2024年鲁教版选修3生物上册月考试卷含答案

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。

细菌在含青霉素的培养基上生长情况。

细菌在含四环素的培养基上生长情况。

①

能生长。

不能生长。

②

能生长。

能生长。

③

不能生长。

能生长。

A.质粒的复制原点上有RNA聚合酶结合位点B.①②③三种重组后细菌的外源基因插入点①是a②是c③是bC.质粒被一种限制酶切开时，被水解的磷酸二酯键有2个D.将外源基因与质粒连接时需用DNA聚合酶3、生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（）A.动物的生长激素基因转入植物后不能表达B.转抗虫基因的植物会导致昆虫群体抗性基因频率增加C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿D.生物武器是用微生物、毒素及重组致病菌等来形成杀伤力4、通过体细胞核移植技术培育克隆牛的过程中，未涉及的操作是（）A.用显微操作技术去除细胞核和极体B.将精子和卵细胞放在受精溶液中C.用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成发育进程D.选择合适时期的胚胎进行移植，使其发育成完整个体5、利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法不一定能诊断出SARS病毒感染者6、下列关于动物细胞核移植技术的叙述，错误的是（）A.非人灵长类动物的体细胞核移植难度较大B.动物体细胞核移植的难度低于胚胎细胞核移植C.从动物卵巢采集卵母细胞后，要将其在体外培养到MII期D.哺乳动物细胞核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植7、治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义；简要流程如图。下列有关叙述正确的是（）

A.过程①、②分别应用了核移植技术和胚胎移植技术B.细胞培养中需提供5%CO2，目的是调节细胞外液的渗透压C.胚胎干细胞可来源于囊胚中的内细胞团，具有发育的全能性D.将图中获得的组织器官移植给个体A，不会发生免疫排斥反应评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)8、在培育“乳腺生物反应器”的过程中，可能涉及()A.导入外源基因B.诱导细胞融合C.挑选雌性胚胎D.胚胎移植9、如图为杂交瘤细胞制备示意图。下列叙述正确的是（）

A.骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用仙台病毒诱导融合B.骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中不能正常增殖C.免疫B细胞的种类不唯一所以杂交瘤细胞仍需进一步筛选D.筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止真菌污染10、为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肺癌细胞使其贴壁生长。实验组分别加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X、Y或Z，培养过程及结果如图所示。下列叙述错误的是（）

实验结果见下表：。组别细胞数目（个/孔）对照7．8×106药物X6．7×104药物Y5．3×105药物Z8．0×106

A.对照组中只需加入等体积的二甲基亚矾溶剂即可B.细胞培养液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.计数时可用胰蛋白酶处理贴壁细胞，使肺癌细胞脱落下来D.根据实验结果，三种药物均具有抗癌效果，但药物X的抗癌效果最好11、我国首例绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪的培育过程如图所示，其中字母代表结构或生物，数字代表过程，下列相关叙述错误的是（）

A.为了①和②的顺利完成，需要用灭活的病毒对细胞进行诱导B.将C的细胞核去掉，实质上是去除纺锤体—染色体复合物C.为避免将E植入F时产生排斥反应，移植前应给F注射免疫抑制剂D.移入F的桑葚胚要经历囊胚、原肠胚等阶段才能形成猪的幼体12、让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。下列说法不正确的是（）

A.图中涉及的细胞工程技术有动物体细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等B.进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚C.若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状D.通过上述技术得到小羊a和b的过程为有性生殖13、为解决肾供体不足的问题；科研人员进行相应的前期研究。利用“异源囊胚补全法”在大鼠体内培育出了小鼠肾脏（过程如下图），其中Sall基因是肾脏发育的必需基因。下列叙述错误的是（）

A.过程①表明，缺失Sall基因的大鼠受精卵依然具有全能性B.过程②的目的是让大鼠ES细胞与小鼠ES细胞发生融合C.过程③操作之前需对代孕大鼠进行超数排卵处理D.大鼠体内的小鼠肾脏是否全由小鼠ES细胞发育而来还需进一步鉴定14、下图是我国华北地区某生态农业模式图。相关叙述正确的是（）

