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默写小纸条11、发酵是指人们利用微生物,在适宜的条件下,将原料通过微生物的代谢转化为人类所需的产物的过程。2、直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术一般称为传统发酵技术。3、制作泡菜(1)泡菜制作的菌种是乳酸菌,来自蔬菜表面。常见乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌,其中乳酸杆菌常用于生产酸奶。(2)乳酸菌属于原核生物,代谢类型为异养厌氧型,以二分裂方式增殖。(3)泡菜制作原理:乳酸菌在无氧条件下进行乳酸发酵,将葡萄糖分解成乳酸。(C6H12O6→2C3H6O3+能量)(4)配制盐水:盐水的质量分数为5%~20%,,盐水要煮沸冷却。煮沸的目的是灭菌除氧,冷却是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。盐有灭菌、渗出蔬菜中过多的水分以及调味的作用。盐水浓度不能太高,因为盐水浓度太高会引起乳酸菌细胞渗透失水,影响乳酸菌生长繁殖,甚至导致乳酸菌死亡。在冷却后的盐水中加入少量“陈菜泡液”,目的是增加乳酸菌数量,缩短泡菜制作时间。默写小纸条11、发酵是指人们利用微生物,在适宜的条件下,将原料通过微生物的代谢转化为人类所需的产物的过程。2、直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术一般称为传统发酵技术。3、制作泡菜(1)泡菜制作的菌种是乳酸菌,来自蔬菜表面。常见乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆,其中乳酸杆菌常用于生产酸奶。(2)乳酸菌属于原核生物,代谢类型为异养厌氧型,以二分裂方式增殖。(3)泡菜制作原理:乳酸菌在无氧条件下进行乳酸发酵,将葡萄糖分解成乳酸。(C6H12O6─→2C3H6O3+能量)(4)配制盐水:盐水的质量分数为5%~20%,盐水要煮沸冷却。煮沸的目的是灭菌除氧,冷却是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。盐有灭菌、渗出蔬菜中过多的水分以及调味的作用。盐水浓度不能太高,因为盐水浓度太高会引起乳酸菌细胞渗透失水,影响乳酸菌生长繁殖,甚至导致乳酸菌死亡。在冷却后的盐水中加入少量“陈菜泡液”,目的是增加乳酸菌数量,缩短泡菜制作时间。(5)加入调味料后要装坛密封(坛盖边沿水槽注水),目的是创造无氧条件,利用乳酸菌发酵。(6)泡菜中亚硝酸盐的含量与腌制时间、腌制温度和食盐用量有关。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短,易造成细菌大量繁殖,使亚硝酸盐含量增加。一般在腌制

10d后,亚硝酸盐的含量开始下降。(7)发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量,原因是发酵不同时期亚硝酸盐含量会发生变化,及时测定是为了把握取食泡菜的最佳时机。泡菜腌制过程中,亚硝酸盐的含量先增加后减少,最后稳定在较低水平。(8)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间,泡菜液逐渐变酸,这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加,杂菌数量减少,

原因是乳酸菌比杂菌更耐酸。(5)加入调味料后要装坛密封(坛盖边沿水槽注水),目的是创造无氧条件,利用乳酸菌发酵。(6)泡菜中亚硝酸盐的含量与腌制时间、腌制温度和食盐用量有关。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短,易造成细菌大量繁殖,使亚硝酸盐含量增加。一般在腌制

10d后,亚硝酸盐的含量开始下降。(7)发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量,原因是发酵不同时期亚硝酸盐含量会发生变化,及时测定是为了把握取食泡菜的最佳时机。泡菜腌制过程中,亚硝酸盐的含量先增加后减少,最后稳定在较低水平。(8)从开始制作到泡菜质量最佳这段时间,泡菜液逐渐变酸,这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加,杂菌数量减少,

原因是乳酸菌比杂菌更耐酸。默写小纸条2制作果酒和果醋(1)果酒制作菌种是酵母菌,是一种单细胞真菌,真核生物,代谢类型为异养兼厌氧型,适宜条件下进行出芽生殖。酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖,无氧条件下进行酒精发酵产生酒精。①有氧呼吸反应式:C6H12O6+6H2O+6O2─→6CO2+12H2O+大量能量②无氧呼吸反应式:C6H12O6─→2C2H5OH+2CO2+少量能量

制酒原理:酵母菌无氧呼吸将葡萄糖转化为酒精。(2)果醋制作菌种是醋酸菌,原核生物,代谢类型为异养需氧型,以二分裂方式增殖。原理:①当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。②当氧气充足,缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再变为醋酸。(3)葡萄酒的自然发酵,菌种来自附着在葡萄皮上的野生型酵母菌;工业酿酒可在无菌条件下人工接种酵母菌菌种。(4)葡萄酒呈现深红色的原因:在发酵过程中,红葡萄皮的色素进入发酵液中,使葡萄酒呈现深红色。(5)在传统酿酒过程中,一般不需要严格的灭菌过程,是因为在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,绝大多数其他微生物无法适应而受到抑制。(6)果酒制作中,酒精含量达一定程度后不变,CO2

