DB37T 4204-2020 水貂阿留申病诊断与净化技术

DB37Aleutiandiseasediagnoseandcleaning-uptechnologyforminkfarm山东省市场监督管理局发布I李玉杰、刘长浩、徐鸿、李金波、马慧玲、蔺晓月、崔凯、陈静、李富金、王1水貂阿留申病诊断与净化技术本标准规定了水貂阿留申病临床诊断技术、病毒抗体检测技术、荧光PCR检测、病兽淘汰技术、兽本标准适用于水貂阿留申病感染动物的筛选、感染控制GB/T6682分析实验室用水规格DB37/T2381规模化水貂养殖场生物安全DB37/T2660规模化毛皮动物养殖场消毒3.1.2传染源主要为病貂和隐性感染貂。病毒的群间传播主要是来自感染貂的唾液、粪便和尿3.1.3有明显的季节性，秋冬季节的发病率与病死率明显地比其他季3.2.1渐进性消瘦：病貂食欲时好时坏3.2.2出血和贫血：口腔、齿龈、软腭、硬腭和舌根有大量出血点和出血斑，内脏器官尤其是3.2.5本病预后不良，对症治疗可缓解症状。常复发，最后衰23.3.3肝、脾、淋巴结肿胀，肝呈土黄色，3.3.4怀孕期发病可见死胎、胎儿液化、吸收或者出现木乃伊胎儿、子宫4抗体检测4.1样品的采集与保存注射器、离心管架、剪刀或指甲剪、酒精棉、干脱脂棉、记号笔，有条件的使用采血板和毛细管。4.1.2采血方法：将水貂保定，剪刀酒精棉消毒，中趾趾间毛细管采血或直接剪掉中4.1.3样品保存及运输：2℃~8℃,不超过24h。4.2样品处理将装有血液的离心管静置，待血清析出，经4000r/min离心3min～5min，取血清置于1.5mL离心4.3对流免疫检测5.1仪器设备5.1.4冰箱（2℃~8℃和-20℃两种）。5.2试剂或材料35.3样品的采集与保存5.3.4存放采集或处理的样本在2℃~8℃条件下保存，不超过24h。普通提取方法，或者采用经验证的病毒DNA提取试剂盒，按照试剂盒使用说明书提照+1管阳性对照）。5.4.3加样在样品处理区进行。分别向上述PCR管中加入样本核酸提取步骤5.4.1中制备的DNA溶液10μL，盖在检测区进行。将加样后的PCR管放入荧光PCR检测仪内，记录PCR管摆放顺序。反应参数设置：第45.5结果判定选定FAM检测通道读取检测结果；ABI仪器，选择FAM作为报告荧光基团，无淬灭荧光基复验：Ct/Cp值大于30.0，且出现典型的扩增曲线的样品建议复验。复6.1检测方法的选择：抗体检测技术适用于群体检测，PCR检测技术适6.3一次性净化：把检测出的阳性水貂直接淘汰6.4逐步净化：实行阿留申病毒阴阳性貂分场（群）饲养，逐步淘汰阳性貂。分（场）群后，应建立对污染的饲料、垫料等废弃物以及粪便、污水应按照GB7959和GB8978进行无害化处理。5病死水貂按照农业农村部《病死及病害动物无害化处理6FCAACCCTCCAGGTCAACRCTCTTAACAGGATTCCAGPFAM-AAGCTTGCCTCTCCAAGTAAAGTAAC7——2℃~8℃冰箱；）；8——样本的保存，核酸提取、贮存及其加入至扩增反应管在样本制备区进行；——对实验