2024年主管检验技师考试临床医学检验微生物检验讲义第13章病原性球菌及检验

病原性球菌及检查●考點

葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属、奈瑟菌属

生物學性状

微生物學检查法

临床意义（致病性、所致疾病）

【内容讲解】

普及共性，單记個性

生物學性状

形态与构造：革兰染色性，菌体形态，大小，排列状态，特殊构造。

培养特性：對气体需求，营养规定，最适pH值，最适温度，在培养基中的生長現象。

生化反应：特殊生化。

抗原：

分类：

致病性

致病物质

所致疾病

微生物學检查：针對生物學性状和致病性。

壹、葡萄球菌属

壹群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状而得名。

（壹）生物學特性

1.形态与构造

G+，球形，0.5～1.5μm，呈葡萄串状成堆排列（在脓汁、肉浸液培养物中，可見單個，成對或短链排列），無鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜。

2.培养特性

需氧或兼性厌氧，营养规定不高，最适pH為7.4，最适温度為35～37℃。

普皿：圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整洁并且不透明的菌落，直径為2～3mm。可产生不壹样的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色色素。

血琼脂平板：几乎所有的葡萄球菌可产生α、β、γ和δ溶血素。

液体培养基：生長迅速呈均匀混浊状。

3.生化反应

触酶试验（+）；多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖，产酸不产气；分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶（多数致病性葡萄球菌）。

4.抗原

（1）蛋白抗原：為完全抗原，有种属特异性，無型特异性。存在于葡萄球菌的表面，結合在细胞壁的粘肽部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白（SPA）。

（2）多糖抗原：是半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。

5.分类

（1）《伯杰系统细菌學手册》

（2）古典分类法

6.抵御力

對理化原因抵御力强，耐热，耐干燥，耐高盐。

是抵御力最强的無芽胞细菌。

（二）临床意义

葡萄球菌感染的特點是感染部位组织的化脓、壞死和脓肿形成。

金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常見的葡萄球菌。

（1）金黄色葡萄球菌

致病物质：

血浆凝固酶；葡萄球菌溶血素；杀白细胞素；肠毒素；表皮溶解毒素；毒性休克综合征毒素。

（2）表皮葡萄球菌

存在于皮肤的正常栖居菌，為醫院感染的重要病原菌，它是导致血培养污染的常見细菌之壹。

（3）腐生葡萄球菌

导致尿路感染的常見病原菌之壹。

（三）微生物學检查

標本采集（不壹样疾病采集不壹样標本）：

脓汁、渗出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。

鉴定试验：

汇报：检出“XXX葡萄球菌”

耐药性检测

检测耐甲氧西林的金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的表葡菌（MRSE），耐萬古霉素的金黄色葡萄球菌（VRSA），耐萬古霉素的表皮葡萄球菌（VRSE）。

（四）治疗原则

由于耐药菌株曰益增多，治疗葡萄球菌感染時，应根据体外药敏试验选择抗生素。假如是危、急、重症感染，应首先根据經验选药，如萬古霉素等，待体外敏感试验成果回报後，再调整用药，针對治疗。