A.该生态农业的构建主要遵循了物质循环再生、协调与平衡原理B.该生态系统能够保持相对稳定，不需要外界能量的输入C.该生态农业延长了食物链，提高了营养级之间的能量传递效率D.该生态农业能同时实现降低环境污染、增加农民收入、促进产业发展评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)15、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______16、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。17、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。18、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。19、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。20、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。21、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。22、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题，共10分)23、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误24、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误25、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误26、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误27、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共20分)28、下图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径；请回答下列问题：

（1）图中A基因是由从人细胞内提取的mRNA经逆转录形成的，基因A中__________（填“含有”或“不含”）内含子序列。利用PCR技术扩增目的基因时，a和b表示两种引物，这两种引物的碱基序列不能互补，原因是__________。

（2）接受目的基因的绵羊的受体细胞是__________，其性染色体组成为__________。为了从乳汁中获取产物，应在人血清白蛋白基因上游连接上__________等调控组件。

（3）将含人血清白蛋白基因的重组质粒导入植物受体细胞通常采用的方法是__________，为了大量获得基因产物，应通过植物组织培养将受体细胞培养到__________阶段。29、某些膜内蛋白以紧密排列的方阵形式存在称为OAPs；OAPs的分布异常与某些神经性和神经肌肉性疾病相关。研究AQP4（一种水通道蛋白）与OAPs结构形成的关系，有助于揭示上述疾病的机制。请回答问题：

(1)AQP4有M1和M23两种分子量相近的亚型，二者均可独立构成四聚体发挥作用。科研人员发现导入并稳定表达M23基因的细胞；其细胞膜上有OAPs形成，而敲除该基因的细胞中未见OAPs的形成，该结果表明______。

(2)科研人员继续对M1与OAPs形成的关系进行了研究。

①提取大鼠脑组织的总RNA，通过______法获得cDNA，并通过______技术获得M1基因。

②将M1基因与质粒用______酶构建基因表达载体，导入中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中，用______技术检测到受体细胞已成功表达M1蛋白。

③科研人员继续实验；方案及结果如下。

。实验分组。

1对照组。

2对照组。

3实验组。

实验处理。

____

____

导入M1基因的CHO细胞。

培养一段时间后裂解细胞并离心；取上清液中蛋白。

培养一段时间后裂解细胞并离心；取上清液中蛋白。

检测指标。

用电泳技术检测____的形成情况。

请将表格中的实验方案补充完整。a：______，b：______；c：______。

(3)综合上述实验结果，AQP4与OAPs形成的关系为______。30、水稻抗稻瘟病的主效基因是P基因；其表达受乙烯诱导。为确定该基因启动子中响应乙烯诱导的必需区域，研究者利用PCR获得P基因全长启动子A及其不同长度的5′端缺失体B；C、D。构建的重组质粒分别命名为pA、pB、pC、pD，如下图所示。

（1）启动子是__________识别并结合的位点；可以启动转录过程。

（2）将上述重组质粒分别导入水稻愈伤组织后，使用加入__________的培养基；筛选出抗性愈伤组织。

（3）研究者通过实验发现“全长P基因启动子具有很强的乙烯诱导响应”，请根据这一结论完成实验方案_________

。实验材料。

处理。

预期结果。

pA转基因愈伤组织。

乙烯利处理6h

大量蓝色Gus斑点。

乙烯利处理6h

水处理6h

（4）利用__________技术将上述愈伤组织培养成植株；乙烯利诱导6h后检测叶片中Gus基因的表达水平，结果如下。

由图可知，P基因启动子中__________bP区段是响应乙烯诱导的重要区域。31、神经纤毛蛋白-1（NRP-1）是血管内皮生长因子的新型受体；通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。本研究将为NRP-1单克隆抗体靶向治疗乳腺癌提供数据基础。

（1）取乳腺癌（MCF7）组织块，运用_____技术获得MCF7细胞用于后续实验。用重组的人_____蛋白对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，制备杂交瘤细胞，将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取培养孔中的________（填“上清液”或“沉淀细胞”），进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得NRP-1单克隆抗体（NRP-1MAb）。

（2）将MCF7细胞制成单细胞悬液；等量注入4组裸鼠右前腋下，接种后3天开始给药，共给药7次。每隔5天测算一次肿瘤的肿瘤体积，如下图所示。

对照组注射_____；从上图中可以看出_____。

（3）注射不同剂量NRP-1MAb33天后；剥离肿瘤组织称重，实验结果如下图：

该结果表明____________________________________________________。

（4）基于以上研究，科学家们对该抗体的用药方式有两种观点：谨慎用药和适宜浓度用药。你支持哪个观点，并说出理由___________________________________。评卷人得分六、非选择题(共4题，共20分)32、人类疾病的转基因生物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠（2N）制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示（注：基因B为高血压相关基因）。

