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紫外可见分光光度计*1基本知识姓名:于贝贝学号:662085216150学院:先进化学制造研究院紫外-可见分光光度法*2紫外的发展史仪器的原理仪器组成固体紫外与液体紫外的区别紫外应用实例发展简史*31、早在1665年,牛顿首次通过分光光度法发现太阳光是复合光的事实。2、1815年夫琅和费(J.Fraunhofer)仔细观察了太阳光谱,发现太阳光谱中有600多条暗线,并且对主要的8条暗线标以A、B、C.D…H的符号。这就是人们最早知道的吸收光谱线,被称为“夫琅和费线”。3、朗伯(Lambert)早在1760年就发现物质对光的吸收与物质的厚度成正比,后被人们称之为朗伯定律;比耳(Beer)在1852年又发现物质对光的吸收与物质浓度成正比,后被人们称之为比耳定律。在应用中,人们把朗伯定律和比耳定律联合起来,又称之为朗伯—比耳定律。4、1859年本生(R.Bunsen)和基尔霍夫(G.Kirchhoff)发现由食盐发出的黄色谱线的波长和“夫琅和费线,;中的D线波长完全一致,才知一种物质所发射的光波长(或频率),与它所能吸收的波长(或频率)是一致的。5、1862年密勒(Miller)应用石英摄谱仪测定了一百多种物质的紫外吸收光谱。他把光谱图表从可见区扩展到了紫外区,并指出:吸收光谱不仅与组成物质的基团质有关。6.美国Beckman公司于1945年,推出世界上第一台成熟的紫外可见分光光度计商品仪器*4发展简史紫外-可见分光光度法*5紫外的发展史仪器的原理仪器组成固体紫外与液体紫外的区别紫外应用实例基本原理它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用,对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。按所吸收光的波长区域不同,分为紫外分光光度法和可见分光光度法,合称为紫外-可见分光光度法。*6基本原理----朗伯-比尔定律一、吸光度和透光度设入射光强度为I0,吸收光强度为Ia,透射光强度为It,反射光强度为Ir,则I0=Ia+It+Ir由于反射光强度很弱,其影响很小,上式可简化为:I0=Ia+It*7吸光度:为透光度倒数的对数,用A表示,即A=lg1/T=lgI0/It*8透光度:透光度为透过光的强度It与入射光强度I之比,用T表示:0即T=I/It 0二、朗伯-比尔定律•朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即*9•A=
κ
cl式中比例常数κ与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。紫外-可见分光光度法*10紫外的发展史仪器的原理仪器组成固体紫外与液体紫外的区别紫外应用实例0.575光源单色器检测器显示基本组成--单光束分光光度计光源:提供符合要求的入射光。要求:在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱,具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。吸收池❏单色器:将光源发射的复合光分解成连续光谱并可从中选出任一波长单色光的光学系统。11❏ 检测器:利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。❏吸收池:又叫比色皿,用于盛放待测溶液和决定透光液层厚度的器件。吸收池*12❏主要有石英吸收池和玻璃吸收池两种。❏在紫外区须采用石英吸收池,可见区一般用吸收玻璃池。❏主要规格0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm和5.0cm注意事项:手执两侧的毛面,盛放液体高度四分之三。紫外-可见分光光度法*13紫外的发展史仪器的原理仪器组成固体紫外与液体紫外的区别紫外应用实例固体紫外与液体液紫体紫外外区别固体紫外仪器组成无积分球有积分球测量参数吸光度漫反射所测样品液体样品悬浊样品和不透明类样品*14固体紫外与液体紫外区别---仪器构成*15积分球的原理:积分球是紫外可见分光光度计最为重要的附属装置,由于积分球的使用,大大扩展了光度计可以测定的样品形态和种类,比如悬浊样品和不透明类样品。分析测试中心的紫外-可见分光光度计(U-3310)配置的积分球装置如图所示:光线由输入孔入射后,光线在此球内部被均匀的反射及漫射,因此输出孔所得到的光线为相当均匀之漫射光束。而且入射光之入射角 、空间分布、及极化皆会对输出之光束强 及均匀度造成影响[1]。*16积分球的基本工作原理双光束积分球式分光光度测试仪有两个光栅和两个检测器。测量时光源只闪一次,同样测样品和参比白。这样就克服了系统变化所带来的误差,测量数据的精度非常高。固体紫外与液体紫外区别---积分球*17紫外-可见分光光度法*18紫外的发展史仪器的原理仪器组成固体紫外与液体紫外的区别紫外应用实例固体紫外实例--60nm的金颗粒负载在聚合物中*19液体紫外应用实例--40nmAuNPs的uv数据*20(55nm,534.2nm)528.2nm波长对应金颗粒的粒径为40nm左右*
21液体紫外应用实例--40nmAuNPs的uv数据[2]不同粒径的金颗粒*22参考文献*23王高明,郭城,张亮亮等.积分球光能均匀性的MonteCarlo模拟[J].微光与红外,2009,39(1):67-69
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