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文档简介
种猪场流行性腹泻病诊治及防控研究综述论文目录TOC\o"1-3"\h\u摘要 11前言 22种猪流行性腹泻简介 23种猪流行性腹泻的致病机理 34种猪流行性腹泻的诊断 44.1RT-PCR 44.2ELISA 44.3胶体金试纸检测技术 45种猪流行性腹泻的治疗 55.1抗生素 55.2微生态制剂 55.3中药治疗 66种猪流行性腹泻的预防 66.1免疫预防 66.2全菌苗 76.3基因工程疫苗 76.4亚单位疫苗 8结论 8参考文献 9摘要我国早已成为举世闻名的猪肉生产与消费大国,因此我国肉猪养殖市场也在不断增长。随着养猪业的快速发展,规模化养猪场也越来越多了起来。但因集中规模养猪蓬勃发展,在饲养过程中,多多少少都有养猪疾病发生,从而使猪不能健康生长,在各种病症中,猪流行性腹泻病在种猪场中发生最普遍,它的疾病呈现多样化,错综复杂的特点。这不仅严重影响了养殖户的经济利益,也对猪群的生长发育造成极大的威胁。使生产性能落下,经济效益不能提高,但是,养猪的成本却在节节攀升,使许多养猪专业户损失惨重。因此如何有效地预防猪流行性腹泻病已经成为当下需要重点关注的课题之一。猪流行性腹泻是影响养猪业发展的典型病症,主要特征是猪体重减轻,精神不振、脱水性腹泻和免疫力下降,病后死亡率很高。所以必须要采取科学有效的手段对其进行诊断并加以及时控制,才能保证猪群健康成长。随着中国养猪业的扩张,种猪流行性腹泻是常见的疾病,因此,解决种猪场的腹泻是当务之急。由于目前在种猪饲养过程中对该病认识不足,导致其发病率居高不下,严重影响到养猪场经济效益和养殖安全。在此基础上,本文将对种猪场流行性腹泻病案例的诊断与治疗以及预防进行分析和讨论,提出了防治对策,目的是为了以后预防和治疗猪流行性腹泻。关键词:流行性腹泻病诊断防治1前言生猪业在畜牧业中占据了主要地位。以生猪养殖为载体,增加农民收入,是发展农村经济的支柱产业,它的产业发展对中国经济的发展起着举足轻重的作用。经合组织(OECD)和世界粮农组织发布的农业展望报告指出,2022年,我国猪肉的年平均增长率有望达1.6%,占肉类产量的比例将达65%,猪肉人均消费量将达34公斤,占肉类新增消费量66%。如今国家实施“藏粮于田”战略及畜牧业现代化建设步伐加快,为我国生猪养殖提供了巨大市场空间。中国生猪产业的前景非常可观。在生猪产业蓬勃发展的今天,猪流行性腹泻疾病的发病几率也越来越高,猪流行性腹泻疾病的蔓延正在加速,猪流行性腹泻疾病的致死率越来越高。本病于1971年首先在英国流行以来,然后扩散到欧洲和亚洲的多个国家。近年来,猪流行性腹泻病已经成为世界范围内最严重的公共卫生问题之一。仅2010~2011年间,我国已有100余万头猪死于猪流行性腹泻病毒的感染,使我国养猪业蒙受巨大经济损失。近年来,由于多种因素导致猪群感染猪流行性腹泻病情况时有发生,对养猪行业带来严重冲击。尤其是新生仔种猪营养不良,免疫力低,生长性能下降,腹泻发病率极高,严重者会引起死亡。据统计,新生仔种猪(2周龄内)死亡率约占26%,2-4周龄死亡率约占16%,然而因腹泻而死亡的占仔种猪总数的39.8%。由此可以看出,种猪流行性腹泻问题已十分严重,且给养种猪业造成了一定的经济损失,所以解决这一问题迫在眉睫。