（1）在上述转基因大鼠的培育过程中；涉及的现代生物技术有____________（写出两项即可）。

（2）体外扩增目的基因B可利用_____________技术；该技术的基本原理是___________；

（3）如果要建立高血压转基因动物模型；就要检测高血压相关基因是否已成功表达，在分子水平上检测到相应____________，在个体水平上大鼠出现____________症状，证明相关基因已成功表达。

（4）基因B在导入受精卵之前要构建_________________，这个步骤是基因工程的核心，构建出的分子除含目的基因外，还必须含有_________________。转基因大鼠的胚胎在代孕母体内能够存活的生理学基础是_______________。33、我国已实现部分“胚胎工程产业化”；如肉牛；奶牛胚胎工程产业化。如图所示是科学家采用不同方法产业化培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请回答下列问题：

（1）培育“试管牛C”技术的操作流程是____（填字母），d操作的名称是____，h操作的核心是____，受精时受体的卵细胞处于____期。

（2）图中数字标号代表的结构名称是：①____，②____，③____。若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到____阶段的早期胚胎进行分割处理，在进行胚胎分割时，应注意____。

（3）图中用到的激素是____，移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是____。34、Bt基因即苏云金芽胞杆菌基因；因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好；安全、高效等优点而成为应用最为广泛的转杀虫基因。下图为培育转Bt基因抗虫棉幼苗的基本操作过程，请分析回答：

(1)Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取。从前者获取的Bt基因_______；(含有/不含有)启动子。

(2)若利用PCR技术从cDNA文库中获取Bt基因(基因序列未知)，需根据Bt蛋白中的氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，原因是_____________________________。在PCR体系中需加入其中的_______（全部/任意1种/其中2种)引物。若Bt基因序列已知，则引物的序列通常为_______种。

(3)在构建基因表达载体的过程中，为了方便筛选含有目的基因的细胞，作为运载体的Ti质粒应含有_______，Ti质粒中能帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上的序列称为_______。35、许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因；其编码的产物β－半乳糖苷酶在X－gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如下图所示。请据图回答：

(1)基因工程中；能使目的基因在受体细胞中特异性表达的调控序列是_______。

(2)限制酶EcoRⅠ的识别序列和切割位点是－G↓AATTC－，SmaⅠ的识别序列和切割位点是－CCC↓GGG－。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前；需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是__________，连接过程中需要的基本工具是__________。

(3)转化过程中；大肠杆菌应先用________处理，使其处于能吸收周围DNA的状态。

(4)菌落颜色为白色的是________；原因是_______________________。

(5)菌落③中的目的基因是否表达，可采用的检测办法是_________________。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术，A正确；

B；试管牛是由受精卵发育而成；应为有性生殖，克隆属无性生殖，B错误；

C；提供胚胎的个体称为“供体”；接受胚胎的个体叫“受体”，C正确；

D；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术；所以胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程，D正确；

故选B。

【点睛】

本题考查胚胎工程技术的原理及分析判断能力。2、C【分析】【分析】

由图可知，a是抗氨苄青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因结构被破坏，细菌无抗氨苄青霉素能力，将细菌放入含有氨苄青霉素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活。b是抗四环素基因，如果外源基因插入到b中，抗四环素基因结构被破坏，细菌无抗四环素能力，将细菌放入含有四环素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活。①是b；②是c，③是a，据此答题。

【详解】

A；质粒的复制原点上有DNA聚合酶结合位点；A错误；

B、①②③三种重组后细菌的外源基因插入点①是b②是c③是a；B错误；

C；限制酶能将磷酸二酯键水解断裂；质粒被一种限制酶切开，磷酸二酯键断裂2个，C正确；

D；将外源基因与质粒连接时需用DNA连接酶连接；D错误。

故选C。3、A【分析】【分析】

（1）生物技术安全性问题包括食物安全；生物安全、环境安全三个方面。

（2）伦理问题主要在克隆人的问题上出现争议。

【详解】

A；不同生物共用一套遗传密码；所以动物生长素基因转入植物后也能表达，A错误；

B；由于植物与害虫间是相互选择的；转抗虫基因植物可使昆虫群体抗性基因频率增加，B正确；

C；反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿；C正确；

D；生物武器是用微生物、毒素及重组致病菌等来形成杀伤力；D正确。

故选A。4、B【分析】【分析】

核移植指将一个动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体，称为克隆动物。

【详解】

核移植中用显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和极体；A正确；核移植中未经过精子和卵细胞的结合，B错误；核移植过程中用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成分裂和发育进程，C正确；选择桑椹胚或囊胚期的胚胎进行移植，使其发育成完整个体，D正确。故选B。

