DB6109T 2.5-2024 镇坪乌鸡养殖技术规程 第5部分：白血病净化

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6109安 康 市 地 方 标 准DB6109/T2.5-2024镇坪乌鸡养殖技术规程第5部分：白血病净化2024-07-10发布 2024-08-12实施安康市市场监督管理局 发布DB6109/T2.5-2024DB6109/T2.5-2024DB6109/T2.5-2024DB6109/T2.5-2024目 次前言 Ⅱ范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1鸡白血病 13.1 鸡白血病净化 1雏鸡胎粪检测与淘汰 1样品采集 1样品处理 1样品检测 1淘汰 1育成期检测与淘汰 1样品采集 1样品检测 2淘汰 2开产初期检测与淘汰 2样品采集 2样品处理 2样品检测 2淘汰 2留种前检测与淘汰 2种蛋选留与孵化 2种蛋选留 2种蛋孵化 2净化周期与终止 3净化周期确定 3净化效果评估 3达到净化鸡群的检测比例调整 3净化状态维持措施 3禽白血病净化维持监测 3疫苗使用 3I前 言本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件是DB6109/T2《镇坪乌鸡养殖技术规程》的第5部分。DB6109/T2《镇坪乌鸡养殖技术规程》已发布了以下部分：——第1部分：种鸡饲养；——第2部分：种蛋孵化；——第3部分：人工授精；——第4部分：生态养殖；请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由镇坪县农业农村和水利局提出。本文件由安康市农业农村局归口。本文件起草单位：镇坪县畜牧兽医中心、西北农林科技大学。本文件主要起草人：任远明、梁小军、陈勇、郭金彩、米登菊、周鹏来、李万富、何安奎、李奎、谭余辉、袁胜海、冯艳、陈远红、张红霞、刘松、杨红玲、陈凤、敖显配、陈贵攀、杨少鹏、王文凯、王丹、周玚。联系信息如下：单位：镇坪县畜牧兽医中心电话址：陕西省安康市镇坪县城关镇上新街佳华大厦3楼邮编：725699II镇坪乌鸡养殖技术规程第5部分：白血病净化范围规范性引用文件GB/T26436 禽白血病诊断技术NY/T680 禽白血病病毒p27抗原酶联免疫吸附试验方法中国兽药典（2020年版）术语和定义下列术语和定义适用于本文件。鸡白血病由禽白血病病毒引起的慢性传染性肿瘤病，也叫做鸡淋巴细胞白血病，俗称“大肝病”。鸡白血病净化雏鸡胎粪检测与淘汰样品采集将每只母鸡的种蛋作好标记，孵化至18d，转移至专用出雏器中出雏，胚蛋置于独立盒中出雏，作好标记，并单独收集雏鸡胎粪。样品处理离心管中预先加入0.6mL样品稀释液，将雏鸡胎粪挤压于其中，充分震荡混匀。放入液氮中快速冷冻后取出，放入25℃～37℃水浴中融化，反复冻融三次。离心，取上清液。样品检测按照NY/T680的规定执行；或采用等效的商品化酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测；或采用针对禽白血病病毒p27抗原的单克隆抗体建立的胶体金试纸条检测。淘汰抗原阳性雏鸡与同母雏鸡淘汰。1每只公鸡受精2只以上母鸡的后代为阳性，该公鸡所有后代淘汰。上述4.4.1和4.4.2涉及到公鸡母鸡一同淘汰。经上述淘汰后留下的阴性雏鸡，维持小群隔离饲养。育成期检测与淘汰样品采集无菌采集血清0.5mL；或静脉血1mL（加入肝素钠抗凝）。样品检测血清按照PCR-HRM方法检测；全血按照GB/T26436规定执行。淘汰阳性立即淘汰。开产初期检测与淘汰样品采集母鸡分别取初产蛋2个～3个，每个鸡蛋分别采集稀蛋清1mL；或采集静脉血1mL（加入肝素钠抗凝）；或采集血清0.5mL。公鸡采集静脉血1mL（加入肝素钠抗凝）；或采集血清0.5mL；或采集精液0.1mL。样品处理蛋清反复冻融三次；静脉血12h内用血浆分别接种DF-1细胞,培养7d～9d后取细胞培养上清液。样品检测母鸡蛋清、静脉血按照NY/T680规定检测；血清用PCR-HRM方法检测。公鸡血清或精液用PCR-HRM方法检测；静脉血按照按照GB/T26436规定执行。淘汰阳性立即淘汰。留种前检测与淘汰采样、检测方法同5.1、5.2；阳性立即淘汰；组建家系，收集种蛋入孵。种蛋选留与孵化种蛋选留按照第4、第5、第6章规定检测阴性留种；每只公鸡固定相应母鸡进行人工授精；收集的种蛋作好标记。种蛋孵化按照DB6109／T2.2-2024《镇坪乌鸡养殖技术规程第2部分：种蛋孵化》执行。2净化周期与终止净化周期确定根据种鸡所处育种时期，对照本文件第4、第5、第6章的任何一个环节启动净化程序。不同种鸡场可根据其技术条件分别选择本文件第4、第5、第6章的任何一个环节进行检测。456章规定的程序实施下一世代的检测和净化。净化效果评估按照《动物疫病净化示范场评估标准（试行）》（2021版）要求执行。达到净化鸡群的检测比例调整评估达标的原种场，无需进行普遍性检测，按照不低于10%的比例进行抽样监测。评估不达标的原种场，按照本文件第4、第5、第6章的要求，重新进入检测净化程序。净化状态维持措施禽白血病净化维