自研中草药预防家兔巴氏杆菌病田间试验研究

兔巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌引起的一种急性型以败血症和出血性炎症为特征的烈性传染病。家兔对多杀性巴氏杆菌非常敏感，常引起大批死亡，造成重大损失。根据临床表现可分为败血型、传染性鼻炎型、地方流行性肺炎型、中耳炎型、结膜炎型、生殖器官感染和脓肿型等7种病型。兔多杀性巴氏杆菌在我国分布很广，常以带菌状态寄生于家兔的呼吸道粘膜以及扁桃体中。家兔的带菌率一般为35%～70%，发病率为20%～70%。常因气候、饲养管理等应激因素或其他疾病使机体抵抗力降低时引起群体发病，是对家兔养殖业危害严重的疾病之一。在畜牧业生产实践中，广大养殖者为生产更多的畜禽和动物产品，提高畜禽的饲养效率，满足人们对畜产品的需求，特别重视对动物传染病的防治。因此，兽药生产中的许多抗菌药，特别是抗生素被广泛用于动物饲养和疾病防治的全过程。随着现代医学科技的发展和食品安全技术的进步，使人们逐步认识到，大量长期和不规范使用抗生素、添加剂及激素类物质，会造成这些物质在动物体内的残留和蓄积，导致动物机体免疫力下降，病原微生物的耐药性增强，进而给动物、动物产品安全和公众健康造成严重危害。目前，畜产品安全问题已成为国际贸易中最敏感、消费者最关注以及全球科技工作者着力研究解决的焦点问题。为保障畜产品安全和人民健康，我国农业农村部已正式宣布启动在畜牧业生产中，实施抗菌药物应用减抗行动计划，明确了动物养殖端减抗和限抗的时间表。为适应这一新形势的要求，加强完善抗菌药物的科学应用和改进，研制新型抗菌药物替代品的工作已成为广大科技工作者的当务之急、为此，我所兔病课题组开展了应用天然中草药预防兔巴氏杆菌病的试验研究工作。本试验旨在通过科学系统规范的试验研究工作，进一步深入了解天然中草药在养殖业过程中，预防家兔巴氏杆菌病的实际作用和效果，有效预防兔巴氏杆菌病和其他细菌病，以及通过中草药对家兔的试验研究，为今后其它畜禽的疫病预防提供可靠的数据支持和科学理论依据。继而探索新的防治途径，确保畜禽产品的质量安全和公众健康。1试验设计与方法1.1应用中草药预防兔巴氏杆菌病的试验研究，有针对性地选择在巴氏杆菌污染较为严重的养殖场进行。1.2试验研究工作选在易发生兔巴氏杆菌病的冬季进行。试验时间从1月15日～3月底为止。1.3试验的参试兔要求为同品种、同批生产、临床上精神食欲都正常。1.4试验用兔按照原有习惯只注射兔瘟疫苗，不注射巴氏杆菌疫苗及其它疫苗。试期试兔不注射和服用任何抗菌药物和其他保健性制剂。1.5该厂用于试验的家兔，除饲喂中草药的试验组外，其他参试兔的饲养管理、疫病防治及养殖环境等，仍保持原有习惯，确保试验条件的一致性。1.6本试验所用的中草药购于河北安国中草药集散地，购销渠道可靠质量上乘。本课题组自行研制的中草药预防兔巴氏杆菌病的配方，经颗粒机按照药料比加工制成的中草药颗粒饲料。1.7用于试验研究的中草药配方为2个，分别制成颗粒料。为方便试验需要，简称配方三和配方四。试验组所用颗粒料为普通颗粒料打碎添加中草药后制成，所使用的普通颗粒料与对照组所用的相同。1.8试验开始前，在同批产300只参试兔中，随机抽取用于饲喂中草药颗粒料的30只试验兔，再进行兔巴氏杆菌带菌情况的检测。检测方法应用PCR技术和细菌分离培养方法结合进行。进一步了解掌握巴氏杆菌在兔群的感染带菌情况。1.9本实验分3个组，2个试验组1个对照组。试验组兔共30只，每组各15只，试验一组饲喂配方三颗粒料，试验二组饲喂配方四颗粒料；对照组饲喂不含中草药的普通颗粒料。对照组所用饲料除不含试验组配方中所用中草药外，其余成分与试验组相同。1.10试验开始前，对参试的所有家兔笼具、饲喂饮水工具及周围环境统一进行安全检查，防止因物理性化学性及生物性因素的伤害和应激，保证试验工作的顺利进行。1.11试验用中草药颗粒料（包括普通料），均坚持定时间饲喂、限量给料、自由饮水的试验要求。每日早晚定时给料一次，每日投喂量根据试验兔的生长、体重、饮食等情况控制在120～160g，保证吃净。晚间投喂量占每日总投喂量的70%掌握。