葡萄籽-菊花-三七复合物的急毒、遗传毒性及长期毒性研究

背景介绍近年来，对天然活性资源的开发和利用受到越来越多的关注，葡萄、菊花和三七在我国资源丰富。研究发现，葡萄、菊花和三七的活性提取物具有种类繁多、功效多样的特点。葡萄籽提取物中含有大量的多酚类、脂质和矿物类物质，具有抗衰老、抗疲劳、抗糖化、抗肿瘤、抑制动脉硬化以及降血压和降血脂等作用。菊花为菊科植物菊的干燥头状花序，其主要活性物质包括黄酮、多糖、多酚及挥发油等，具有抗菌、消炎、清除活性氧自由基、降低血液中胆固醇和脂肪的含量、增强人体免疫力、延缓衰老及改善心肌营养等功效。近年来药理研究发现，三七总皂苷不仅能够增强机体免疫力、保护心血管系统、神经系统，并且在降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老等方面同样具有药理活性。文章亮点1.以葡萄籽-菊花-三七复合物为研究对象，依据食品安全性毒理学评价程序和方法（GB15193-2014）进行急毒、遗传毒性以及长期毒性评价，为三者复配的安全应用提供实验参考。2.经过动物实验可知，葡萄籽-菊花-三七复合物无可见毒副作用，具有较高的食用安全性。内容简介1

实验部分1.1

急性经口毒性试验选取健康昆明小鼠20只，体重18~22g，雌雄各半。参考食品安全国家标准GB15193.3-2014进行急性经口毒性试验。1.2

细菌回复突变试验试验参照食品安全国家标准GB15193.4-2014进行细菌回复突变试验。1.3

红细胞微核试验试验参照食品安全国家标准

GB15193.5-2014进行哺乳动物红细胞微核试验。1.4

小鼠精母细胞染色体畸变试验以及食品安全国家标准GB15193.8-2014

进行小鼠精母细胞染色体畸变试验。1.5

28

d喂养试验试验参照赵立芸等[24]文献进行。2

结果与讨论2.1

小鼠急性经口毒性试验采用大剂量（15.0g/kg·BW）的葡萄籽-菊花-三七复合物对小鼠经口灌胃，检测受试物对小鼠的急性经口毒性。实验组雌雄对半，结果显示，所有小鼠在试验期间状态良好。急性毒性试验前后，葡萄籽-菊花-三七复合物对雌雄两组小鼠体重及死亡情况的影响列于表1。表1

葡萄籽-菊花-三七复合物的小鼠急性经口毒性试验结果2.2

遗传毒性试验2.2.1

细菌回复突变试验对TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535这5种标准突变菌株进行细菌回复突变试验，TA97、TA98和TA100可检测移码突变，TA1535和TA102可检测碱基对置换，分别从不同角度判定葡萄籽-菊花-三七复合物的致基因突变性。2.2.2

红细胞微核试验红细胞微核试验可通过检测细胞质内残存染色体或染色单体的细胞数量（即嗜多染红细胞数量）来计算红细胞微核率，从而检测受试物的遗传毒性。试验期间，各剂量组和对照组的小鼠均未观察到不良反应或者死亡现象，试验结果如表2所示。表2

葡萄籽-菊花-三七复合物对小鼠红细胞微核试验结果注2.2.3

小鼠精母细胞染色体畸变试验小鼠精母细胞染色体畸变试验中，将葡萄籽-菊花-三七复合物经口连续灌胃给药5d，并持续正常喂养8d后，在小鼠腹腔注射秋水仙素，抑制细胞内微管的形成，从而将细胞阻断在分裂中期，观察并统计性染色体单价体、常染色体单价数及染色体畸变数来评价葡萄籽-菊花-三七复合物对雄性生殖细胞的致突变性。2.3

28

d喂养试验葡萄籽-菊花-三七复合物设3个剂量组（4.0、2.0和1.0g/kg·BW）对雌、雄SD大鼠进行28

d喂养试验，以评估葡萄籽-菊花-三七复合物的食用安全性。3

结论本研究葡萄籽提取物采用醇提方式得到，原花青素含量为95%，菊花提取物、三七提取物均采用水提方式得到。将三者