2024-2025学年高中生物专题五DNA和蛋白质技术课题3血红蛋白的提取与分离课堂达标含解析新人教版选修1VIP

PAGE2-课题3血红蛋白的提取与分别一、选择题1．凝胶色谱法是依据______分别蛋白质的有效方法。(B)A．分子的大小 B．相对分子质量的大小C．带电荷的多少 D．溶解度[解析]由凝胶色谱法分别蛋白质的原理可知，凝胶色谱法是依据相对分子质量的大小分别蛋白质的有效方法。2．SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是(C)A．增大蛋白质的相对分子质量B．可变更蛋白质的形态C．掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D．削减蛋白质的相对分子质量[解析]SDS的作用是使蛋白质完全变性，SDS所带负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖不同种类蛋白质间电荷差别。3．下列对在凝胶色谱柱上加入样品和洗脱的操作的叙述，不正确的是(C)A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后干脆连接缓冲液洗脱瓶起先洗脱D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集[解析]待样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口，当心加入缓冲液到适当高度，之后再连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱。4．在蛋白质的提取和分别中，关于对样品处理过程中，分析无误的是(D)A．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B．洗涤时离心速度过低，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分别的效果C．洗涤过程选用0.1%的生理盐水D．透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质[解析]洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，A错误；洗涤时要低速短时离心，以防止白细胞沉淀，B错误；洗涤红细胞选用0.9%的生理盐水，C错误；透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质，D正确。故选D。5．蛋白质的分别与提纯技术是蛋白质探讨的重要技术，下列有关叙述不正确的是(A)A．依据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同蛋白质分别B．依据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳分别蛋白质C．依据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分别蛋白质D．依据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分别蛋白质[解析]蛋白质分子不能透过半透膜，据此可利用半透膜除去样品中相对分子质量小的杂质，而不是分别样品中的蛋白质；依据蛋白质的带电荷性质，可通过电泳分别蛋白质；依据蛋白质的相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分别蛋白质；依据蛋白质的分子大小、密度不同，可用离心沉降法分别蛋白质。二、非选择题6．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输。请依据血红蛋白的提取和分别流程图回答问题。(1)将试验流程补充完整：A为__血红蛋白的释放__，B为__样品的加入和洗脱__。凝胶色谱法是依据__相对分子质量的大小__来分别蛋白质的有效方法。(2)洗涤红细胞的目的是去除__杂蛋白(或血浆蛋白)__，洗涤次数过少，无法完全除去；离心速度过高和时间过长会使__白细胞__一同沉淀，达不到分别的效果。洗涤干净的标记是__离心后的上清液不再呈现黄色__。释放血红蛋白的过程中起作用的是__蒸馏水和甲苯__。(3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是__加速样品在凝胶柱中的流淌__。假如红色区带__匀称一样地移动__，说明色谱柱制作胜利。[解析](1)样品处理及粗分别过程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分别血红蛋白溶液→透析，凝胶色谱操作过程为：凝胶色谱柱的制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱，所以A表示血红蛋白的释放，B表示样品的加入和洗脱，凝胶色谱法的原理是分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流淌快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流淌慢。(2)洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白，以利于后续步骤的分别纯化，洗涤次数少，无法除去血浆蛋白，此外，离心速度过高和时间过长，会使白细胞一同沉淀，也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度，重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净；由于甲苯是表面活性剂的一种，可将细胞膜溶解，从而使细胞裂开，蒸馏水能使红细胞涨破。(3)磷酸缓冲液(pH为7.0)能够模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一样，洗脱时利用缓冲液，可以加快样品在凝胶柱中的流淌；