1.12坚持每日试验兔观察记录，仔细观察每日试验兔的精神状态、采食饮水和排泄等情况有无异常。并认真将观察到的实际情况随时记录到试验表中。试验记录表文字规范表述，按照试验对试兔规定的观察内容填写，如表现正常，可填写为精神、饮水、食欲、粪便正常；如试验中观察到试兔有异常表现，可根据观察到的异常表现，在相应的表格中填写为：精神沉郁、食欲减退或废绝、饮水减少或停饮、粪便干硬或软绵或有颜色变化。若出现其他异常变化，按相关专业表述在试验记录表备注栏填写。2实验结果2.1保护效果评价按试验方案设定的实验思路、试验条件、试验方法和相关技术要求，通过应用自研的中草药颗粒料饲喂，进行了试验。试验前对养殖场试验兔巴氏杆菌带菌情况进行检测，检测30只阳性数为19只，阳性率为63.3%。从试验效果来看，在为期2个月的试验期内，在一定时间内多次发生巴氏杆菌疫情且严重污染的养兔场内，饲喂中草药颗粒饲料的30只试兔无一发生巴氏杆菌病及其它疫情，参试兔巴氏杆菌带菌率很低，所有试兔精神良好，食欲旺盛，膘肥体壮，保护率100%，而作为对照组参试的同批产270只试兔试验前后共死亡115只，其中，在中草药防治巴氏杆菌病试验前300只家兔死亡72只，本试验正式开始后对照组同批产家兔198只死亡43只，死亡率分别为24.0%和21.7%。2.2免疫水平分析通过应用中草药预防兔巴氏杆菌病的试验，研究结果显示，应用中草药预防兔的巴氏杆菌病，不但能有效预防和控制兔群巴氏杆菌病疫病的发生，而且天然中草药还有增强体质促进和提高家兔机体增重、免疫器官发育、免疫力增强等生理生化指标的显著作用。试验结果显示，饲喂中草药颗粒料的试兔比同期饲喂普通颗粒料的对照兔，在两个月的试验期结束后，体重平均增高0.5kg，脾脏平均重量增加，免疫球蛋白数量和干扰素水平有不同程度的增加，经生物学统计几项指标和对照组比较呈现显著差异（见图1）。配方三和配方四在IgG和IgA水平上与对照组相比有明显提高，与此同时，配方三还在IgM和γ-IFN水平上与对照组相比有明显升高。图1用药后IgG、IgA、IgM、γ-IFN含量2.3药物安全性检测试验后对饲喂中草药颗粒料的试兔进行剖检，肝、心、脾、胰、肾、胃、肠等均未发现明显的病理损伤。精神、饮水、食欲、排泄等均表现正常。采取血清检测，ALT、AST等生化指标与对照组相比未见显著变化，显示未出现明显的肝脏损伤（图2）。图2血清中ALT、AST水平变化3讨论对“自研中草药预防家兔巴氏杆菌病试验研究”相关研究结果分析认为：在家兔的养殖实践中，科学应用中草药进行家兔巴氏杆菌病的预防和控制工作，是完全可行的，而且是行之有效的。科学依据一方面是在理论上有中草药药理作用，对家兔生理生化指标影响结果的试验数据支持，另一方面是在实践中有中草药科学实验结果的证实。通过对为期2个月的试验研究结果综合分析论证看，科学应用中草药，不但能有效预防和控制兔巴氏杆菌病，而且，从科学的角度和实际试验的过程看，也同样能有效预防和控制家兔其它的一些细菌性疾病。另外，从中草药本身独特的药理药性以及科学试验的时间节点、场地环境、环卫条件等相关因素分析看，也说明对家兔的一些病毒性疾病有良好的预防和控制作用，理由是：首先本试验场研究的时间节点正值冬季严寒，此时正是动物疫病特别是病毒性疫病的敏感期高发期；其次在该养兔场安排本次试验的前后，一直发生零星散发的兔巴氏杆菌疫情，且经过对病死动物实验室检验结果显示，是以巴氏杆菌感染为主兼有继发魏氏梭菌、波氏杆菌等混合感染的现象；另外该养兔场近些年来日常除只做兔瘟疫苗的免疫外，基本不做其它疫苗的免疫工作。通过对自研中草药试验研究相关结果的系统分析认为，应用中草药既然能有效的预防和控制家兔的一些疾病，理论推认，中草药对其它畜种的一些疾病也应有良好的预防和控制作用。因此，应进一步加强和拓展这些方面的科学研究工作，更好的服务于养殖业健康发展。中医药历史悠久，内容丰富，博大精深，自成体系，是中华民族的伟大创造，是中华文明瑰宝，是中华优秀传统文化的组成部分。应用自研天然中草药组方预防家兔巴氏杆菌病的试验研究结果证明：天然中草药确实具有清热解毒、抗菌消炎、增强免疫、促进