也不产生,原因可能是原料耗尽或高浓度的酒精抑制了酵母菌细胞呼吸。(7)喝剩的果酒放置一段时间后会变酸,原因是醋酸菌在有氧条件下把酒精变为醋酸。(8)制作果醋时,变酸的酒表面常常有一层白色菌膜,这层白色菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的。默写小纸条2制作果酒和果醋(1)果酒制作菌种是酵母菌,是一种单细胞真菌,真核生物,代谢类型为异养兼厌氧型,适宜条件下进行出芽生殖。酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖,无氧条件下进行酒精发酵产生酒精。酶①有氧呼吸反应式:C6H12O6+6H2O+6O2─→6CO2+12H2O+大量能量酶②无氧呼吸反应式:C6H12O6─→2C2H5OH+2CO2+少量能量制酒原理:酵母菌无氧呼吸将葡萄糖转化为酒精。(2)果醋制作菌种是醋酸菌,原核生物,代谢类型为异养需氧型,以二分裂方式增殖。原理如下:①当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。②当氧气充足,缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再变为醋酸。(3)葡萄酒的自然发酵,菌种来自附着在葡萄皮上的皮上的野生型酵母菌;工业酿酒可在无菌条件下人工接种酵母菌菌种。(4)葡萄酒呈现深红色的原因:在发酵过程中,红葡萄皮的色素进入发酵液中,使葡萄酒呈现深红色。(5)在传统酿酒过程中,一般不需要严格的灭菌过程,是因为在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,绝大多数其他微生物无法适应而受到抑制。(6)果酒制作中,酒精含量达一定程度后不变,CO2

也不产生,原因可能是原料耗尽或高浓度的酒精抑制了酵母菌细。(7)喝剩的果酒放置一段时间后会变酸,原因是醋酸菌在有氧条件下把酒精变为醋酸。(8)制作果醋时,变酸的酒表面常常有一层白色菌膜,这层白色菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的。默写小纸条2制作果酒和果醋(1)果酒制作菌种是酵母菌,是一种单细胞真菌,真核生物,代谢类型为异养兼厌氧型,适宜条件下进行出芽生殖。酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖,无氧条件下进行酒精发酵产生酒精。①有氧呼吸反应式:C6H12O6+6H2O+6O2─→6CO2+12H2O+大量能量②无氧呼吸反应式:C6H12O6─→2C2H5OH+2CO2+少量能量制酒原理:酵母菌无氧呼吸将葡萄糖转化为酒精。(2)果醋制作菌种是醋酸菌,原核生物,代谢类型为异养需氧型,以二分裂方式增殖。原理如下:①当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。②当氧气充足,缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再变为醋酸。(3)葡萄酒的自然发酵,菌种来自附着在葡萄皮上的野生型酵母菌;工业酿酒可在无菌条件下人工接种酵母菌菌种。(4)葡萄酒呈现深红色的原因:在发酵过程中,红葡萄皮的色素进入发酵液中,使葡。(5)在传统酿酒过程中,一般不需要严格的灭菌过程,是因为在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,绝大多数其他微生物无法适应而受到抑制。(6)果酒制作中,酒精含量达一定程度后不变,CO2

也不产生,原因可能是原料耗尽或高浓度的酒精抑制了酵母菌细。(7)喝剩的果酒放置一段时间后会变酸,原因是醋酸菌在有氧条件下把酒精变为醋酸。(8)制作果醋时,变酸的酒表面常常有一层白色菌膜,这层白色菌膜是醋酸菌大量形成的。默写小纸条2制作果酒和果醋(1)果酒制作菌种是酵母菌,是一种单细胞真菌,真核生物,代谢类型为异养兼厌氧型,适宜条件下进行出芽生殖。酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖,无氧条件下进行酒精发酵产生酒精。①有氧呼吸反应式:C6H12O6+6H2O+6O2─→6CO2+12H2O+大量能量②无氧呼吸反应式:C6H12O6─→2C2H5OH+2CO2+少量能量制酒原理:酵母菌无氧呼吸将葡萄糖转化为酒精。(2)果醋制作菌种是醋酸菌,原核生物,代谢类型为异养需氧型,以二分裂方式增殖。原理如下:①当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。②当氧气充足,缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再变为醋酸。(3)葡萄酒的自然发酵,菌种来自附着在葡萄皮上的野生型酵母菌;工业酿酒可在无菌条件下人工接种酵母菌菌种。(4)葡萄酒呈现深红色的原因:在发酵过程中,红葡萄皮的色素进入发酵液中,使葡萄酒呈现深红色。(5)在传统酿酒过程中,一般不需要严格的灭菌过程,是因为在缺氧、呈酸性的发酵液中,酵母菌可以生长繁殖,绝大多数其他微生物无法适应而受到抑制。(6)果酒制作中,酒精含量达一定程度后不变,CO2