【点睛】

核移植属于无性生殖，试管动物经过两性生殖细胞的融合，属于有性生殖。5、C【分析】【分析】

效应B细胞能够分泌抗体；但不能增殖，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体；该杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体，单克隆抗体具有特异性强；灵敏度高、可大量制备等特点，可应用于作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物。

【详解】

A.单克隆抗体是浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞分泌的；用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的抗体不止一种，A错误；

B.浆细胞无增殖能力；故无法通过体外培养单个浆细胞的方式获得单克隆抗体，B错误；

C.将等量B细胞和骨髓瘤细胞混合；经PEG诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞；骨髓瘤细胞自身融合的细胞，C正确；

D.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，该单克隆抗体是以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出的，因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，D错误。6、B【分析】1；体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。

2；非人灵长类核移植主要难在三个方面：以猕猴为例：一是猴细胞核不易识别；去核难度大；二是猴的卵母细胞容易提前激活。操作稍一不小心，卵母细胞就可能被激活，然后它就会先开始自主卵裂，体细胞就跟不上了，最后导致这个卵无法发育；三是猴的体细胞克隆胚胎发育差，培养囊胚效率低，优质囊胚比例低。

3；哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低；恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植。

【详解】

A；非人灵长类动物的体细胞核移植难度较大；如细胞核不易识别，去核难度大及卵母细胞容易提前激活等，A正确；

B；由于动物胚胎细胞分化程度低；恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植，B错误；

C；直接从活体动物卵巢中吸取采集的卵母细胞；需要在体外经人工培养至MII中期，C正确；

D；哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植；体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。

故选B。7、C【分析】【分析】

1；治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤等）用于治疗性移植。

生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。

2；分析题图：①是核移植技术；②是早期胚胎培养。

【详解】

①是核移植技术，②是早期胚胎培养，A错误；5%的二氧化碳的作用是维持培养液的pH，B错误；胚胎干细胞来源于囊胚的内细胞团或原始性腺，具有发育的全能性，C正确；图中的重组细胞的细胞核来自个体B，因此将图中获得的组织器官移植给A个体，会发生免疫排斥，D错误。因此，本题答案选C。二、多选题(共7题，共14分)8、A:C:D【分析】【分析】

【详解】

由上图分析可知；在培育“乳腺生物反应器”的过程中，涉及基因工程技术；早期胚胎培养、挑选雌性胚胎、胚胎移植等技术，ACD正确，B错误。

故选ACD。9、B:C【分析】【分析】

（1）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖；诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。

（2）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】

A；骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用灭活的仙台病毒诱导融合；形成杂交瘤细胞，A错误；

B；骨髓瘤细胞虽然能无限增殖；但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞和骨髓瘤细胞、免疫B细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B正确；

C；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体；因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D；筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止细菌污染；D错误。

故选BC。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。10、B:D【分析】【分析】

分析题意可知:该实验目的是检测药物X和Y的抗癌活性；自变量是药物X或Y，因变量是检测细胞数量。

【详解】

A；加入等体积的二甲基亚矾溶作为空白对照；排除体积和溶剂等无关因素的影响，A正确;

B；抗生素具有杀菌(不是杀病毒)作用；为防止培养液被污染，可在培养液中加入一定量的抗生素，B错误;

C；要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来；需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，C正确;

D；分析实验结果；加入X的癌细胞个数是6.7×104，加入Y的癌细胞个数是5.3×105，说明药物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌细胞个数是8.0×106，与空白对照相比无抗癌作用，D错误。

故选BD。11、A:C【分析】【分析】

分析图解，可以看出绿色荧光蛋白“转基因”克隆猪涉及了多项生物工程技术。图中B表示基因表达载体的构建；然后将目的基因导入猪胎儿的成纤维细胞，经过动物细胞培养筛选出转基因体细胞，然后该细胞的细胞核与猪的卵细胞进行细胞核移植获得重组细胞。重组细胞经过早期胚胎培养到桑椹胚或囊胚期，最后经过胚胎移植技术将早期胚胎移植到代孕母猪子宫内，最后生成转基因克隆猪。由此可见，该过程中利用基因工程、动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