二、链球菌属

（壹）生物學特性

1.形态与染色

G+，圆形，0.8～1.0μm，呈链状排列（在液体培养基中易成長链。在脓汁標本中為短链，成双或單個散在）。

無鞭毛、無芽胞，某些菌株在血清肉汤中可有荚膜。

2.培养特性

大多為需氧或兼性厌氧菌，少数微需氧及专性厌氧。营养规定较高。最适温度為35～37℃，最适pH為7.4～7.6，在5%CO2环境下生長更好。

液体培养基：溶血性菌株呈絮状或颗粒状沉淀生長。上层液体澄清，可有菌膜。不溶血菌株则均匀浑浊生長。

血琼脂平板：灰白色、圆形、凸起、细小菌落，不壹样溶血环。

3.生化反应

触酶试验（-），能分解葡萄糖产酸不产气，對其他糖类的分解因不壹样菌株而异。

4.分类

（1）根据溶血能力分类：

甲型（α）溶血性链球菌：本菌為条件致病菌。

乙型（β）溶血性链球菌：该型细菌致病性最强，常引起人和動物多种疾病。

丙型（γ）链球菌：壹般無致病性。

（2）根据链球菌细胞壁抗原（即C抗原）分类，即常用Lancefield血清分型法：

将链球菌分為A、B、C、D……T等18個群（其中I和J缺），對人类有致病性的90%属A群，B、C、D、G群链球菌感染较少見。

5.對理化原因的抵御力

不强，對多种常用消毒剂敏感，60℃加热30分钟即可杀灭。

（二）临床意义

A群溶血性链球菌致病物质所致疾病链球菌溶血素急性化脓性感染（丹毒、痈、蜂窝组织炎、咽炎、鼻窦炎、中耳炎、脑膜炎、产褥热）透明质酸酶链激酶，链道酶致热外毒素猩紅热M蛋白变态反应性疾病（風湿热，肾小球肾炎）草绿色链球菌：属条件致病菌，常与亚急性心内膜炎有关。

B群链球菌：是新生儿肺炎、脑膜炎和败血症的病原体。

D群链球菌：引起呼吸道和泌尿道感染。

治疗原则：

A群链球菌感染，青霉素G被列為首选。

B群链球菌常常采用青霉素G和壹种氨基糖苷类合用。

（三）微生物學检查

標本采集（不壹样疾病采集不壹样標本）：

可采集脓汁、咽拭、痰、血、尿等標本。

鉴定试验：

三、肺炎链球菌

（壹）生物學特性

1.形态与染色

G+，球菌，呈矛尖状、钝面成双排列，有時呈短链状，0.5～1.25μm，有荚膜（在人或動物体内易形成），無鞭毛，無芽胞。

2.培养特性

需氧或兼性厌氧；最适的温度為35～37℃；最适的pH7.6～8.0；营养规定较高。

血琼脂平板：形成灰色扁平、中心凹陷（因菌落发酵所致）直径為0.5～1.0mm的菌落，周围有草绿色溶血圈。

液体培养基：均匀混浊。但培养時间過長，可因产生自溶，培养液可变澄清，管底沉淀。

3.生化反应

多数菌株分解菊糖、胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性。（肺炎链球菌与草绿色链球菌的鉴别）。

