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文档简介
第一节
基因工程及其技术第2课时
PCR技术和利用PCR技术扩增DNA片段并完成电泳鉴定学习目标学科核心素养1.简述
的原理、条件及过程。2.尝试进行
的基本操作并电泳鉴定
的产物。1.科学思维——进行
的操作过程,说出合成新
分子的基本原理。2.科学探究——通过
操作,培养实验设计及结果分析的能力。教材预习·必备知识全过关一、聚合酶链式反应(PCR)技术
引物对
热稳定
3.
反应步骤步骤说明图解变性在约______高温下,作为模板的双链
______(变性)为两条单链
解旋步骤说明图解退火反应体系的温度降至约______,2条______分别与对应单链
上的特定部位配对续表
引物步骤说明图解延伸反应体系的温度回升到约______
酶催化作用的______反应温度
,4种脱氧核苷三磷酸根据______________原则,在_______的作用下连接到引物___端之后,使引物链______,并形成互补的
双链
最适碱基互补配对
延伸续表
(2)在古生物学、法医学等方面也有广泛的应用。遗传病诊断二、利用PCR技术扩增DNA片段并完成电泳鉴定琼脂糖凝胶电泳变性退火延伸一倍
反应缓冲液不同琼脂糖凝胶电泳系统紫外透射仪预变性退火延伸
紫外透射仪核心要点·能力素养全提升要点一
聚合酶链式反应(PCR)技术
条件作用有一段已知目的基因的核苷酸序列便于合成引物在一定的缓冲液中进行提供相对稳定的
环境4种脱氧核苷酸作为合成
子链的原料
母链作为
复制的模板
酶催化合成
子链(耐高温)引物使
聚合酶能够从引物的
端开始连接脱氧核苷酸
物质(复制)1次2次3次
次
分子数248
含引物的
分子数248
含引物A(或B)的
分子数
同时含引物A、B的
分子数
共消耗的引物
和
数量
两条单链等长的
分子数
分子种类2455
项目细胞内
复制
不同点解旋解旋酶,边解旋边复制
高温解旋,双链完全分开酶解旋酶、
聚合酶
酶(热稳定的
聚合酶)引物
能量
、
、
、
中的能量温度体内温和条件高温子链合成一条链连续(先导链),另一条链不连续两条子链均连续合成相同点①提供
模板;②4种脱氧核苷酸作原料
中的实际是
、
、
、
;③子链延伸的方向都是从
端到
端续表
BD
CD
√
要
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