【详解】

A；①是将重组DNA导入受体细胞；直接采用显微注射法，无需对受体细胞进行诱导，②过程通常是将细胞注入去核卵母细胞中，然后利用电融合法使D构建成功，A错误；

B；C是处于MⅡ期的卵母细胞；这个时期的“核”实际上是纺锤体—染色体复合物，B正确；

C；受体对移入的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；因此无需给F注射免疫抑制剂，C错误；

D；移入F的通常是桑葚胚；它要经历囊胚、原肠胚阶段的发育才能成为猪的幼体，D正确。

故选AC。12、B:C:D【分析】【分析】

分析图解：图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞取核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行G胚胎分割再通过胚胎移植获得小羊ab。

【详解】

A、图中A表示目的基因导入受体细胞，B表示受精卵通过早期胚胎培养、胚胎移植等技术获得转基因羊N，C表示羊N的体细胞中取核，D表示羊O的卵母细胞取核，E表示细胞核移植，F表示早期胚胎培养，再进行G胚胎分割再通过胚胎移植获得小羊ab；故图中涉及的现代生物技术有动物体细胞核移植；胚胎移植、胚胎分割和动物细胞培养等，A正确；

B；进行G操作时应选择发育良好、形态正常的囊胚；因囊胚期细胞未分化，而原肠胚已经分化，不能进行胚胎分割，B错误；

C；通过图解分析可知；小羊只获得了羊N的细胞核，其细胞质中的基因不会遗传给小羊，C错误；

D；上述核移植技术得到克隆动物；属于无性生殖，D错误。

故选BCD。13、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：图示为利用“异源囊胚补全法”在大鼠体内培育出了小鼠肾脏的过程；其中①表示把缺失Salll基因的小鼠的受精卵发育为囊胚过程，②表示将荧光蛋白标记的小鼠的ES细胞导入大鼠囊胚，③表示胚胎移植，④表示分娩。

【详解】

A；过程①只是把缺失Salll基因的小鼠的受精卵培养为囊胚的过程；并没有形成个体，不能表明缺失Sall基因的大鼠受精卵依然具有全能性，A错误；

B；过程②的目的是表示将荧光蛋白标记的小鼠的ES细胞导入大鼠囊胚；并且使小鼠的Salll基因表达，B错误；

C；过程③操作之前只需对代孕大鼠进行同期发情处理；目的是使其具备孕育的条件，而不是为了使其超数排卵，C错误；

D；大鼠体内的小鼠肾脏是否全由小鼠ES细胞发育而来还需进一步鉴定；不能凭表型就确定，D正确。

故选ABC。14、A:D【分析】【分析】

生态农业是一个农业生态经济复合系统；将农业生态系统同农业经济系统综合统一起来，以取得最大的生态经济整体效益。它也是农；林、牧、副、渔各业综合起来的大农业，又是农业生产、加工、销售综合起来，适应市场经济发展的现代农业。生态工程的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学和工程学原理。建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，减少环境污染。

【详解】

A；生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生、协调与平衡、整体性、系统学和工程学原理和物种多样性等原理；鸡粪秸秆用于沼气池，最后沼渣用于农作物的生产主要符合物质循环再生原理；图示生态工程的设计利用了还协调与平衡原理，A正确；

B；由于生态系统的能量流动是单向流动、逐级递减的；因此，任何生态系统均需要不断得到来自系统外的能量补充，B错误；

C；该生态农业延长了食物链；提高提高能量利用率，不能提高营养级之间的能量传递效率，C错误；

D；该生态农业能同时实现降低环境污染、增加农民收入、促进产业发展；从而实现了自然、经济和社会的协调发展，D正确。

故选AD。三、填空题(共8题，共16分)15、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码16、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补18、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存19、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆20、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用21、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖22、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题，共10分)23、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。24、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。25、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。26、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。27、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、实验题(共4题，共20分)28、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤是：

1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4；目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。据此答题。