（二）临床意义

致病物质：荚膜。

所致疾病：大叶性肺炎、支气管炎。可继发胸膜炎、脓胸，也可

引起中耳炎、鼻窦炎、脑膜炎及败血症。

（三）微生物學检查

1.標本采集

2.试验措施及鉴定

（1）直接涂片检查：經革兰染色，镜检見革兰阳性矛尖状双球菌。

（2）分离培养：

血液、脑脊液需增菌培养，呈均匀混浊，并且有绿色荧光。脓汁或脑脊液沉渣接种血琼脂，置5%～10%C02环境中培养。

（3）鉴定试验

1）胆汁溶解试验（+）

2）菊糖发酵试验（+）

3）0ptochin敏感试验（+）

4）荚膜肿胀试验（+）

5）動物试验：小白鼠對肺炎链球菌极為敏感。

6）迅速乳胶凝集试验（+）

四、肠球菌属

肠球菌属是肠道的正常栖居菌。

（壹）生物學形状

1.形态和构造

G+，成双或短链状排列的卵圆形球菌，無芽胞，無荚膜，部分肠球菌有稀疏鞭毛。

2.培养特性

营养规定高，需氧及兼性厌氧。在胆汁七叶苷和含6.5%NaCl培养基中可以生長（此點可与链球菌鉴别）。

血平板上重要体現為γ-和α-溶血。

3.生化反应

触酶（-），多数肠球菌能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺（PYR）。

与同科链球菌的明显区别：

能在高盐（6.5%NaCl）、高碱（pH9.6）、40%胆汁培养基上和10℃～45℃环境下生長；

對許多抗菌药物体現為固有耐药（如复方增效磺胺、頭孢菌素、克林霉素和低浓度的氨基糖苷类）。

（二）临床意义

肠球菌是G+菌中仅次于葡萄球菌属的重要醫院感染病原菌。

最常見的為尿路感染，另壹方面為腹部和盆腔等部位的创伤和外科术後感染。

临床上分离率最高的是粪肠球菌，另壹方面是屎肠球菌。

肠球菌致病基因：重要有细胞溶解素激活基因、明胶酶基因、表面蛋白基因、胶原蛋白黏附素基因、汇集物质基因和粪肠球菌心内膜炎基因等。

（三）微生物學检查

采集標本：如尿液、脓汁、胆汁、分泌物或血液等。

措施：以直接涂片進行初步检查。分离培养後，挑取可疑菌落，進行涂片、染色、镜检、触酶试验、胆汁七叶苷试验和6.5%NaCl耐受试验，可鉴定到属。

耐药性检测：壹般要测试對β-内酰胺类尤其是青霉素类（如青霉素、氨苄西林）、萬古霉素和氨基糖苷类（如庆大霉素）的敏感性。同步也应對β-内酰胺酶進行测试。

（四）成果评价

药敏成果中必须注明β-内酰胺类（如青霉素G、氨苄西林）的敏感性。庆大霉素的耐药水平（与否為高水平耐药）萬古霉素的敏感性以及β-内酰胺酶测试成果。

（五）治疗原则

壹般采用β-内酰胺类和氨基糖苷类联合治疗，氧氟沙星与氨苄西林有协同作用。必要時還要改用萬古霉素或替考拉宁。

五、奈瑟菌属

G-，双球菌，無鞭毛，無芽胞，有菌毛。

专性需氧，氧化酶阳性。

本属重要有9個种。其中對人致病的是脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。

脑膜炎奈瑟菌

简称脑膜炎球菌，是引起流行性脑脊髓膜炎（简称流脑）的病原体。

1.生物學特性

（1）形态与染色：

G-，菌体呈肾形，坦面相對，成對排列，0.6～1.5μm，在患者的脑脊液中位于中性粒细胞内。

（2）培养特性：

营养规定高，属苛养菌。最适温度為35～37℃，最适pH為7.4～7.6。

（3）生化反应：

绝大多数菌株能分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气（因淋病奈瑟菌不分解麦芽糖，借此与之鉴别）；

不分解乳糖、甘露醇、半乳糖和果糖，硝酸盐還原试验阴性不分解尿素、不产生H2S和靛基质；

触酶试验阳性，氧化酶试验阳性。

（4）抗原及分型：

重要有四种抗原：荚膜多糖群特异性抗原、外膜蛋白型特异性抗原、脂多糖抗原及核蛋白抗原。

根据群特异性荚膜多糖抗原不壹样，将本菌分為A、B、C、D、X、Y、Z、1916、29E和W135等。

目前，對人致病的重要是A群，偶見B群、C群及1916群引起散发病例。

2.临床意义

致病物质：菌毛，荚膜，内毒素。

所致疾病：脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌。重要体現发热，皮肤瘀斑，脑膜刺激症状。存在于携带者或病人的鼻咽部，借飞沫經空气传播，冬末春初為流行高峰。

3.微生物學检查

（1）標本采集：血液；瘀斑渗出液；脑脊液；鼻咽分泌物。

注：因本菌能产生自溶酶，易自溶，故采集的標本不适宜置冰箱，应立即送检。

（2）检查措施及鉴定：

1）直接涂片检查：取脑脊液离心後沉淀物涂片或刺破瘀斑血印片，干燥固定後革兰染色。若发現中性粒细胞内（或胞外）革兰阴性双球菌，呈肾形成對排列，可初报。

2）分离培养：将標本增菌培养液直接接种于血琼脂平板、巧克力琼脂或EPV琼脂，置5%～10%C02环境中，35℃培养18～24h後可見圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整洁、直径1～2mm的小菌落。