种猪流行性腹泻病,是一种危害养种猪业的典型疾病,不同于常见的真菌性和细菌性传染病,种猪流行性腹泻病会导致猪体重减轻,精神倦怠、伴随着脱水性腹泻和免疫力下降,病后死亡率很高。临床上主要发生在仔猪身上,也可以感染成年母猪或公猪。这种病很难根治,而且传播速度快、发病率很高,给我们养种猪户经济收入造成严重影响,因此做好种猪流行性腹泻病的防控成为世界各国发展生种猪产业,稳定生种猪市场与社会经济秩序的重要课题。2种猪流行性腹泻简介因冠状病毒流行起来的种猪腹泻病毒,特点是具有高度接触性、急性传播。其中最常见和重要的为病原性传播性疾病。本病类似于胃肠炎,但从病程来看,则相对较轻微。在临床上主要表现为病状不明显、潜伏期短等特征,并且发病后一般都不会出现死亡现象,但是一旦发生疫情的话,将会给养猪场造成严重的经济损失。典型的表现为呕吐、水样腹泻脱水。仔猪表现为拉稀,而成年母猪则没有任何临床特征。初生的种猪一旦受到感染,死亡率比较高。仔猪在出生后的几天内出现明显的呕吐症状,并且伴随着腹泻情况,随后逐渐发展成顽固性腹泻或者拉稀现象,最后导致整个猪群都发生严重衰竭而死亡。对于哺乳仔种猪来说,表现为呕吐,水样腹泻,脱水,食欲减退,忧郁,消瘦乃至死亡。该病具有很强传染性,在整个仔猪期都会发生。病初精神比较沉郁,胃口不大,但体温比较正常,随后出现水样及粪便,需清理,粪便灰黄或灰,气味难闻。在病初阶段会出现一定程度的贫血,随着病情发展,猪只逐渐衰竭而死,并且伴随着呼吸频率加快,心跳加快,最终导致死亡。以粪便为主污染源,尤以哺乳仔种猪为甚,它的发生率为100%。病初没有明显症状,随着病程进展,母猪会发生贫血和黄疸。哺乳仔种猪病变多在小肠内,以小肠充血,水肿为特征、肠系膜上淋巴结充血、肠系膜充血,被黄色液体填充,肠壁变薄等。在哺乳期中,母猪的发病率比较高,并且仔猪也容易感染这种疾病。成年种猪中,不拉肚子,有呕吐、厌食等症状,死亡率比较低。仔猪则会因为感染细菌而导致死亡,并且还可能会造成其他器官组织的炎症反应,严重的话还会引发败血症或者衰竭综合症。通常成年种猪、支架种猪及肥育种猪均发生持续性腹泻、精神不适,厌食等症状,继而出现持续腹泻5天左右。仔猪阶段的疾病比较少,一般没有明显变化。此病痊愈后易出现发育不良。因此,需要及时采取防治措施,防止疾病复发。由于传染性胃肠炎腹泻和流行性腹泻的发生均由同一冠状病毒引起,从流行病学角度来看、临床症状与病毒抗原的形态极其相似,仅血清学及免疫学可供鉴别诊断。3种猪流行性腹泻的致病机理影响种猪流行性腹泻涵盖有。病原性,生理性因素、饲料性,环境因素这四个方面。在这其中最常见和重要的为病原性传播性疾病。病原性因素又包括细菌,病毒等、寄生虫等所致,其中以大肠杆菌为主要病原菌,其作为肠道的主要菌种,是引起种猪腹泻的关键所在。生理性因素主要体现在种猪自身方面,断奶后的仔种猪免疫力弱,胃肠道发育还不够完全,胃酸分泌不足,胃肠消化酶过少,使得断奶仔种猪消化不良,引起腹泻。饲料中维生素含量低,日粮的pH值偏高,,或者有些饲料可能已经发生霉变,而种猪的胃肠道消化能力弱,免疫力低,,因此会引起腹泻。环境因素也是引起种猪腹泻的关键,种猪舍环境温差波动大,卫生条件差,仔种猪生长环境潮湿等都会加剧种猪流行性腹泻。种猪流行性腹泻不仅仅是由单一因素引起的,受多个因素影响,因此解决这个问题具有一定的难度。产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)对于刚出生的仔种猪及牛犊易感,而禽类,家兔、马等却不易感染不传染。