也不产生,原因可能是原料耗尽或高浓度的酒精抑制了酵母菌细胞呼吸。(7)喝剩的果酒放置一段时间后会变酸,原因是醋酸菌在有氧条件下把酒精变为醋酸。(8)制作果醋时,变酸的酒表面常常有一层白色菌膜,这层白色菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的。1.果酒和果醋制作流程:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵(→果酒)→醋酸发酵(→果醋)①新鲜的葡萄应先冲洗再去梗。若先去梗再冲洗,会造成汁液流失和杂菌污染。②冲洗的目的是洗去浮尘,但不能反复冲洗,以防止菌种流失。③葡萄汁装入发酵瓶,要留约1/3的空间,目的是让酵母菌有氧呼吸大量繁殖,防止发酵液溢出。④果酒制作温度控制在18~25℃,时间为10~12d;果醋制作温度控制在30~35℃,时间为7~8d。⑤果酒制作前期需氧后期不需氧,果醋制作一直需氧。2.果酒和果醋制作的发酵装置(见右图)①充气口:在酒精发酵时应关闭;在醋酸发酵时连接充气泵泵入无菌空气。②排气口:酒精发酵时排出酵母菌产生的CO2;醋酸发酵时排出剩余的空气、CO2。③出料口:取样、监测。④排气口连接长而弯曲的胶管目的是防止空气中微生物的污染。注:若使用带盖的瓶子制果酒果醋:在发酵过程中,每隔12h左右将瓶盖拧松一次,以放出CO2,此后再将瓶盖拧紧。当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,盖上一层纱布,进行制果醋的发酵。3.酒精检测:在酸性条件下,橙色的重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色。4、培养基按物理性质分为液体培养基和固体培养基,区别是固体培养基中加入了凝固剂琼脂;按用途分为选择培养基和鉴别培养基。微生物可在固体培养基表面形成肉眼可见的菌落,固体培养基可用于微生物的分离、鉴定、活菌计数和保藏菌种。默写小纸条35、各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。另外,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如培养细菌(如乳酸杆菌)时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性,培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。6、牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。牛肉膏提供的主要营养是碳源、磷酸盐和维生素等;蛋白胨提供的主要营养是氮源和维生素等。7、无菌技术的目的是获得纯净培养物,关键是创造无菌条件,防止外来杂菌的入侵。8、消毒和灭菌(1)消毒:用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物,不包括芽孢和孢子。具体方法有:日常生活中经常用到煮沸消毒法;对于一些不耐高温的液体,如牛奶,用巴氏消毒法,既杀死牛奶中微生物,又使牛奶中的营养成分不被破坏;用酒精擦拭双手、氯气消毒水源是化学药剂消毒法;接种室、接种箱或超净工作台用紫外线消毒法。(2)灭菌:用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。具体方法有:灼烧灭菌:如接种环、接种针、试管口、瓶口。干热灭菌:如培养皿、试管、吸管等,所用工具是干热灭菌箱。高压蒸汽灭菌(湿热灭菌):如培养基、无菌水、移液管,所用工具是高压蒸汽灭菌锅。

