免疫组化与分子病理检测技术在淋巴组织肿瘤中的临床病理应用

免疫组化与分子病理检测技术

在淋巴组织肿瘤中的临床病理应用2024/7/28DirectionofantigeninfluxMantlezonethickeratthetop("corona")LightzoneofgerminalcenterDarkzoneofgerminalcenter(morelargecells)淋巴结良性增生淋巴结反应性增生

滤泡增生

副皮质区增生

窦组织细胞增生淋巴结特殊感染原因不明的淋巴结增生性病变淋巴结的特殊性的良增生性病变猫抓病性淋巴结炎淋巴结结核淋巴结结节病传染性单核细胞增多症组织细胞坏死性淋巴结炎皮病性淋巴结炎巨大淋巴结增生症(castleman病)巨大淋巴结病性窦组织细胞增生症（Rosai-Dorfman病）Castleman病透明血管型（单发型）：良性浆细胞型：潜在恶性多中心型（或系统型）：潜在恶性恶性淋巴瘤的概念恶性淋巴瘤是一种常见的肿瘤，约占全部恶性肿瘤的10%。在儿童和年轻人中是仅次于急性白血病的第二种最常见的恶性肿瘤。在中老年，淋巴瘤的发病较儿童与年轻人更为多见。恶性淋巴瘤的概念恶性淋巴瘤是来自免疫系统的免疫细胞的肿瘤，即淋巴样系统的肿瘤，尤其指淋巴细胞和它们的前体，T/NK细胞，B细胞或者null细胞的肿瘤的总称。淋巴瘤可以看成是被阻断在B细胞和T/NK细胞分化过程中某一阶段淋巴细胞的克隆性增生所致。肿瘤细胞再现其正常对应细胞的形态和功能特征。恶性淋巴瘤与其他血液系统

肿瘤的关系恶性淋巴瘤与淋巴白血病存在某些重叠，恶性淋巴瘤指的是初始时局限性的，在大体上表现为肿瘤结节的恶性过程。而系统性和弥漫性的肿瘤性淋巴样增生包括在淋巴白血病中。恶性淋巴瘤可分为两个大的范畴：Hodgkin淋巴瘤（HL）和非Hodgkin淋巴瘤（NHL）。两者均可再分为多少不等的亚型。2024/7/28HL分类霍奇金淋巴瘤（霍奇金病）HL（HD）结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤经典型霍奇金淋巴瘤结节硬化型霍奇金淋巴瘤富于淋巴细胞的经典霍奇金淋巴瘤混合细胞型霍奇金淋巴瘤淋巴细胞减少型霍奇金淋巴瘤2008WHO分类

（一）NHL分类

前体成熟（外周）

B细胞淋巴母细胞成熟（外周）B细胞肿瘤白血病/淋巴瘤

T细胞淋巴母细胞成熟（外周）T和NK细胞肿瘤白血病/淋巴瘤2008年前体淋巴性肿瘤1、B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤，非特殊类型2、B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤伴重现性遗传学异常

－B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤伴t(9:22)(q34;q11.2);BCR/ABL

－B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤伴t(v;11q23);MLLrearranged，－B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤伴t(v;11q23);MLLrearranged(ETV6-RUNX1)

－B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤伴超二倍体

－B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤伴低二倍体－B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤伴t(5;14)(q31;q32)(IL3-IGH)

－B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤伴t(1;19)(q23；p13.3);(E2A-PBX1;TCF3/PBX1)，

3、T-淋巴母细胞白血病/淋巴瘤成熟B细胞淋巴瘤1、慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤2、B-前淋巴细胞性白血病3、脾边缘带淋巴瘤4、毛细胞白血病5、脾淋巴瘤/白血病，不能分类6、淋巴浆细胞淋巴瘤7、重链病8、浆细胞骨髓瘤/浆细胞瘤9、结外粘膜相关淋巴组织边缘区B细胞淋巴瘤（MALT淋巴瘤）10、原发皮肤滤泡中心淋巴瘤11、滤泡性淋巴瘤

－胃肠道滤泡性淋巴瘤

－儿童滤泡性淋巴瘤

－“原位”滤泡性淋巴瘤12、结内边缘区B细胞淋巴瘤13、套细胞淋巴瘤

14、弥漫大B细胞淋巴瘤

－弥漫大B细胞淋巴瘤，非特殊类型

富于T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤

原发皮肤大B细胞淋巴瘤，腿型老年人EBV阳性的弥漫大B细胞淋巴瘤原发中枢神经弥漫大B细胞淋巴瘤

—慢性炎症相关的弥漫大B细胞淋巴瘤

－脓胸相关淋巴瘤

－慢性骨髓炎相关淋巴瘤

－植入物相关淋巴瘤

－淋巴瘤样肉芽肿

－原发纵膈（胸腺）大B细胞淋巴瘤

－血管内大B细胞淋巴瘤

－

－浆母细胞性淋巴瘤

－原发渗漏性淋巴瘤

－ALK阳性弥漫大B细胞淋巴瘤

－起源于HHV8阳性的多中心Castlema病的大B细胞淋巴瘤15、伯基特淋巴瘤16、介于弥漫大B细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤之间的不能分类的B细胞淋巴瘤17、介于弥漫大B细胞淋巴瘤和经典霍奇金淋巴瘤之间的不能分类的B细胞淋巴瘤

