检验科血清载脂蛋白B测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-030版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第6页共6页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01血清载脂蛋白B测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清载脂蛋白B(缩写apoB)测定；组合项目申请：血脂测定，血载脂蛋白测定。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1天，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。-20℃可保存数月；-70℃至少可保存半年；应避免标本反复冻溶。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。抽血前3天内避免高脂饮食，24小时内不饮酒。2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。EDTANa2(1mg／mL)抗凝。2.1.5抽血前最好停用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。3方法原理透射免疫浊度法。APOB与特异的抗血清反应形成不溶性的复合物，可在340nm测定该不溶性复合物的浊度。通过测定标准品，建立一个吸光度对APOB浓度的标准曲线就可以测定出样品中的APOB浓度。4试剂及其他用品4.1试剂：血清载脂蛋白B（APOB）免疫浊度法测定试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。4.2试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定14天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或空白吸光率>0.1时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.3试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4试剂盒主要成分：组成混合后的浓度R1:聚乙二醇<4%氯化钠106mmol/LTris/HCL缓冲液15mmol/LR2:抗人APOB抗体表面活性剂5校准品与校准模式5.1校准品：与试剂盒配套的北京利德曼生化技术有限公司校准液。5.2校准类型和校准点数目：非线性模式，5个校准点。5.3校准周期：校准间隔时间不限。但在：①更换试剂或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。5.4校准液重建方法：校准液为干粉，加入1.0ml生理盐水，室温放置30分钟，混匀后倍比稀释成5个浓度（其中最后一管为生理盐水空白管）即可使用。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用由上海申峰生物试剂有限公司公司提供的两个不同水平定值质控血清。6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。主要分析参数参见说明书。10结果计算仪器根据非线性校准曲线自动给出每个标本测定结果。11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：0.00～2.4g/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV<5.0％，批间CV<6.0％；12.2灵敏度：载脂蛋白B浓度为：1g/L时，浊度吸光度A340nm约0.372~0.454。12.3线性范围：0.00～2.4g/L。12.4方法的有限性及干扰因素：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。13参考范围及医学决定水平参考范围；0.49-1.03g/L。14临床意义14.1血清中的APOB绝大部分存在于低密度脂蛋白LDL中，在IDL、VLDL和脂蛋白(a)中也各含有一分子APOB，故血清APOB水平主要反映LDL水平，与LDL-C呈明显的正相关。14.2流行病学与临床研究结果已确认，高浓度APOB是冠心病的危险因素，且APOB是各项血脂指标中较好的动脉粥样硬化标志物。14.3冠心病高APOB血症的药物干预实验结果表明，降低APOB水平可以减少冠心病发病及促进粥样斑块的消退。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与血脂其他指标和与载脂蛋白等的关系，apoB一般与LDL-C浓度呈正相关。如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16威胁生命的“紧急值”及报告规定通常无威胁生命的“紧急值”。17、有关引用程序与文件17.1Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2生化检验室内质控标准操作程序。17.3检验结果审核程序。1