番茄对主要病害抗性鉴定评价技术规程 第5部分：番茄抗早疫病鉴定评价技术规程-送审讨论稿

1本文件适用于所有种类的番茄，包括番茄属（LycopersiconMiller.）下2个亚群和9个种，以及栽培24接种体制备4.1基本设备持在20℃~30℃)、塑料盆、铝锅、电炉、培养皿4.2接种体分离4.3接种体确定分别选择分布较广、致病力较强的番茄早疫病菌的优势菌株作为人4.4接种体保存4.4.1短期保存将番茄早疫病菌分别接种于PDA斜面养基上，在25℃~26℃培养7d后，置4℃冰箱中保存。将番茄早疫病菌分别接种于PDA平板培养基上，并在接种点周围放置一定数量的灭菌滤纸片，在25℃~26℃培养7d后，取出滤纸片，经真空干燥后于-20℃~-80℃的低温冰箱中保存。34.5接种体悬浮液制备将保存在PDA培养基上的早疫病菌，在无菌操作下，移植于PDA平板培养基上，置于25℃~26℃培25℃~26℃36小时皿内形成大量分生孢子，用无菌蒸馏水洗下并收集分生孢子悬浮液，得到接种体悬浮5鉴定番茄苗培育露白发芽后播植于温室，采用营养钵盆栽法进行育苗，基质应自来水浇透育苗基质，随后将已催芽的待鉴定番茄种子播于上述塑料营养钵中，每钵1粒种子，然后用泥炭育苗基质覆盖，以盖住种子为宜。重复3次，每重复30钵，5.5接种前管理播种后将塑料钵置于温室中，进行培育，出苗前，温室温度保持在25℃~30℃,保持盆中土壤湿度；番茄苗出土后，温室温度保持在23℃~25℃,土壤湿度保持在60%～80%，正常栽培管理，不施用每年4月～6月和10月～12月为番茄对早疫病抗性鉴定与抗4用无菌水将接种体悬浮液稀释，配制成接种体浓度为1.0×105个孢子/mL～4.0×105个孢子/mL的接接种后的番茄苗，置于温度为20℃~22℃的温室中，黑暗保湿（RH95%～100%）24h；以后每天光照12h～14h，温室温度保持在20℃~22℃,适时浇水，保持正常栽培管理，不施用杀菌剂。接种后7d～10d时进行调查。也可根据感病的对照品种病级扩展到最高病级的Ri=×100…………（1）59结果评价9.1鉴定有效性判别当感病对照品种达到其相应感病程度（DI≥50.0），该批9.2抗病性划分12R345S69.3鉴定结果记录编号品种/种质名称来源重复病情级别病情指数平均病指抗性评价0135796ⅠⅡⅢ……播种日期接种日期接种生育期接种病原物分离编号接种病原物株系类型调查时间鉴定人（签字）：校核人（签字）：鉴定技术负责人（签字）：鉴定单位盖章）7200g，切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持30min，用2层纱布趁热在量杯上过滤，弃滤渣，取滤液补充水分到1000ml；把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂17g，然后至6.8～7.0。将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞或泡沫度的1/5，灭菌后制成斜面；三角瓶的分装量以不超过其容积的一半为宜，灭菌后倒入灭菌培养皿，制8茄链格孢菌即番茄早疫病菌侵染番茄叶、茎和果实引起番茄早疫病。叶片被害，初呈深褐色或黑茄链格孢菌丝有隔膜和分枝，较老的颜色较深。分生孢子梗从病斑坏死组织的气孔中抽出，直立或稍弯曲，