【详解】

（1）由mRNA经逆转录形成的基因A；其结构中不含内含子序列，两种引物的碱基序列不能互补，否则会减弱与目的基因的结合。

（2）要从绵羊的乳汁中获取人血清白蛋白；转基因绵羊必须是雌性。接受目的基因的绵羊的受体细胞是受精卵，其性染色体组成为XX。为了从乳汁中获取产物，应在人血清白蛋白基因上游连接上乳腺蛋白基因的启动子等调控组件。

（3）将目的基因导入植物细胞的方法是农杆菌转化法；可以通过植物组织培养将受体细胞培养到愈伤组织阶段，以便大量获得基因产物。

【点睛】

本题主要考查基因工程的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间内在联系的能力。【解析】不含a和b引物若能互补会发生配对，从而会减弱与目的基因的结合受精卵XX乳腺蛋白基因的启动子农杆菌转化法愈伤组织29、略

【分析】【分析】

1；基因工程的操作过程。

(1)目的基因的获取。

①从基因文库中获取。

基因文库包括：基因组文库和部分基因文库(其中的cDNA文库是利用反转录法获取的)。

②利用PCR技术扩增。

a.变性(90～95℃)：双链DNA模板在热作用下；氢键断裂，形成单链。

b.复性(55～60℃)：引物与DNA模板结合；形成局部双链。

c.延伸(70～75℃)：在Taq酶的作用下；合成与模板互补的子链。

d.循环重复上述过程；n次循环后，目的基因的量将被扩增2n倍。

③利用化学方法人工合成：基因比较小；核苷酸序列已知时，选择该方法。

(2)基因表达载体的构建。

①通常用同一种限制酶切割目的基因和质粒；然后用DNA连接酶将二者连接，改造后成为基因表达载体。

②组成：目的基因；标记基因、启动子、终止子和复制原点。

(3)将目的基因导入受体细胞。

。生物种类。

植物。

动物。

微生物。

常用方法。

农杆菌转化法。

显微注射技术。

感受态细胞法。

受体细胞。

体细胞或受精卵。

受精卵。

原核细胞。

转化过程。

将目的基因插入到Ti质粒的T­DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达。

将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物。

Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子。

(4)目的基因的检测与鉴定。

①分子水平的检测。

a．利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无。

b．利用分子杂交技术检测目的基因的转录。

c．利用抗原—抗体杂交技术检测目的基因的翻译。

②个体生物学水平的鉴定；如抗虫；抗病的接种实验等。

【详解】

(1)题干提到“导入并稳定表达M23基因的细胞，其细胞膜上有OAPs形成，而敲除该基因的细胞中未见OAPs的形成”，该结果表明M23可促进细胞膜上OAPs聚集。

(2)由基因工程的操作过程可知：

①提取大鼠脑组织的总RNA，通过逆转录法获得cDNA，并通过PCR技术获得M1基因。

②将M1基因与质粒用限制酶和DNA连接酶构建基因表达载体，导入中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中，用抗原—抗体技术检测到受体细胞已成功表达M1蛋白。

③由（1）可知M23可促进细胞膜上OAPs聚集；由此设计实验方案：

。实验分组。

1对照组。

2对照组。

3实验组。

实验处理。

导入M23基因的CHO细胞。

导入空质粒的CHO细胞。

导入M1基因的CHO细胞。

培养一段时间后裂解细胞并离心；取上清液中蛋白。

培养一段时间后裂解细胞并离心；取上清液中蛋白。

检测指标。

用电泳技术检测OAPs的形成情况。

实验电泳图表明M1不能促进细胞膜上OAPs聚集。

(3)由于AQP4有M1和M23两种分子量相近的亚型，二者均可独立构成四聚体发挥作用，经实验表明M23可促进细胞膜上OAPs聚集，M1不能促进细胞膜上OAPs聚集，因此可得，M1与OAPs的形成无关，M23与OAPs的形成有关。

【点睛】

本题设计基因工程的操作过程，结合情境分析实验结果进行解题。【解析】M23可促进细胞膜上OAPs聚集①逆转录PCR②限制酶和DNA连接酶抗原抗体杂交导入M23基因的CHO细胞导入空质粒的CHO细胞OAPsM1与OAPs的形成无关，M23与OAPs的形成有关30、略

【分析】植物组织培养-3572〜-2692

试题分析：据图分析；图示为pA；pB、pC、pD四种重组质粒的示意图，四者长度依次减小，其中A是全长长启动子，后三者是缺失体；重组质粒中的标记基因是潮霉素抗性基因。