该病可发生于任何日龄,以仔猪最为易感,常呈急性败血性经过。本病发病率较高,染病幼畜很快失水,出现水样腹泻,死亡率很高,对养殖业造成重大经济损失。与此同时,发展中国家婴幼儿及部分旅游者也受到这种疾病的危害。因此,该病毒是目前国际上最重要的动物疫病之一。据报告ETEC每年会导致30-50万5岁以下儿童死亡。目前对该病毒还缺乏有效的治疗方法,因此研究其致病性机理具有重要意义。ETEC的致病过程可以粗略地分为结合过程与释放过程。本文主要探讨其发病机制及治疗方法。ETEC在细菌表面黏附性菌毛上结合小肠上皮细胞特异性受体,它不受小肠内内容物影响,且在小肠中繁殖旺盛,进而生成肠毒素。其次,肠粘膜细胞分泌的多种细胞因子使肠道局部处于应激状态。肠毒素对小肠上皮细胞的表面产生影响,导致小肠内水,电解质的积蓄与代谢紊乱,因而导致腹泻。其中耐热肠毒包括大肠杆菌内毒素,嗜酸性粒细胞肠毒素以及溶血性链球菌外毒素等三种类型。在小肠上皮细胞表面受体作用后,耐热性肠毒素是通过活化鸟苷酸环化酶而产生的,提高胞内cGMP水平。不耐热的肠毒素是通过活化腺苷酸环化酶来实现的,增加胞内cAMP含量,肠上皮细胞分泌失调,使大量的水分及电解质流入肠腔内而积聚,引起腹泻。4种猪流行性腹泻的诊断4.1RT-PCR实验室用来鉴定PEDV,一般采用的是反转录=聚合酶链式反应(RT-PCR)。另外,在传统RT-PCR基础上,又派生了许多新方法,其中有实时荧光定量,套式、多重RT-PCR和其他方法可分别应用于不同的场合。实时荧光定量技术因为其简便快速,已经成为目前最常用的一种方法。多重RT-PCR能对许多病毒进行鉴别诊断,一些研究人员成功地研究了可识别传染性胃肠炎病毒的方法,A型轮状病毒、种猪圆环病毒2型和PEDV等4种病毒多重RT-PCR,给检测鉴定带来了很大的便利。RT-PCR有灵敏度高,重复性好等优点,但在设备,人员等方面都存在着一些需求,操作比较复杂,仅用于实验室。4.2ELISA酶联免疫吸附的反应(ELISA),采用的是竞争法和间接法检测PEDV。竞争ELISA是很敏感的,抗原检测用特异性单抗可对粪便进行,也可以检测血清中的抗体(Carvajaletal1995,Linetal2018),对临床检测是很有现实意义的。PEDV作为靶标间接ELISA试验方法所包被抗原通常为全病毒,保守N,S,M蛋白,通常利用原核或者真核表达系统制备蛋白(Sozzietal2018,Maetal2019)。4.3胶体金试纸检测技术胶体金免疫层析技术(GoldImmunochromatographicAssay,GICA)是一种新型的固相标记免疫分析技术,它以胶体金为标志进行示踪,标记抗体并在添加抗原或者抗体之类的样本时前移,通过抗原与抗体反应特异性而聚集,利用胶体金生成的显色反应,获得了结果。由于抗生素可以杀灭病原微生物而使动物获得一定程度的康复,所以人们又把它叫做“万能药”。较常用的检测方法有竞争法等、采用双抗体夹心法及SPA/蛋白G法。双抗体夹心法是以单抗为探针,用不同浓度的金颗粒对其进行杂交。在竞争法上,金标单抗在检测线的T线上和待测抗原进行竞争结合,故T线无条带时呈阳性。双抗夹心法是利用两个不同的抗体分别结合在待测抗原的两端,从而形成一条清晰的带。在此基础上发展起来了许多不同类型的检测法。