聚乳酸及其制品中辛酸亚锡的测定 高效液相色谱法（征求意见稿）

1聚乳酸及其制品中辛酸亚锡的测定高效液相色谱法本文件规定了聚乳酸及其制品中辛酸亚锡含量测定的高效液相色谱法。本文件适用于聚乳酸及其制品中辛酸亚锡含量的测定。本文件检测限为300mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T16631高效液相色谱法通则3原理试料中的辛酸亚锡在碱性条件下水解生成辛酸钠，水解液中辛酸钠在18-冠-6醚的催化下与ω-溴苯乙酮进行衍生反应，N2吹干、流动相复溶后，注入高效液相色谱仪，262nm波长处测定，内标法定量。4试剂和材料除非另有说明，本方法所用试剂均为优级纯。水应符合GB/T6682中一级水的要求，且使用前煮沸30min后盖塞冷却。注:实验所涉及的玻璃器皿均需120℃加热处理，塑料管先用乙醇冲洗、50℃加热处理后使用。4.1乙腈(CH3CN)：色谱纯。4.2甲醇(CH3OH)：色谱纯。4.3二氯甲烷(CH2Cl2)：色谱纯。24.4氢氧化钠(NaOH)。4.5正己烷(C6H14)。4.6辛酸标准溶液(1000μg/mL)：CAS号：124-07-2，冷藏避光条件下保存。4.7庚酸标准溶液(1000μg/mL)：CAS号：111-14-8，冷藏避光条件下保存。4.8ω-溴苯乙酮：纯度≥95.0%4.918-冠-6醚：纯度≥95.0%。4.10氢氧化钠(NaOH)溶液(1.0mol/L)：称取40.0g氢氧化钠，用水溶解并定容至1000mL。4.11ω-溴苯乙酮衍生试剂溶液(0.025mol/L)：准确称取25.3mgω-溴苯乙酮于5mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，密封保存。4.1218-冠-6醚衍生试剂溶液(0.005mol/L)：准确称取65.0mg18-冠-6醚于50mL容量瓶中，用水溶解并定容，密封保存。4.13辛酸标准工作液：准确移取适量辛酸标准溶液(4.6)，用水稀释成一系列辛酸标准工作液，当天配制，现用现配。4.14庚酸内标工作液：准确移取适量庚酸标准溶液(4.7)1mL，用水稀释至10mL，当天配制，现用现配。s仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.3超声波清洗器。5.4离心机：转速不低于8000r/min。5.5带磁力搅拌的冷凝加热回流装置：搅拌速度可调，加热温度80℃~100℃。5.6涡旋振荡器。5.7恒温培养箱：(50±2)℃。5.8氮吹仪：可控温。5.9微孔滤膜：孔径0.22μm，有机相。6试样制备3聚乳酸样品采用对角线分割法，取对角部分，如样品较大可将其切碎，充分混匀，用四分法取样或经冷冻研磨粉碎。取200g混匀放入聚乙烯瓶中于-20℃~-16℃条件下保存。称取试样时，应搅拌均匀。7分析步骤7.1水解称取5g试样(精确至0.01g)于250mL球形烧瓶中，加入50mL二氯甲烷(4.3)，超声10min使样品溶解，加入50mL氢氧化钠(NaOH)溶液(4.9)，加入一颗磁力搅拌子，于冷凝加热回流装置上反应1h，温度设置为80℃。反应完毕冷却后取上层水解溶液10mL于8000r/min离心5min，取上层溶液5mL用1.0mol/L盐酸溶液调pH至7.0±0.1，备用。7.2衍生准确量取100μL上述上层溶液，加100μL内标溶液，加0.5mL1.50mol/LHClO4，涡旋混合2min，加1mL正己烷，涡旋混合2min，3000r/min离心20min。准确量取上层正己烷溶液0.5mL，加20μL0.05mol/LKOH-甲醇溶液，混合，氮气吹干，加衍生试剂溶液(4.10)100μL、衍生试剂溶液(4.11)50μL，涡旋混合、密封，于恒温干燥箱中50℃反应0.5h。反应液50℃下氮气吹干，加入0.5mL流动相复溶，过微孔滤膜，用于测定。7.4标准曲线的制作将标准系列工作溶液分别注入反向液相色谱仪中，内标法标准系列工作溶液中辛酸与其对应内标庚酸的浓度比为横坐标，以辛酸的峰面积与其对应内标庚酸的峰面积比为纵坐标，绘制标准曲线。辛酸与其对应内标庚酸衍生物的色谱图见附录A中图1。8测定8.1色谱参考条件a)色谱柱：C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），或相当者；b)流动相：甲醇-水（75+25，V/V）；c)流速：1.0mL/min；d)检测波长：262nm；e）进样量：20μL；4f）柱温：35℃。8.2定性分析将试样溶液注入液相色谱仪中进行测定，同样测试条件下，试样溶液中辛酸和庚酸的保留时间与标准工作溶液中相应的保留时间相比，偏差应在±2.5%以内。8.3定量分析将试样溶液注入液相色谱仪中，得到辛酸的峰面积，根据相应的标准曲线得到试样溶液中辛酸的浓度。试样溶液中的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围，可适当减少取样量重新测定。8.4空白试验不称取试样，按试样的水解、衍生和浓缩分析步骤操作。应不含有干扰待测组分的物质。内标法需要做不加内标的样品试验，确认加入内标的可行性。9结果计算试样中辛酸亚锡的含量以质量分数ω计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)计算。X×f×n(1)式中：X-----样品中辛酸亚锡含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；C-----根据标准曲线算出的样液中辛酸的含量，单位为微克每毫升(μg/mL)；V-----试样加水提取后的定容体积，单位为毫升(mL)；m-----试样的质量，单位为克(g)；n-----样液的稀释倍数；f-----由辛酸换算为辛酸亚锡的换算系数。注:计算结果需扣除空白值,测定结果取两次测定的算术平均值,计算结果保留至三位有效数字。10.