甲状腺激素的主要作用是促进物质代谢与能量转换，促进生长、发育。胰腺中有两类组织，一类是腺泡组织，分泌消化酶；另一类是胰岛组织，分散在腺泡组织之中，像小岛一样。胰腺中有几十万个胰岛。胰岛细胞至少可以分成五种，其中的α细胞约占细胞总数的15%~25%，分泌胰高血糖素；β细胞约占细胞总数的70%~80%，分泌胰岛素。胰岛素是由51个氨基酸形成的两条肽链所组成的蛋白质，是已知的唯一能降低血糖浓度的激素。胰岛素降低血糖的作用可归结为：（1）胰岛素促进肝细胞、肌肉细胞、脂肪细胞摄取、贮存和利用葡萄糖。（2）胰岛素还抑制氨基酸转化成葡萄糖。胰岛中α细胞分泌的胰高血糖素是由29个氨基酸组成的多肽。它的主要作用与胰岛素相反，可促进肝糖元的分解，使血糖升高，作用强烈；它还促使脂肪分解。【详解】A、由分析可知，甲状腺产生甲状腺激素包括T3和T4，A正确；B、卵巢产生的性激素包括孕激素和雌激素，B错误；C、由分析可知，胰岛产生调节血糖的激素包括胰岛素和胰高血糖素，C正确；D、垂体产生促性腺激素包括促卵泡激素和黄体生成素，两种激素分别作用于卵巢和睾丸的不同部位，D正确。故选B。3、D【解析】

翻译的模板是mRNA，原料是氨基酸，产物是多肽，场所是核糖体。【详解】A、有细胞结构的生物遗传物质是DNA，A错误；B、多个核糖体沿着一条mRNA移动，迅速合成大量的蛋白质，B错误；C、tRNA上的反密码子共有61种，C错误；D、有细胞结构的生物参与翻译过程的多种RNA（mRNA、tRNA、rRNA）均由DNA控制合成，D正确。故选D。【点睛】密码子有64种，反密码子有61种，tRNA有61种。4、C【解析】

1、雾霾的组成：二氧化硫、氮氧化物和可吸入颗粒物是雾霾的主要组成。前两者为气态污染物，它们与雾气结合在一起，让天空瞬间变得灰蒙蒙的。

1、雾霾是特定气候条件与人类活动相互作用的结果。高密度人口的经济及社会活动必然会排放大量细颗粒物（PM1.5），一旦排放超过大气循环能力和承载度，细颗粒物浓度将持续积聚，此时如果受静稳天气等影响，极易出现大范围的雾霾。【详解】A、雾霾是由于人类排放的大量细颗粒物超过大气循环能力和承载度，在特定环境下形成的，从生态系统的成分分析，雾霾属于非生物的物质和能量，A正确；B、从生态系统的信息传递分析，雾霾可作为物理信息影响种群繁殖，如影响光照强度、温度等，B正确；C、从生态系统稳定性分析，雾霾说明生态系统的自我调节能力具有一定的限度，不能说明生态系统的自我调节能力丧失，C错误；

D、由题意可知，雾霾是人类生产和生活所造成的环境污染，D正确。故选C。【点睛】本题以雾霾为信息载体，考查了生态系统的成分、结构、信息传递和全球性生态环境问题，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断。5、A【解析】根据题干信息分析，本实验的目的是确定病毒核酸的类型是DNA还是RNA，因此应该分别标记DNA和RNA特有的碱基，即分别用放射性同位素标记尿嘧啶和胸腺嘧啶，A错误；由于病毒是没有细胞结构的，必须寄生于活细胞中，因此先将甲、乙两组螨虫细胞分别培养在含同位素标记的尿嘧啶或胸腺嘧啶的培养基中，B正确；再将病毒分别接种到含有甲、乙两组螨虫细胞的培养液中，C正确；一定时间后离心并收集、检测病毒的放射性，以确定病毒的类型，D正确。6、A【解析】

1、生物群落的概念：在同一时间内、占据一定空间的相互之间有直接或间接联系的各种生物种群的集合。群落是在一定的空间内具有直接或间接关系的所有生物的综合，由一定的动物、植物和微生物种群组成。群落内的生物不同物种之间存在着种间关系，包括捕食、寄生、捕食、互利共生和竞争等。

2、生物进化的实质是种群基因频率的定向改变，不同物种之间、生物与无机环境之间是相互影响、共同发展，即共同进化，通过漫长的共同进化，形成生物多样性。【详解】群落是一定区域内的所有生物，A错误；