成熟T/NK细胞淋巴瘤1、T前淋巴细胞白血病2、T大颗粒淋巴细胞白血病3、慢性NK细胞淋巴增殖性疾患4、侵袭性NK细胞白血病5、成人T细胞白血病/淋巴瘤6、EBV相关的克隆性淋巴组织增殖性疾患（儿童）

－儿童系统性EBV阳性T细胞增殖性疾病（与慢性活动性EBV感染相关）

－种痘水疱病样淋巴瘤7、结外NK/T细胞淋巴瘤，鼻型8、肠病相关T细胞淋巴瘤9、肝脾T细胞淋巴瘤10、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤11、蕈样霉菌病12、赛塞里综合征13、原发皮肤间变性大细胞淋巴瘤14、原发皮肤侵袭性嗜表皮CD8阳性细胞毒性T淋巴瘤15、原发皮肤

细胞淋巴瘤16、原发皮肤小/中CD4阳性T细胞淋巴瘤17、外周T细胞淋巴瘤，非特殊类型18、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤19、ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤20、ALK阴性间变性大细胞淋巴瘤

TherelativefrequenciesofHLandNHLsTotalnumberofcases:10002准确诊断淋巴组织肿瘤的重要性淋巴瘤存在许多亚型不同亚型淋巴瘤的预后不同不同亚型淋巴瘤的治疗不同，对治疗的反应亦不同准确诊断淋巴瘤比较困难2024/7/28淋巴组织肿瘤的诊断要素临床表现组织学特征免疫表型特征（免疫组化/流式细胞术）分子和分子遗传学改变2024/7/28流式细胞术免疫组化快速(数小时)较快(1-2天)定量半定量冲洗细胞表面Ig所致的背景着色同时进行多种表型检测双重染色形态学联系受限(仅限于细胞大小)结构和细胞形态相联系判读困难易于判读PossiblelossofcellviabilityNosuchproblem2024/7/28免疫组化在淋巴组织肿瘤诊断中的作用评估增生细胞的来源：T?B?NK?转移性？检测增生细胞的克隆性：kappa,lambda某些淋巴瘤的确诊：SOX11,cyclinD1-套细胞淋巴瘤CD30,CD15-霍奇金淋巴瘤TDT-淋巴母细胞性淋巴瘤（绝大多数）治疗指导：ALK-1,CD20,cyclinD12024/7/28PrepreBcellPreBcellImmatureBcellMatureBcellActivatedBcellPlasmacellPrecursorcells;antigenindependentantigenindependentGerminalcenter&postGCcells;antigendependentTdTCD20,CD22CD19,PAX5CD79aCD10Bcl-6CD138CytoplasmicCD22WithacknowledgementtoDr.

JohnK.C.Chan,HongKong2024/7/28ProthymocyteSubcapsularthymocyteCorticalthymocyteMedullarythymocytePeripheralTcellPrecursorcellsMatureTcellsCytoplasmicSurfaceCD4CD8CD1CD4,CD8CD3CD2CD7TdTWithacknowledgementtoDr.

JohnK.C.Chan,HongKong2024/7/282024/7/28LCA/CD452024/7/282024/7/28WithacknowledgementtoDr.

JohnK.C.Chan,HongKong2024/7/28B细胞异常的免疫表型免疫球蛋白轻链限制性表达B细胞异常表达CD5CD43CyclinD1生发中心细胞表达Bcl-2表达不成熟细胞标记TdTTointerpretaberrantstaining,needtocomparewithacorrespondingCD3stain2024/7/28B细胞淋巴瘤的异常免疫结构B细胞滤泡

(CD20+)弥漫成片的

CD20+B细胞*WithacknowledgementtoDr.

JohnK.C.Chan,HongKong2024/7/28WithacknowledgementtoDr.

JohnK.C.Chan,HongKong2024/7/28CD202024/7/28KappaLambda2024/7/28

DecisionTreeforIHCClassificationofDLBCLHansetal,Blood20042024/7/28T细胞异常免疫表型异常表达亚群标记：CD4+CD8+orCD4-CD8-丢失全T细胞标记

CD2,CD3,CD5,CD7异常表达正常时不应表达或仅少数T细胞表达的标记ALK,CD56,gamma-delta-Tcellreceptor表达不成熟细胞标记

TdT2024/7/28小结：淋巴造血组织石蜡切片中常用抗体B细胞：CD20(CD79a,PAX-5)T细胞：CD3(CD45RO,CD2)NK细胞：CD56髓系：Myeloperoxidase滤泡中心细胞：CD10(orbcl-6)正常套区细胞：IgD2024/7/28浆细胞：CD20-,CD138+(Oct-2,Bob.1)组织细胞：CD68(PGM1>KP1)滤泡树突状细胞：CD21+CD35Langerhans细胞：S100,CD1a细胞毒性标记：TIA-1,粒酶B,穿孔素滤泡性淋巴瘤或反应性滤泡增生:Bcl-2小结：淋巴造血组织石蜡切片中常用抗体2024/7/28前体淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤:TdTB-CLL:CD5,CD23套细胞淋巴瘤:CyclinD1滤泡淋巴瘤:CD10(orbcl-6)Burkitt淋巴瘤:Ki67(~100%)血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤:CD10,CXCL-13;滤泡树突状细胞标记(滤泡外的网状结构)间变大细胞淋巴瘤:CD30,ALK小结：淋巴造血组织石蜡切片中常用抗体2