默写小纸条31、果酒和果醋制作流程:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精酵(→果酒)→醋(→果醋)①新鲜的葡萄应先冲洗再去梗。若先去梗再冲洗,会造成汁液流失和杂菌污染。②冲洗的目的是洗去浮尘,但不能反复冲洗,以防止菌种流失。③葡萄汁装入发酵瓶,要留约1/3的空间,目的是让酵母菌有氧呼吸大量繁。④果酒制作温度控制在18~25℃,时间为10~12d;果醋制作温度控制在30℃,时间为7~8d。⑤果酒制作前期需氧后期不需氧,果醋制作一直需氧。2、果酒和果醋制作的发酵装置(见右图)①充气口:在酒精发酵时应关闭;在醋酸发酵时连接充气泵泵入无菌空气。②排气口:酒精发酵时排出酵母菌产生的CO2;醋酸发酵时排出剩余的空气、CO。③出料口:取样、监测。④排气口连接长而弯曲的胶管目的是防止空气中微生物的污染。注:若使用带盖的瓶子制果酒果醋:在发酵过程中,每隔12h左右将瓶盖拧松一次,以放出CO2,此后再将瓶盖拧紧。当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,盖上一层纱布,进行制果醋的发酵。3、酒精检测:在酸性条件下,橙色的重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色。4、培养基按物理性质分为液体培养基和固体培养基,区别是固体培养基中加入了凝固剂琼脂;按用途分为选择培养基和鉴别培养基。微生物可在固体培养基表面形成肉眼可见的菌落,固体培养基可用于微生物的分离、鉴定、活菌计数和保藏菌种。5、各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。另外,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如培养细菌(如乳酸杆菌)时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性,培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。6、牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。牛肉膏提供的主要营养是碳源、磷酸盐和维生素等;蛋白胨提供的主要营养是氮源和维生素等。7、无菌技术的目的是获得纯净培养物,关键是创造无菌条件,防止外来杂菌的入侵。8、消毒和灭菌(1)消毒:用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物,不包括芽孢和孢子。具体方法有:日常生活中经常用到煮沸消毒法;对于一些不耐高温的液体,如牛奶,用巴氏消毒法,既杀死牛奶中微生物,又使牛奶中的营养成分不被破坏;用酒精擦拭双手、氯气消毒水源是化学药剂消毒法;接种室、接种箱或超净工作台用紫外线消毒法。(2)灭菌:用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。具体方法有:灼烧灭菌:如接种环、接种针、试管口、瓶口。干热灭菌:如培养皿、试管、吸管等,所用工具是干热灭菌箱。高压蒸汽灭菌(湿热灭菌):如培养基、无菌水、移液管,所用工具是高压蒸汽灭菌锅1.果酒和果醋制作流程:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵(→果酒)→醋酸发酵(→果醋)①新鲜的葡萄应先冲洗再去梗。若先去梗再冲洗,会造成汁液流失和杂菌污染。②冲洗的目的是洗去浮尘,但不能反复冲洗,以防止菌种流失。③葡萄汁装入发酵瓶,要留约1/3的空间,目的是让酵母菌有氧呼吸大量繁殖,防止发酵液溢出。④果酒制作温度控制在18~35℃,时间为10~12d;果醋制作温度控制在30~35℃,时间为7~8d。⑤果酒制作前期需氧后期不需氧,果醋制作一直需氧。2.果酒和果醋制作的发酵装置(见右图)①充气口:在酒精发酵时应关闭;在醋酸发酵时连接充气泵泵入无菌空气。②排气口:酒精发酵时排出酵母菌产生的CO2;醋酸发酵时排出剩余的空气、CO2。③出料口:取样、监测。④排气口连接长而弯曲的胶管目的是防止空气中微生物的污染。注:若使用带盖的瓶子制果酒果醋:在发酵过程中,每隔12h左右将瓶盖拧松一次,以放出CO2,此后再将瓶盖拧紧。当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,盖上一层纱布,进行制果醋的发酵。默写小纸条33.酒精检测:在酸性条件下,橙色的重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色。4、培养基按物理性质分为液体培养基和固体培养基,区别是固体培养基中加入了凝固剂琼脂;按用途分为选择培养基和鉴别培养基。微生物可在固体培养基表面形成肉眼可见的菌落,固体培养基可用于微生物的分离、鉴定、活菌计数和保藏菌种。5、各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。另外,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如培养细菌(如乳酸杆菌)时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性,培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。6、牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。牛肉膏提供的主要营养是碳源、磷酸盐和维生素等;蛋白胨提供的主要营养是氮源和维生素等。7、无菌技术的目的是获得纯净培养物,关键是创造无菌条件,防止外来杂菌的入侵。8、消毒和灭菌(1)消毒:用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物,不包括芽孢和孢子。具体方法有:日常生活中经常用到煮沸消毒法;对于一些不耐高温的液体,如牛奶,用巴氏消毒法,既杀死牛奶中微生物,又使牛奶中的营养成分不被破坏;用酒精擦拭双手、氯气消毒水源是化学药剂消毒法;接种室、接种箱或超净工作台用紫外线消毒法。(2)灭菌:用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。具体方法有:灼烧灭菌:如接种环、接种针、试管口、瓶口。干热灭菌:如培养皿、试管、吸管等,所用工具是干热灭菌箱。高压蒸汽灭菌(湿热灭菌):如培养基、无菌水、移液管,所用工具是高压蒸汽灭菌锅。默写小纸条41、在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。获得纯培养物的过程称纯培养,包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。2、制备培养基:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(1)在溶化后灭菌前调节pH,若先灭菌后调pH易污染培养基。

(2)培养基高压蒸汽灭菌,培养皿干热灭菌。(3)平板冷却后,将平板倒置的原因:防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染。3、微生物接种方法(分离纯化细菌方法)(1)平板划线法法:通过接种环(工具)在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,即菌落。①灼烧接种环目的:第一次灼烧:避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;以后每次划线前灼烧:杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种来自上次划线末端;划线结束灼烧:杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。灼烧次数=划线次数+1。②在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高杀死菌种。③每次从上一次划线的末端开始,目的是将聚集的菌体逐步稀释分散到培养基表面,以便得到单个菌落。(2)稀释涂布平板法:用移液管(工具)和无菌水将菌液进行一系列的梯度稀释,然后用涂布器(工具)将不同稀释度的菌液分别均匀地涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。①梯度稀释原因:培养液中菌体浓度高,直接培养很难分离得到单菌落。②梯度稀释中,每次取样前需用手指轻压移液管橡皮头,吹吸三次,目的是使微生物和无菌水混合均匀。注:①以上操作均在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌污染。②若要分离纯化并统计活菌数,应选用稀释涂布平板法。③平板划线法不能用于活菌计数的原因:菌落连成片,无法计数。。默写小纸条41、在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。获得纯培养物的过程称纯培养,包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。2、制备培养基:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(1)在溶化后灭菌前调节pH,若先灭菌后调pH易污染培养基。