稻飞虱以刺吸水稻的汁液为生，属于生态系统最高的消费者，B正确；

由柱形图可知，稻飞虱在高糖、高密度情况下，短翅比例下降，长翅比例升高，因此迁移能力提高，C正确；

生物进化是共同进化，因此水稻与稻飞虱在相互选择中共同（协同）进化，D正确。

故选A。【点睛】本题旨在考查学生理解群落的概念和种间关系、生态系统的组成成分及生物进化等知识要点，把握知识的内在联系，形成知识网络，并结合题干信息进行推理、判断。二、综合题：本大题共4小题7、翻译蛋白质的基因片段存在重叠，保证了翻译蛋白质所需的对应基因长度获取限制性核酸内切酶位点基因表达载体的构建显微注射法抗原-抗体杂交让猪博卡病毒感染猪，观察其是否出现严重腹泻【解析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。从分子水平上检测目的基因的方法：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。【详解】（1）据图分析，编码VP1和VP2蛋白质的基因存在重叠片段，因此虽然猪博卡病毒DNA比较短，但是基因片段存在重叠，保证了翻译蛋白质所需的对应基因长度。（2）PCR技术扩增目的基因时需要设计引物，往往在引物设计上含有限制性核酸内切酶的位点，这样便于目的基因和载体DNA连接。（3）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，需要的酶是限制酶和DNA连接酶。通常用显微注射技术将目的基因导入动物细胞。基因表达的产物是蛋白质，因此要在分子水平上检测目的基因在受体细胞中是否成功表达，可采用抗原-抗体杂交方法。（4）从个体水平检测疫苗是否有效，直接让猪博卡病毒感染猪，观察其是否出现严重腹泻。【点睛】本题侧重考查考生的记忆和理解能力，对考生的获取信息和分析问题的能力也有所考查，需要考生能够准确识记基因工程的一般步骤，并能理解其原理。8、酵母菌和醋化醋杆酶解（或加果胶酶）先通氧一定时间，再保持无氧条件，最后再持续通氧菌种、发酵温度乙酸产量（或醋酸产量）酵母菌快速繁殖消耗过多营养物质，导致醋化醋杆菌得不到足够营养，生长受到抑制过滤离心次生代谢继代遗传性微量元素细胞生长D抑制物质B转化为物质D修饰（或加工）【命题意图】本题主要考查果酒和果醋、植物克隆等知识，意在考查学生的理解与表达能力。【解题思路】（一）（1）因为需要的产物是醋酸，原料为葡萄糖，所以需要酵母菌和醋化醋杆菌进行共同发酵；图中是为获得澄清果汁，后面有了加热处理，所以“?”处应填酶解（或加果胶酶）。（2）本研究是混合发酵，先进行果酒发酵然后是果醋发酵，根据两种发酵的菌种特点，所以发酵的氧气条件为先通氧一定时间，再保持无氧条件，最后再持续通氧；影响其产物风味的原因有菌种、发酵温度不同。（3）本实验是为了生产乙酸，所以需提高乙酸产量；据图分析可推测酵母菌快速繁殖消耗过多营养物质，导致醋化醋杆菌得不到足够营养，生长受到抑制。（4）发酵结束后，发酵液常需进行过滤处理；若滤液还是浑浊，可采取静置沉淀﹑加热或离心等方法获得澄清果醋。（二）（1）通过植物细胞培养可获得药用植物细胞的次生代谢产物。（2）植物细胞在进行继代培养过程中，细胞会发生变异，从而筛选出生长速度快、次生代谢产物积累多的细胞系；MS基本培养基含有大量元素、微量元素和有机物。（3）生长培养基是适合细胞生长的培养基。（4）据图分析可知通过人工增加D物质来提高C物质的产量；原理是抑制B物质转化为D物质，促进更多的B物质转化为C物质；也可以通过克隆酶2基因并进行修饰，然后转基因构建出C物质高产细胞系。【解析】

