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B23DB12Detectionofgeneticallymodifiedplantsandderivedproducts—QualitativePCRmethodforherbicide-resistantsoybeanDAS-68416-4天津市市场和质量监督管理委员会发布I本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所、中国农业科学院生物技术研究所、天转基因耐除草剂大豆DAS-68416-4及其衍生品种定性检测实时荧光PCR法本标准规定了转基因耐除草剂大豆DAS-684本标准适用于转基因耐除草剂大豆DAS-68416-4及其衍下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版GB/T6682分析实验室用水规格和农业部2031号公告—8—2013转基因植物及其NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求Lectin基因LectingeneDAS-68416-4转化体特异性序列event-specificsequenceofDAS-68416-4根据转基因耐除草剂大豆DAS-68416-5.1.2.2DAS-68416-4转化分析天平感量0.1g和0.1mg荧光定量PC5.3.5.1标准样品和试样实时荧光P）；31×—10µmol/LDAS-68416-4-F2.0µL10µmol/LDAS-68416-4-R2.0µL10µmol/LDAS-68416-4-P2.0µL 25.0µL表2Lectin内标基因PCR反应体系1× 0.5µL0.5µL0.5µL2.0µL—25.0µL的基因组DNA（或采用大豆DAS-68416-4与非转基因大豆基因组相比的拷贝数分数为0.1%~1.0%的DNA溶液）作为阳性对照；以水作为空白对照。6.1Lectin内标准基因无典型扩增曲线，表明样品中未检出大豆成分，结果表述为“样品中未检测出6.2Lectin内标准基因出现典型扩增曲线，因耐除草剂大豆DAS-68416-4转化体成分，检测结果为阳性”。46.3Lectin内标准基因出现典型扩增曲线，扩增曲线，表明样品中未检测出DAS-68416-4转化体成分，结果表述为“样品中未检测出转基因耐除草剂大豆DAS-68416-4转化体成分，检测结果为之间，进行重复实验。如重复实验结果符合6.1～6.3的情形，依照6.1～6.3进行化体特异性序列，根据检出参数情况，参照6.1～6.3对样品进行判定。A.1Lectin基因实时荧光PCR扩增产物核苷酸序列（AccCTTCTATGCCCCTGACACAAAAAGGCTTGCA1GCCCTCTACTCCACCCCCATCCACATTTGGGACAAAGAAACCGGTAGCGCTTCTATGCCCCTGACACAAAAAGGCTTGCA61TAATTTAGT

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