(2)培养基高压蒸汽灭菌,培养皿干热灭菌。(3)平板冷却后,将平板倒置的原因:防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染。3、微生物接种方法(分离纯化细菌方法)(1)平板划线法法:通过接种环(工具)在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,即菌落。①灼烧接种环目的:第一次灼烧:避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;以后每次划线前灼烧:杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使每次划线的菌种来自上次划线末端;划线结束灼烧:杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。灼烧次数=划线次数+1。②在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,以免接种环温度太高杀死菌种。③每次从上一次划线的末端开始,目的是将聚集的菌体逐步稀释分散到培养基表面,以便得到单个菌落。(2)稀释涂布平板法:用移液管(工具)和无菌水将菌液进行一系列的梯度稀释,然后用涂布器(工具)将不同稀释度的菌液分别均匀地涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。①梯度稀释原因:培养液中菌体浓度高,直接培养很难分离得到单菌落。②梯度稀释中,每次取样前需用手指轻压移液管橡皮头,吹吸三次,目的是使微生物和无菌水混合均匀。注:①以上操作均在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌污染。②若要分离纯化并统计活菌数,应选用稀释涂布平板法。③平板划线法不能用于活菌计数的原因:菌落连成片,无法计数。默写小纸条51、在自然界寻找目的菌:要根据目的菌对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。实验室目的菌株筛选原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH

等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。2、选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。例如:以尿素为唯一氮源的培养基可筛选出尿素分解菌;以纤维素为唯一碳源的培养基可筛选出纤维素分解菌;以石油为唯一碳源的培养基可筛选出石油分解菌;缺乏有机碳源的培养基可筛选出自养微生物;缺乏氮源的培养基可筛选出固氮微生物;加入抗生素的培养基可筛选出酵母菌、霉菌等真菌。3、微生物计数方法(1)稀释涂布平板法(活菌计数法)①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。②原则:设置重复组,同一稀释度下至少涂布3个平板,增强实验说服力和准确性;重复组结果应一致。为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。③计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M(个/mL)。其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液体积(mL),M代表稀释倍数。④结果:统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。⑤需要设置未接种(或接种等量无菌水)的培养基作为空白对照,目的是判断培养基是否被杂菌污染。(2)显微镜直接计数法①主要用具:血细胞计数板和显微镜。②血细胞计数板使用方法:“先盖后滴再吸”,即先盖盖玻片,后滴培养液,再用吸水纸吸。③计算公式:1mL培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400×104×稀释倍数(个/mL)④结果:估算值比实际值偏大,因为该方法不能区分细胞的死活,计数到的默写小纸条51、在自然界寻找目的菌:要根据目的菌对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找。实验室目的菌株筛选原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH

等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。2、选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。例如:以尿素为唯一氮源的培养基可筛选出尿素分解菌;以纤维素为唯一碳源的培养基可筛选出纤维素分解菌;以石油为唯一碳源的培养基可筛选出石油分解菌;缺乏有机碳源的培养基可筛选出自养微生物;缺乏氮源的培养基可筛选出固氮微生物;加入抗生素的培养基可筛选出酵母菌、霉菌等真菌。3、微生物计数方法(1)稀释涂布平板法(活菌计数法)①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。②原则:设置重复组,同一稀释度下至少涂布3个平板,增强实验说服力和准确性;重复组结果应一致。为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。③计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M(个/mL)。其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液体积(mL),M代表稀释倍数。④结果:统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。⑤需要设置未接种(或接种等量无菌水)的培养基作为空白对照,目的是判断培养基是否被杂菌污染。(2)显微镜直接计数法①主要用具:血细胞计数板和显微镜。②血细胞计数板使用方法:“先盖后滴再吸”,即先盖盖玻片,后滴培养液,再用吸水纸吸。③计算公式:1mL培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400×104×稀释倍数(个/mL)④结果:估算值比实际值偏大,因为该方法不能区分细胞的死活,计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。(1)原理:①分解尿素的细菌合成的脲酶能将尿素分解为氨,使培养基的碱性增强,pH升高。②在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂(鉴别培养基)培养细菌,若pH升高,指示剂将变红,可初步确定该种细菌能够分解尿素。(2)实验流程:土壤取样→样品稀释→涂布培养与观察→计数。①土壤取样:土壤有“微生物的天然培养基”之称。土壤取样时应选取取富含有机质、pH接近中性且潮湿的、距地表约3~8cm的土壤层。取一定量土溶于无菌水中,制成土壤溶液。②将样品进行梯度稀释:样品稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。用一定稀释范围的样品液进行涂布培养,以保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板。测定细菌数量一般选用104、105和106倍稀释液。默写小纸条6③培养与观察:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和时间。将样品涂布到固体培养基表面,不能用平板划线法。为防止皿盖上的水珠滴入培养基造成污染,需将培养皿呈倒置状态放置。每隔24h统计一次菌落数目,