3）鉴定：

①细菌染色形态：G-，菌体呈肾形，坦面相對，成對排列。

②氧化酶试验（+）

③触酶试验（+）

④分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气

⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验

4.治疗原则：

青霉素G為首选，三代頭孢對脑膜炎奈瑟菌也具有很强的抗菌活性。青霉素過敏的病人可考虑选用三代頭孢或氯霉素。

淋病奈瑟菌

简称淋球菌，是淋病的病原体，人类是其唯壹的天然宿主和传染源。

1.生物學特性

（1）形态与染色：

G-，球形或肾形，成對排列，0.6～0.8μm。在脓汁標本中，壹般位于中性粒细胞内，而在慢性淋病時常位于细胞外。從患者体内新分离的菌株可有荚膜和菌毛，無芽胞和鞭毛。

（2）培养特性：

营养规定较高，国内常用血液琼脂、巧克力琼脂、EPV琼脂等培养基。最适pH為7.5，最适温度為35～37℃。初次分离時，须置5%～10%CO2条件下才能生長发育。

菌落：表面光滑、凸起、半透明、高亮度、直径0.5～1.0mm的圆形菌落。

（3）生化反应：

對糖类生化活性最低，本菌可发酵葡萄糖、产酸，但不酵解麦芽糖（常借此与脑膜炎奈瑟菌相鉴别）。

氧化酶和触酶试验均阳性。

（4）重要抗原：

菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。

（5）抵御力：對外界抵御力极低。

2.临床意义：

淋病奈瑟菌是常見的性传播疾病淋病的病原菌，重要通過性接触直接侵袭感染泌尿生殖道，口咽部及肛门直肠的黏膜。如單纯性淋病、盆腔炎、淋菌型結膜炎。

3.微生物检查

（1）標本采集：脓性分泌物，尿道拭子，宫颈口分泌物，眼結膜分泌物，血液。

（2）检查措施及鉴定

1）直接涂片检查：搜集標本後立即涂片、革兰染色，镜检時見中性粒细胞内数對革兰阴性双球菌，可初诊。

2）分离培养：细菌培养仍是目前世界卫生组织推荐的筛选淋病患者的唯壹措施。

及時接种具有两种以上抗生素（萬古霉素和多黏菌素等）的营养培养基上。

3）鉴定：

①生化反应：氧化酶阳性，仅分解葡萄糖产酸；不发酵麦芽糖与蔗糖，30%H2O2试验阳性可与脑膜炎奈瑟菌等相鉴别。

②免疫學措施：荧光抗体染色法、协同凝集试验。

③核酸探针杂交法。

4.治疗原则

對青霉素和四环素耐药的淋病奈瑟菌越来越多，目前壹线用药壹般為三代頭孢菌素，氟喹诺酮类、大观霉素可作為替代药物。對氟喹诺酮类、大观霉素的耐药也有报道。

六、卡他布兰汉菌

G-，双球菌，约0.6～1.0μm，無芽胞，無鞭毛。

营养规定不高，在壹般培养基上18～20℃即可生長，借此可与脑膜炎奈瑟菌鉴别。需氧，菌落光滑，直径约1～3mm，不透明，灰白色，菌落易從培养基上刮下。

氧化酶和触酶阳性，产DNA酶，大部分菌株還原硝酸盐和亚硝酸盐，借此可与奈瑟菌属相鉴别。

可致中耳炎、鼻窦炎、肺炎。

【例題】SPA是

A.肠杆菌科的细菌的抗原

B.葡萄球菌细胞壁的蛋白成分

C.沙门菌的表面抗原

D.核蛋白抗原

E.链球菌属表面抗原[答疑编号]

【對的答案】B

【例題】鉴别肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌可用

A.外斐试验

B.肥达试验

C.乳糖发酵试验

D.菊糖分解试验

E.血浆凝固酶试验[答疑编号]

【對的答案】D

【例題】B群链球菌不引起下列哪种疾病

A.败血症

B.肺炎

C.脑膜炎

D.咽喉炎

E.風湿热[答疑编号]

【對的答案】E

【例題】引起剥脱性皮炎的细菌是

A.肺炎球菌

B.链球菌

C.金黄色葡萄球菌

D.脑膜炎奈瑟菌

E.肠球菌[答疑编号]

【對的答案】C

【例題】淋病奈瑟菌与脑膜炎奈瑟菌鉴别用

A.葡萄糖发酵试验

B.麦芽糖发酵试验

C.氧化酶试验

D.