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文档简介
1规模化羊场绵羊支原体肺炎诊断及免疫技术规程本文件规定了规模化羊场绵羊支原体肺炎诊断及免NY/T2835奶山羊饲养管理技术规范NY/T3052舍饲肉羊饲养管理技术规范3.1绵羊肺炎支原体mycoplasmaovi约125nm~500nm,无细胞壁。Mo合成能力差,3.23.3聚合酶链式反应polymerasechain一种级联反复循环的DNA合成反应过程。一般由三个步骤组成:模板的热变性,寡核苷酸引物复性23.4机体抵抗力下降的羊更易感染。绵羊肺炎支原体在自然条件下可以通过空气-飞沫(气溶胶)传染,引发传染性胸膜肺炎。病畜通过咳嗽、打喷嚏、一年四季都发,其中夏末和冬季频发。环境拥挤等因素容易引起传染的发生。发病率因地域和养殖模式而有所不4.2临床症状减退等症状。有的病羊有腹胀、腹泻、口腔溃疡、腰背拱起等症状4.3病理变化肺脏与胸腔粘连,出现胸腔积液。尖叶病变严重,心叶和膈叶次之,其他器官的病变不明显。无菌条件下取样,在肺组织病变与正常组织交界处,取3cm3~5cm3大小的组织样本,冷藏条3在表层消毒后,在病变和正常组织交界处取米粒至绿豆大小深层肺组织置于玻璃匀浆器中,加入3),体变为橙红色,取1mL培养产物转入10mL培养基中,传代培养,盲传三代后,取3mL培养液提取基因45.3PCR检测PCR仪,电炉,离心机,混匀器,微量可调移液器,1.5mL离心管,PCR反应管,核酸电泳仪,凝5体,1M硫酸溶液。除另有规定,所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682分离鉴定并经测序确定为绵羊肺炎支原体的菌液制备全菌灭活抗原,并用其免疫3月龄羔羊制备标绵羊肺炎支原体菌液100mL,4℃12000rpm离心30min,弃上清,取沉淀。将菌体沉淀用0.1MpH7.4的PBS缓冲液洗涤3次,用5mLPBS重悬。菌体重悬液超声裂解,4℃集上清,即为绵羊肺炎支原体全菌抗原。用BCA法测定蛋白质浓度,将抗原冻存于-20℃备用。孔加入至酶联反应板,置4℃冰箱过夜,次日弃6阴性对照N比值>2.1即判定为阳性,待检验本S临床诊断符合绵羊肺炎支原体症状,病原鉴定为阳性或PCR鉴定为阳性,即可判定6.2疫苗免疫6.3治疗原则饲养管理与卫生消毒工作及提高生物安全标准的基础上7A.3TAE电泳缓冲液:Tris4.84g/L,冰乙酸1.142入容器中;未溶解的酚红继续加1MNaOH溶液2mL,重复上述步骤(NaOH溶液总量不8B.2绵羊肺炎支原体
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