最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。一般来说,在一定的培养条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征,这些特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。④计数:当菌落数目稳定时,取同一稀释度下至少3个平板进行计数,求出平均值,并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底。(3)分析:①未接种或接种等量无菌水的培养基(空白对照)上有菌落生长,说明培养基被杂菌污染。牛肉膏蛋白胨(完全)培养基上的菌落的数目和种类远大于选择培养基时,说明选择培养基具有筛选作用。②如果得到了两个或多个菌落数为30~300的平板,说明稀释度合适,操作比较成功,能够进行菌落的计数。默写小纸条6土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)原理:①分解尿素的细菌合成的脲酶能将尿素分解为氨,使培养基的碱性增强,pH升高。②在以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂(鉴别培养基)培养细菌,若pH升高,指示剂将变红,可初步确定该种细菌能够分解尿素。(2)实验流程:土壤取样→样品稀释→涂布培养与观察→计数。①土壤取样:土壤有“微生物的天然培养基”之称。土壤取样时应选取取富含有机质、pH接近中性且潮湿的、距地表约3~8cm的土壤层。取一定量土溶于无菌水中,制成土壤溶液。②将样品进行梯度稀释:

样品稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。用一定稀释范围的样品液进行涂布培养,以保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板。测定细菌数量一般选用104、105和106倍稀释液。③培养与观察:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和时间。将样品涂布到固体培养基表面,不能用平板划线法。为防止皿盖上的水珠滴入培养基造成污染,需将培养皿呈倒置状态放置。每隔24h统计一次菌落数目,

最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。一般来说,在一定的培养条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征,这些特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。④计数:当菌落数目稳定时,取同一稀释度下至少3个平板进行计数,求出平均值,并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底。(3)分析:①未接种或接种等量无菌水的培养基(空白对照)上有菌落生长,说明培养基被杂菌污染。牛肉膏蛋白胨(完全)培养基上的菌落的数目和种类远大于选择培养基时,说明选择培养基具有筛选作用。②如果得到了两个或多个菌落数为30~300的平板,说明稀释度合适,操作比较成功,能够进行菌落的计数。基本环节说明菌种的选育性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。扩大培养发酵工程规模大,在发酵工程之前需要对菌种进行扩大培养。培养基的配制在菌种确定之后,要选择原料制备培养基。灭菌发酵工程所用的菌种大多是单一菌种。一旦有杂菌污染,可能导致产量大大下降。因此,培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。接种/默写小纸条71、发酵工程的基本环节发酵这是发酵工程的中心环节。在发酵过程中,要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等,以了解发酵进程。还要及时添加必要的营养组分,要严格控制温度、PH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且还会影响微生物代谢物的形成。例如,在谷氨酸的发酵生产中,如在中性或弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷胺酰胺。现代发酵工程使用的大型发酵罐均有计算机控制系统,能对发酵过程中的温度、PH、溶解氧、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养等进行检测和控制;还可以进行反馈控制,使发酵全过程处于最佳状态。分离、提发酵产品是为上午下班本身,可在发酵结束之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥,即可得到产品。如果是代谢产物,可根据产物的性质采取适当的提纯、分离和纯化措施来获得产品。基本环节说明菌种的选育性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。扩大培养发酵工程规模大,在发酵工程之前需要对菌种进行扩大培养。培养基的配制在菌种确定之后,要选择原料制备培养基。灭菌发酵工程所用的菌种大多是单一菌种。一旦有杂菌污染,可能导致产量大大下降。因此,培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。接种/默写小纸条71、发酵工程的基本环节发酵这是发酵工程的中心环节。在发酵过程中,要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等,以了解发酵进程。还要及时添加必要的营养组分,要严格控制温度、PH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且还会影响微生物代谢物的形成。例如,在谷氨酸的发酵生产中,如在中性或弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷胺酰胺。现代发酵工程使用的大型发酵罐均有计算机控制系统,能对发酵过程中的温度、PH、溶解氧、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养等进行检测和控制;还可以进行反馈控制,使发酵全过程处于最佳状态。分离、提纯产物发酵产品是产品本身,可在发酵结束之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥,即可得到产品。如果是代谢产物,可根据产物的性质采取适当的提纯、分离和纯化措施来获得产品。默写小纸条8发酵工程的应用发酵工程以其生产条件温和、原料来源丰富且介个低廉、产物专一、废弃物对环境的污染较小和容易处理等特点,在许多领域得到广泛的应用,形成了规模庞大的发酵工业。(1)在食品工业上的应用