用SPA/蛋白G法检测时,待检测抗体既能与胶体金抗原相结合,又能与T线上SPA/蛋白质G相结合,并使得T线呈条带,常用于抗体检测。Liu等用检测SIgA含量的方法评估PEDV感染及免疫状态。免疫胶体金检测试纸可在10min内特异性检测PEDV抗体。分泌性免疫球蛋白A(Secretoryimmunoglobulin,SIgA)的抗体。此外,还能反映病毒复制过程及其相关基因表达量的变化情况。免疫层析检测试纸检测速度快,灵敏度高。同时研究PEDV,可以进行流行病学监测,疫苗免疫接种等。5种猪流行性腹泻的治疗5.1抗生素为控制这一病情的发生,一些抗生素被用来治疗种猪腹泻。抗生素也称抗菌素,它是由抗病原体(或其他活性的化合物),放线菌和其他微生物经过培养产生的,也可以用化学方法进行合成,能干扰其他细胞的生长发育。抗生素可干扰细菌蛋白的合成,抑制细菌核酸的复制转录,从而实现抑菌效果。抗生素可以用于预防疾病,同时也可作为兽药广泛应用于动物养殖领域中。抗生素具有起效迅速、抗菌谱广等特点,作用效果良好,用抗生素预防种猪腹泻最为普遍,临床常用的药品以诺氟沙星为主、恩诺沙星硫酸庆大霉素、如阿普拉霉素等等。由于这些药物长期应用于养殖生产当中,造成严重的危害。尽管疗效显着,但伴随着抗生素及同类物在饲料添加剂中被不合理应用,造成细菌耐药性抗生素的药物残留、毒副作用大的问题也逐渐凸显。由于抗生素种类繁多,在生产应用中存在着滥用现象,使一些病原菌产生了较强的耐药性。大量耐药菌株产生,使某些抗生素的作用能力下降,甚至无效。与此同时,药物残留和毒副作用问题也逐渐突显出来。监测所分离病原性大肠杆菌耐药情况,找到病原性大肠杆菌氯霉素的来源、复方新诺明,多西环素、链霉素耐药率分别为100%、86.7%、82.3%、81.8%,对其他5种抗生素耐药率超过56.4%,并且多数大肠杆菌是多重耐药。这些结果表明,目前许多常用于预防和治疗动物疾病的抗菌药物已被广泛用于养殖生产,并导致病原菌对某些抗菌素产生了不同程度的耐药性。长期大剂量应用抗生素,不但会导致细菌耐药性的出现,也会破坏种猪脏器功能,毒副作用较大,打破了人体微生态平衡,与此同时,药物残留也有可能对环境产生污染。因此,为了确保养殖业的健康发展,必须采取科学手段来减少和消除养殖过程中滥用或不合理应用抗生素给人类带来的危害。为此,世界上许多国家都在持续地推出各项政策,禁用某些抗生素用于饲料目前寻求的是安全,环保、毒副作用小的药替代抗生素更显重要5.2微生态制剂近年来,微生态制剂已成为防治种猪腹泻一种新方法。乳酸菌做为一种重要益生菌,能表达免疫作用抗原,诱发人体免疫应答。据了解,饲料中加入1.0%o复合微生态制剂肽菌素,不但能减少种猪腹泻率,增强种猪的免疫力,提高生产性能,也可以调节肠道菌群平衡。本试验采用了将乳酸菌接种于发酵豆粕中制得混合菌悬液,再加入到仔猪日粮中进行饲养。以复合微生态制剂替代饲粮抗生素,喂养断奶仔种猪30d后,复合微生态制剂可显着减少断奶仔种猪粪大肠杆菌的数量,乳酸菌的含量显著增加,实现种猪腹泻率下降的目的、改良种猪肠道等目的。同时也减少了抗生素对环境造成的污染。尽管微生态制剂是安全性的、无耐药性及毒副作用,但疗程较长,只有通过增强机体免疫力,调整肠道平衡,才能起到作用。5.3中药治疗中药属于传统药材,由古至今,历经千年研究历久弥新,在治疗各种疑难病症上发挥了重大作用,属实是中国国粹。这些药物对肠道细菌有较强的抑制作用,可用于治疗畜禽细菌性疾病。