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饲料中总糖的测定分光光度法2018-12-26发布2019-02-01实施天津市市场监督管理委员会发布I本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由天津市农业科学院提出并归口。本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所。本标准主要起草人：张强、陈秋生、王利宾、刘烨潼、殷萍、孟兆芳、张玺。1凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备3原理与芳香族酚类化合物缩合生成黄色溶液，在490nm处有最大4试剂和材料4.1实验用水指标满足GB/T6682一级标准。4.4苯酚溶液(50g/L),称取5g苯酚，用水定容至100mL,摇匀后避光保存。4.5葡萄糖标准溶液(1g/L),将葡萄糖于105℃恒温烘干至恒重，准确称取1.0000g,用水溶解后加入5mL盐酸，并以水定容至1000ml。5.2电子天平，感量0.1mg。5.3电子天平，感量0.01g。26分析步骤6.1采样与试样制备6.2试样前处理称取试样约1g(精确至0.01g)于250ml锥形瓶中，加入25ml水，10ml盐酸，振荡摇匀至形成均匀的悬浊液，装上冷凝回流装置，在沸水浴中水解1h,冷却之后过滤，并洗涤滤渣，合并滤液及洗液，最后定容至250ml,摇匀待用，此为待测溶液。6.3标准系列溶液的制备分取0mL、1mL、2mL、4mL、6mL、10mL葡萄糖标准溶液(4.4)分别置于50mL容量瓶中，用水稀释吸取上述标准溶液各1mL(相当于葡萄糖含量分别为0μg、20μg、40μg、80μg、120μg、200μg),加入10mL比色管中，分别加入苯酚溶液(4.3)各1mL,加入浓硫酸(4.2)5mL,反应液静止放置10min后，涡旋摇匀，冷却至室温，选择波长为490nm,以空白溶液调零，测定吸光度。以葡萄糖质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。准确吸取待测溶液(6.2)1ml于10mL比色管中，按6.3步骤自“加入苯酚溶液各1ml……”起进行操作，至冷却至室温后测定。7结果计算X——试样中总糖的含量，单位为克每千克，g/kg;a——从标准曲线上查得葡萄糖含量，单位为微克，μg;V₀——试样经前处理后定容的体积，单位为毫升，mL;V——测定时吸取滤液的体积，单位为毫升，mL;m——试样质量，单位为克，g。8精密度应符合以下要求：——总糖含量≤50g/kg时，在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对值不得超过

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