食品工业是微生物最早开发和应用的领域,主要包括三个方面:产生传统的发酵产品、生产各种各样的食品添加剂、生产酶制剂。(2)在医药工业上的应用青霉素的发现和产业化生产推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。之后,基因工程、蛋白质工程等的广泛应用给发酵工程制药领域的发展注入了强劲动力。人们采用基因工程的方法,将植物或动物的基因转移到微生物中,获得具有某种药物生产能力的微生物;或者直接对菌种进行改造,再通过发酵技术大量生产所需的产品。(3)在农牧业上的应用在农牧业上,发酵工程正应用于产生微生物肥料、生产微生物农药和产生微生物饲料等方面。例如,通过发酵获得的大量的微生物菌体,称单细胞蛋白。可用作为食品添加剂、制成微生物饲料等。(4)在其他方面的应用①随着对纤维素水解研究的不断深入,利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质取得成功,对解决资源短缺与环境污染问题具有重要意义。②发酵工程正渗透到几乎所有的工农业领域,在助理解决粮食、环境、健康和能源等方面的重大问题上,作出了越来越大的贡献。默写小纸条8发酵工程的应用发酵工程以其生产条件温和、原料来源丰富且介个低廉、产物专一、废弃物对环境的污染较小和容易处理等特点,在许多领域得到广泛的应用,形成了规模庞大的发酵工业。(1)在食品工业上的应用

食品工业是微生物最早开发和应用的领域,主要包括三个方面:产生传统的发酵产品、生产各种各样的食品添加剂、生产酶制剂。(2)在医药工业上的应用青霉素的发现和产业化生产推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。之后,基因工程、蛋白质工程等的广泛应用给发酵工程制药领域的发展注入了强劲动力。人们采用基因工程的方法,将植物或动物的基因转移到微生物中,获得具有某种药物生产能力的微生物;或者直接对菌种进行改造,再通过发酵技术大量生产所需的产品。(3)在农牧业上的应用在农牧业上,发酵工程正应用于产生微生物肥料、生产微生物农药和产生微生物饲料等方面。例如,通过发酵获得的大量的微生物菌体,称单细胞蛋白。可用作为食品添加剂、制成微生物饲料等。(4)在其他方面的应用①随着对纤维素水解研究的不断深入,利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质取得成功,对解决资源短缺与环境污染问题具有重要意义。②发酵工程正渗透到几乎所有的工农业领域,在助理解决粮食、环境、健康和能源等方面的重大问题上,作出了越来越大的贡献。默写小纸条91.细胞的全能性(1)定义:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。(2)在生物的生长发育过程中,并不是所有的细胞都表现出全能性,这是因为在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达。2.

细胞具有全能性的原因(物质基础)生物体的细胞中都含有该物种的全套遗传物质_,都有_发育成为完整个体所需的全。3.

生物体生长发育过程中细胞不表现全能性的原因(不离体的细胞无法表现出全能性的原因)在特定的时间时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达

4.

全能性大小比较(1)受精卵>生殖细胞>体细胞____(2)分化程度低的细胞>分化程度高的细胞_____(3)_分裂能力强的细胞>分裂能力弱的细胞(4)_植物细胞>动物细胞(5)幼嫩的细胞>衰老的细胞____

5、植物组织培养是指将_离体_的植物_器官__、_组织_或_细胞_(称为_外植体_)等,培养在人工配制的_培养基_上,给予_适宜的培养条件_,诱导其形成__完整植株_的技术。6、植物组织培养的原理:__植物细胞的全能性__,生殖方式:_无性生殖__,分裂方式:__有丝分裂__7、过程:脱分化:在一定的_激素_和_营养_等条件的_诱导_下,_已经分化_的细胞_失去其特有的结构和功能__,转变成_未分化的细胞__的过程。再分化:_愈伤组织_能重新_分化_成_芽、根等器官_的过程。默写小纸条91.细胞的全能性(1)定义:细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。(2)在生物的生长发育过程中,并不是所有的细胞都表现出全能性,这是因为在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达。2.细胞具有全能性的原因(物质基础)生物体的细胞中都含有该物种的全套遗传物质_,都有_发育成为完整个体所需的全部遗传信息_。3.生物体生长发育过程中细胞不表现全能性的原因(不离体的细胞无法表现出全能性的原因)在特定的时间时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达

4.全能性大小比较(1)受精卵>生殖细胞>体细胞____(2)分化程度低的细胞>分化程度高的细胞_____(3)_分裂能力强的细胞>分裂能力弱的细胞(4)_植物细胞>动物细胞(5)幼嫩的细胞>衰老的细胞____5.概念:植物组织培养是指将_离体_的植物_器官__、_组织_或_细胞_(称为_外植体_)等,培养在人工配制的_培养基_上,给予_适宜的培养条件_,诱导其形成__完整植株_的技术。6.植物组织培养的原理:__植物细胞的全能性__、