现代研究证明,中药具有抗肿瘤,抗炎,抗菌、调节免疫力等等的作用。中药含有丰富的天然化学成分及营养成分,具有安全环保的特点,毒副作用小、不产生耐药性的优点,受到了国内外学者们的广泛关注。其中的有效成分具有抑菌和提高机体免疫力的作用,同时价格低、毒副作用小、无耐药性,应用中草药治疗种猪流行性腹泻具有广阔的发展前景。20世纪50年代就有中药被发现具有抗菌抑菌,清热解毒的作用,例如,黄连,黄芩,黄柏等中药。并且中药已广泛应用到了猪腹泻的治疗上,例如研究证明,含有高黄柏中药发酵的添加剂不仅能够减少断仔种猪腹泻率,同时还能改善它们的生长性能。同时,也可用于预防仔猪黄痢病以及改善母猪繁殖机能。另外,一些学者还把开发的中药复方制剂补中益气散给将要投产的母种猪服用,作为产前调理。另外,在临床上对患有仔猪黄痢或白痢的母猪进行试验时,发现该方具有良好的预防效果。中药对仔种猪腹泻的治疗,虽有良好的发展前景,但是目前缺乏系统研究,临床疗效不明确等。其次,中草药的组成品种繁杂,在诸多环境因素的作用下,且炮制方法也会影响其成分含量,所以,药材质量控制非常关键。由于不同产地及品种间药效差异较大,导致了在使用中出现一定程度上的盲目性,从而增加药物成本。虽然已有许多预防种猪流行性腹泻经验处方,但是大多比较粗糙、准确率较低等。再者,由于药物本身具有毒副作用及耐药性等因素的制约,临床应用效果并不显着。与此同时,中草药方剂的配伍机制和有效物质基础研究还不够成熟,推广应用比较困难。因此中草药对仔种猪腹泻的治疗仍需继续改进。6种猪流行性腹泻的预防6.1免疫预防导致种猪流行性腹泻发生的原因很多,种类多样且致死率极高,因此,防止种猪流行性腹泻感染具有重要意义。在我国,种猪流行性腹泻主要以免疫接种为主,而目前生产中常用的疫苗种类繁多,使用时需要根据不同地区选择合适的疫苗进行预防注射才能达到良好的防控作用。通过给产乳母种猪进行ETEC—F4(k88)和F5(k99)接种、接种F6(987P)、F41以能减少患病危险。近年来随着对仔猪免疫机制研究的深入,一些新型疫苗被开发出来用于控制种猪流行性腹泻。但是疫苗对种猪腹泻防治效果却迟迟未见成效,因不致病因素复杂,分布也存在着差异,给疫苗的研发带来了一定的难度,因此,迄今为止,我国还没有任何一款疫苗都彻底地防止种猪腹泻。并且,疫苗还具备生产成本高、安全性等等的问题。疫苗接种是预防和控制PED这一病毒性传染病的最佳途径。马思奇等学者针对CV777,经过了28次Vero细胞传代后制成了灭活疫苗,这种疫苗对于仔种猪提高免疫力高达85%以上。灭活疫苗安全性虽然高,但是能在仔种猪身体里停留的时间较少,需用量大,弱毒类的疫苗要求较低,成本较低、见效较快,多用于紧急免疫。因此,近年来,国内外学者致力于研制新型疫苗,其中就有弱毒疫苗和基因工程疫苗。一些研究显示,母种猪在怀孕晚期,如果可以口服致弱毒苗免疫,就能够有效提高仔种猪母源的抗体,大大降低新生仔种猪发病率。目前国内对于弱毒疫苗和基因工程疫苗进行了广泛地试验研究,但仍处于探索阶段,没有形成统一规范。尽管弱毒疫苗有其优点,但仍有潜在的安全风险,而现在正在研究中的基因工程疫苗安全性更加的高,因此外界很期待该疫苗的研发成功。6.2全菌苗灭活培养后菌液,然后通过乳化得到的就是全菌苗,并且这样所获的疫苗成本低廉,抗原成分综合,免疫保护作用都可以有100%。研究证明,种猪致病性大肠杆菌佐剂疫苗完全能使得实验鼠的免疫力提高,起到了良好的预防作用。