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文档简介
v 1 4 4 9 关于本手册本手册所述信息旨在为操作人员提供指导操作人员必须具备免疫磁珠分离(IMS)的理论知识及实验室操作经验。请特别注意用户预期用途DynaMagCTS磁力架是适合与Dynabeads磁珠结合使用的磁性设备,可用于中等至大规模的细胞分离。可以在无菌封闭系统中进行靶细胞的阳性分离或去除不想要的细接下页一个底座装置,带有溶液杆,可容纳含有填装和冲洗溶液的袋子;以及一块伸缩板,可容纳含有(捕获磁珠结合细胞后)残留细胞的袋子。图中的标准血袋和导管旋转装置图1.DynaMagCTS磁力架概述7.磁角测量仪图2.DynaMagCTS磁力架详细介绍底座装置底座装置(1)支撑旋转装置(2)和溶液杆(3),用伸缩板底座装置下方的伸缩板(4)提供了额外的空间,可容纳至多3kg的袋子。水平放置袋子可以减轻2主磁体主磁体包括一排磁性极强的钕铁硼永磁体。磁体排列已经过优化,具有高场强和磁场梯度,可介绍了采用同类磁珠分离系统对较大体积样本进行连续流动分离的步骤[参考文献2主磁体可与旋转装置拆分,如果需要冷分离,则可以置于冰箱内。参阅“连接和拆分主磁体”袋的下方或上方(图9,第7页)。当磁体位于样本袋上方时,磁珠-细胞复合物会在重力作用下移主磁体由透明的有机玻璃盖保护。嵌入盖子的铁板可以在磁力作用下对样本袋施加压力。此开/关把手磁体柄注:磁体的场强随磁体表面距离呈指数型下降。在特定的应用中,如果场强过高,则可通过在接下页主磁角测量仪通过旋转底座并倒置主磁体,可使主磁体位于无菌袋的下方或上方。磁体可以逆时针倾斜–15°磁角测量仪磁体固定销次级磁体由单个的钕铁硼磁体组成,方向与柱的轴平行。采用特定的配置,由非磁性材料将单个磁体相互隔开,确保流穿系统中的磁性捕获的优化(即较大的表磁性导管夹4接下页滚轴导轨拉磁体固定销推5打开和关闭主磁体盖按照下列步骤打开主磁体盖。反向操作关闭主磁体盖。l抬拉l抬拉开/关把手铁板接下页6注意:当盖子打开时,切勿转动主磁体。固定销头可能会撞到旋转装置,损坏盖子。确保盖子1123推23推接下页7珠-细胞复合物在磁力作用下与重力呈反向移动,避免了非特异性的细胞捕获。注:开始该过程1.取下次级磁体2.倾斜主磁体94.转动旋转装置180°。5.活接下页8•生物材料应作为具有潜在传染性的物质进行处理,在清洁过程中9免疫磁珠分离(IMS)的将Dynabeads加入血袋中,与样本一可直接或间接进行细胞分离:图11显示了直接细胞分离图11显示了直接细胞分离。将Dynabeads磁珠加入无菌袋的细胞群体中。在短在阳性分离中,磁珠结合的细胞被用于下游应用领域。采用去除磁珠,弃去不想要的细胞类型,将余下的未结合细胞用于下将磁珠结合的细胞保留在第一个袋子将未结合(无磁珠)细胞排入第二个袋接下页磁珠分离的说明(续)磁珠分离磁珠分离采用无菌技术完成所有步骤。可与DynaMagCT主袋中容纳包含Dynabeads磁珠的样本和在主磁体中分离的细胞。主磁体吸引并保留磁珠-细胞复合物,而无磁珠的细胞悬液则从主磁体进入采集袋。离开主袋的所有液体先通过次级磁体,然后进入采集袋。用填装和冲洗溶液注满与袋子相连的导管,排出空气后再分离。分离后,用接下页3.确保连接管路上的所有管路磁夹和滚轴磁夹均已关闭。将含有填装和冲洗溶液的袋子悬挂在磁珠结合细胞的分离12.打开磁体盖,取出主袋。打开填入主袋内。轻轻重悬磁珠-细胞复合物。使用与初始磁珠捕获的效率取决于磁珠的大小和铁含量,以及样本的粘度。由于条件差异,我们建议每位研究人员已经在大鼠中研究了Dyna
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