生殖方式:_无性生殖__、分裂方式:_有丝分裂__7.过程:脱分化:在一定的_激素_和_营养_等条件的_诱导_下,_已经分化_的细胞_失去其特有的结构和功能_,转变成_未分化的细胞__的过程。再分化:_愈伤组织_能重新_分化_成_芽、根等器官_的过程。默写小纸条10探究.实践:菊花的组织培养(1)原理①植物细胞一般具有_全能性__;②在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞可以经过_脱分化_和__再分化__,形成_胚状体__,长出__芽和根_,进而发育成_完整的植株_;③植物激素中_生长素_和__细胞分裂素_是启动_细胞分裂_、_脱分化__和_再分化_的关键激素,它们的_浓度_、_比例_等都会影响植物细胞的发育方向。生长素用量与细胞分裂素用来的比值结果比值高有利于根的分化,抑制芽的形成比值低有利于芽的分化,抑制根的形成比值适中促进愈伤组织的形成(2)材料用具①外植体:_幼嫩的菊花茎段__:经常选择根尖(分生区)、茎的韧皮部(形成层)等分裂能力强、分化程度低的区域作为材料,容易诱导形成愈伤组织。②体积分数为70%的酒精:对手、超净工作台、外植体进行消毒。③质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液:对外植体进行消毒。④无菌水:清洗外植体。⑤培养基:包括无机营养成分(水和无机盐)、有机营养成分(蔗糖、氨基酸、维生素等)、特定浓度和比例的激素(主要是生长素和细胞分裂素)。(3)方法步骤①消毒—②外植体切段—③接种—④脱分化—⑤再分化—⑥移栽培养

6.植物组织培养中细胞表现出全能性的条件(1)离体

(最关键);(2)严格的无菌条件

;(3)适宜的培养条件;(4)适宜

浓度和比例

的激素;(5)一定的营养条件;默写小纸条10

探究.实践:菊花的组织培养(1)原理①植物细胞一般具有_全能性__;②在一定的激素和营养等条件的诱导下,已经分化的细胞可以经过_脱分化_和__再分化__,形成_胚状体__,长出__芽和根_,进而发育成_完整的植株_;③植物激素中_生长素_和__细胞分裂素_是启动_细胞分裂_、_脱分化__和_再分化_的关键激素,它们的_浓度_、_比例_等都会影响植物细胞的发育方向。生长素用量与细胞分裂素用来的比值结果比值高有利于根的分化,抑制芽的形成比值低有利于芽的分化,抑制根的形成比值适中促进愈伤组织的形成(2)材料用具①外植体:_幼嫩的菊花茎段__:经常选择根尖(分生区)、茎的韧皮部(形成层)等分裂能力强、分化程度低的区域作为材料,容易诱导形成愈伤组织。②体积分数为70%的酒精:对手、超净工作台、外植体进行消毒。③质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液:对外植体进行消毒。④无菌水:清洗外植体。⑤培养基:包括无机营养成分(水和无机盐)、有机营养成分(蔗糖、氨基酸、维生素等)、特定浓度和比例的激素(主要是生长素和细胞分裂素)。(3)方法步骤①消毒—②外植体切段—③接种—④脱分化—⑤再分化—⑥移栽培养

6.植物组织培养中细胞表现出全能性的条件(1)离体

(最关键);(2)严格的无菌条件

;(3)适宜的培养条件;(4)适宜

浓度和比例

的激素;(5)一定的营养条件;默写小纸条11植物体细胞杂交1.概念:植物体细胞杂交是指将__不同来源_的_植物体细胞_,在一定条件下_融合_成__杂种细胞__,并把__杂种细胞__培育成_新植物体_的技术;2.原理:__植物细胞的全能性、细胞膜具有一定的流动性__3.生殖方式:_无性生殖_4.分裂方式:__有丝分裂__5.可遗传变异类型:_染色体(数目)变异__6.意义:__打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种__

(1)去除细胞壁①去壁原因:_细胞壁阻碍着细胞间的杂交__②方法:_酶解法_③所用酶:_纤维素酶和果胶酶__(2)原生质体间的融合①原理:__细胞膜具有一定的流动性_②方法:物理法:_电融合法、离心法__;化学法;

聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法。(3)再生出新的细胞壁再生出新的细胞壁

、高尔基体和线粒体。(4)植物组织培养——脱分化、再分化①原理:_植物细胞的全能性__②植物体细胞杂交完成的标志:_培育出杂种植株__默写小纸条11

植物体细胞杂交技术1.概念:植物体细胞杂交是指将__不同来源_的_植物体细胞_,在一定条件下_融合_成__杂种细胞__,并把__杂种细胞__培育成_新植物体_的技术;2.原理:__植物细胞的全能性、细胞膜具有一定的流动性__3.生殖方式:_无性生殖_4.分裂方式:__有丝分裂__5.可遗传变异类型:_染色体(数目)变异__6.意义:__打破生殖隔离,实现远缘杂交育种,培育植物新品种__(1)去除细胞壁①去壁原因:_细胞壁阻碍着细胞间的杂交__②方法:_酶解法_③所用酶:_纤维素酶和果胶酶__(2)原生质体间的融合①原理:__细胞膜具有一定的流动性_②方法:物理法:_电融合法、离心法__;化学法;

聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+-高pH融合法。(3)再生出新的细胞壁再生出新的细胞壁

、高尔基体和线粒体。(4)植物组织培养——脱分化、再分化①原理:_植物细胞的全能性__②植物体细胞杂交完成的标志:_培育出杂种植株__默写小纸条12

(一)植物繁殖的新途径1.微型繁殖(1)概念:用于_快速繁殖优良品种_的__植物组织培养技术_;(2)优点:①可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖_;

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