但是,全菌苗存在较大局限性,种猪流行性腹泻血清型繁多,毒力因子变异可能性高,使全菌苗适用范围减少,仅能对某些菌株起作用。6.3基因工程疫苗基因工程疫苗就是利用基因重组技术,对编码后进行保护性处理、能够引起免疫反应的病原体被插入质粒中,以及引入体内生成抗原蛋白,诱发人体免疫应答。在预防仔猪黄痢方面应用比较广泛。采用口服及肌肉内给药的方法,能提高免疫母种猪初乳中IgA,IgG含量,仔种猪血清中lgG,IgA含量显著升高,表明接种疫苗能引起种猪全身性及免疫反应,而口服及肌肉给药均能有效保护种猪不受种猪流行性腹泻感染。由于大肠杆菌在自然界分布广泛,对外界环境抵抗力较强,因此,近年来随着基因工程疫苗不断开发应用于生产中,使得大肠杆菌病的防治取得了较大进展。尽管基因工程疫苗在开发致病性大肠杆菌疫苗方面提供了一种行之有效的方法,但是,根据当前多种商品性或实验性大肠杆菌病疫苗在研究和应用中,与基因工程苗相比,常规苗具有更好的免疫效果。6.4亚单位疫苗亚单位疫苗的基本原理是从菌毛中提取黏附素,然后再采用佐剂乳化进行调配。近年来随着规模化养猪场数量增多,种猪流行性腹泻也越来越多。新型的多价疫苗主要是将肠毒素融合蛋白SLS(STa-LTB-STb)和纤维F4ac,F5抗原进行配制。并且接种的效果来看,接种的全部母种猪血清,初乳lgG效价明显的高于用来对比的未免疫组,接种组的仔种猪情况也更好一些。因此,亚单位的疫苗从上述结果来看是可以有效提高仔猪对传染性疾病的抵抗力。另外,注射疫苗后,仔种猪均未出现过腹泻的现象,对比用的组内有30%的仔种猪发生了腹泻情况,这更加说明疫苗可以有效防止种猪流行性腹泻的发病。但该疫苗的生产过程比较繁琐,且操作难度较大,价格较高,不宜普及。结论由种猪流行性腹泻会导致急性或是致死性的传染病,而且多发于0-7d仔种猪中出现。伴随的特征有拉稀,或是拉出呈黄色液状的粪便,发病率及死亡率均很高,是危害种猪养殖业的重大地方性疾病。近年来随着规模化养猪场数量增多,种猪流行性腹泻也越来越多。为了有效的避免种猪流行性腹泻继续传播,应该及时有效地采取防控措施,保证仔种猪免受疾病侵袭,使得仔种猪能够健康成长,以免给种猪场造成严重经济损失。本文就目前国内外流行的几种病毒性疫病进行了介绍,并对各种疫苗作出了简要分析,提出了相应的预防控制方案,以供参考。种猪场必须遵循自场繁殖和养殖的原则,防疫隔离措施至关重要,投产前,要对储备的种猪进行3个月以上的隔离,一但发现了问题,就要及时采取有效措施。同时要建立严格的免疫程序,加强日常管理。隔离间要建在种猪场的下风位置,距离其他种猪舍不少于500m。种猪饲养室要远离水源、道路及居民区,以保证种猪有良好的生活条件。搞好环境消毒工作,种猪舍四周每月消毒一次,每隔半月给种猪消毒一次。种猪场要配备专人负责种猪管理和疾病预防,加强种猪的免疫接种工作。外环境及走廊过道用石灰、烧碱等每天消毒。带种猪的消毒可采用模范碘按1:200比例,可换用戊二醛等、过硫酸氢钾等等,勤除种猪场杂草,且常灭蚊,鼠,避免带入病毒。另外,在种猪场内设置专用隔离室,保证人员进出有严格的制度规定。建立健全猪场的生物安全体系,重点做好卫生清扫和消毒工作,把消毒卫生工作渗透到猪场生产过程中。对饲养人员加强健康教育,使他们了解疫病防治
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