本研究是混合发酵，先进行果酒发酵然后是果醋发酵，根据两种发酵的菌种特点，所以需要酵母菌和醋化醋杆菌进行共同发酵，发酵的氧气条件为先通氧一定时间，再保持无氧条件，最后再持续通氧；影响其产物风味的原因有菌种、发酵温度不同。据图分析可知通过人工增加D物质来提高C物质的产量；原理是抑制B物质转化为D物质，促进更多的B物质转化为C物质；也可以通过克隆酶2基因并进行修饰，然后转基因构建出C物质高产细胞系。【详解】（一）（1）因为需要的产物是醋酸，原料为葡萄糖，所以需要酵母菌和醋化醋杆菌进行共同发酵；图中是为获得澄清果汁，后面有了加热处理，所以“?”处应填酶解（或加果胶酶）。（2）本研究是混合发酵，先进行果酒发酵然后是果醋发酵，根据两种发酵的菌种特点，所以发酵的氧气条件为先通氧一定时间，再保持无氧条件，最后再持续通氧；影响其产物风味的原因有菌种、发酵温度不同。（3）本实验是为了生产乙酸，所以需提高乙酸产量；据图分析可推测酵母菌快速繁殖消耗过多营养物质，导致醋化醋杆菌得不到足够营养，生长受到抑制。（4）发酵结束后，发酵液常需进行过滤处理；若滤液还是浑浊，可采取静置沉淀﹑加热或离心等方法获得澄清果醋。（二）（1）通过植物细胞培养可获得药用植物细胞的次生代谢产物。（2）植物细胞在进行继代培养过程中，细胞会发生变异，从而筛选出生长速度快、次生代谢产物积累多的细胞系；MS基本培养基含有大量元素、微量元素和有机物。（3）生长培养基是适合细胞生长的培养基。（4）据图分析可知通过人工增加D物质来提高C物质的产量；原理是抑制B物质转化为D物质，促进更多的B物质转化为C物质；也可以通过克隆酶2基因并进行修饰，然后转基因构建出C物质高产细胞系。【点睛】熟练掌握果酒和果醋的制作流程及相关菌种的生存条件，发酵条件的控制等，正确解读题目信息对相关问题进行解答；明确植物培养过程及应用，提取题目中有用信息进行解答。9、Bt蛋白单克隆抗体农秆菌转化法基因枪法脱菌种类和浓度悬浮Carb假丝酵母和乳酸菌无氧醇类物质亚硝酸（HNO2）热水洗坛壁两次加白酒入坛前用开水浸泡一下蔬菜加入腌制过的泡菜汁【解析】

1.光电比色法是通过测量菌悬液的光密度（OD600）值来估算细菌数，吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比。据图可知，浓度为300mg/L时两种抗生素都可以完全抑制农杆菌的生长，所以头孢霉素（Cef）和羧苄青霉素（Carb）对农杆菌都有很好的抑制效果。2.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。3.制作泡菜的实验原理：

（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。

（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。

温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。

（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。【详解】I．（1）抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关，可用Bt蛋白作为抗原，通过制备单克隆抗体作为特异探针，利用抗原-抗体杂交方法对Bt蛋白表达量进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和基因枪法等。（2）在农杆菌转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后，转化组织需要脱菌处理，选择合适的抗生素和使用的抗生素浓度是实验成败的关键。光比色法可用于细菌细胞密度的测定，在测量过程中要保持溶液中的细菌处于悬浮状态。分析图示可知，Cef（头孢霉素）和Carb（羧苄霉素）两种抗生素对农杆菌有很好的抑制效果；当Carb浓度为50mg/L时，OD600几乎降为0，即细菌细胞数目为0，说明抗生素Carb浓度为50mg/L时可以完全抑制农杆菌的生长，Carb在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。II．（1）泡菜发酵过程中的主要菌种是假丝酵母和乳酸菌；在无氧条件下，微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、醇类物质和亚硝酸（HNO2）等。（2）在泡菜制作过程中热水洗坛壁两次（去除杂菌）、加白酒（抑制杂菌生长）两部操作主要是为了减少杂菌污染；还可以采用入坛前用开水浸泡一下蔬菜（杀死植物细胞）、加入腌制过的泡菜汁（可以提供菌种）两种方法缩短腌制时间。【点睛】本题考查基因工程及泡菜制作的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题；了解基因工程技术的相关应用和泡菜制作的应用，能结合所学的知识准确作答。10、从基因文库获取或人工合成四种脱氧核苷酸（dNTP）和热稳定DNA聚合酶（Taq酶）331引物自身不能有互补序列引物之间不能有互补序列DNA分子的大小不能因为此方法获得的目的基因中含有内含子，大肠杆菌无法正常识别内含子而对内含子部分转录的mRNA进行翻译，导致合成的蛋白质出现错误【解析】

根据题干信息和图形分析，基因工程的基本步骤包括目的基因的获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达；图示目的基因为人类胰岛素基因（位于11号常染色体上），其通过PCR技术进行扩增，需要A、B两种引物；PCR扩增目的基因的过程包括变性、退货、延伸。【详解】（1）获取目的基因的方法除了PCR技术，还有从基因文库获取或人工合成。（2）用PCR技术扩增目的基因（人胰岛素基因）时，所需的条件有引物、模板(目的基因或人胰岛素基因)、原料(4种脱氧核糖核苷酸)和热稳定DNA聚合酶（Taq酶）等。（3）根据PCR过程和D