（1）启动子为与DNA上；是RNA聚合酶的识别位点，可以启动转录过程。

（2）据图分析可知；重组质粒上的标记基因是潮霉素抗性基因，因此筛含有选重组质粒的愈伤组织时，培养基中应该加入潮霉素。

（3）根据题干信息分析；实验的结果是发现全长P基因启动子具有很强的乙烯诱导响应，则应该设计非转基因愈伤组织；和不含乙烯利的对照组，且非转基因愈伤组织的对照组应该没有蓝色Gus斑点，不含乙烯利的对照组应该蓝色Gus斑点数较少甚至没有，实验方案如下表：

。实验材料。

处理。

结果或预期结果。

非转基因愈伤组织。

无蓝色Gus斑点。

pA转基因愈伤组织。

少量（无）蓝色Gus斑点。

（4）将上述愈伤组织培养成完整的植株需要利用植物组织培养技术；根据柱状图分析，乙烯利诱导6h后pA转基因植株基因的表达最旺盛，而其他缺失体基因的表达都降低了，说明题图中pA与pB之间缺失的序列最重要，即P基因启动子中-3572〜-2692bP区段是响应乙烯诱导的重要区域。

【点睛】解答本题的关键是分析题图中的四个重组质粒，与A相比确定B、C、D的长度依次减少，并能够根据标记基因确定筛选应该加入的物质；还能够根据实验的目的与结果，结合实验的基本原则设计实验。【解析】RNA聚合酶潮霉素。

。实验材料。

处理。

结果或预期结果。

非转基因愈伤组织。

无蓝色Gus斑点。

pA转基因愈伤组织。

少量（无）蓝色Gus斑点。

31、略

【分析】【分析】

动物细胞融合；又称细胞杂交，指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。

单克隆抗体制备的过程中需要经过两次筛选；第一次用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；第二次用专一抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

（1）取乳腺癌（MCF7）组织块，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行分散处理后，运用动物细胞培养技术获得MCF7细胞。要制备NRP-1单克隆抗体，需要用重组的人NRP-1蛋白对小鼠进行注射，使小鼠产生免疫反应，产生相应的浆细胞，与该浆细胞与骨髓瘤细胞进行融合处理，制备杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，可以从培养液即上清液中提取到单克隆抗体，可以用抗原-抗体杂交技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养，获得NRP-1单克隆抗体（NRP-1MAb）。

（2）实验的自变量是给药的剂量和时间，因变量是肿瘤的体积，对照组应该注射等量的生理盐水，根据实验结果可知，NRP-1MAb能够有效地降低肿瘤的体积；中；高浓度抗体的降低效果比低浓度的效果更显著。

（3）注射不同剂量NRP-1MAb33天后，剥离肿瘤组织称重，根据实验数据可知，NRP-1MAb可以明显降低肿瘤组织的重量；中；高浓度抗体的降低效果稍微没有低浓度的好，但这种差异并不显著。

（4）支持谨慎用药理由：随着治疗时间的延长，中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现的不一致性可能会加大；应进行后续研究，现阶段谨慎用药。

支持适宜浓度用药理由：该抗体已经显示了显著的抑瘤效果，中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上虽然出现了不一致性；但这种不一致性很小，可以考虑适宜浓度用药。

【点睛】

本题的难点在于需要考生根据题目信息分析NRP-1MAb抑制肿瘤的作用机理，具有一定的难度。要求考生能够从题干和题图中获取有效解题信息，分析作答。【解析】动物细胞培养神经纤毛蛋白-1（NRP-1）上清液等量的生理盐水NRP-1MAb能够有效地降低肿瘤的体积，中、高浓度抗体的降低效果比低浓度的效果更显著NRP-1MAb可以明显降低肿瘤组织的重量，中、高浓度抗体的降低效果稍微没有低浓度的好，但这种差异并不显著）第1种答案：支持谨慎用药理由：随着治疗时间的延长，中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现的不一致性可能会加大，应进行后续研究，现阶段谨慎用药。第2种答案：支持适宜浓度用药理由：该抗体已经显示了显著的抑瘤效果，中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上虽然出现了不一致性，但这种不一致性很小，可以考虑适宜浓度用药。六、非选择题(共4题，共20分)32、略

【分析】【分析】

1；分析题图：图示是利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程图。图中包括体外受精过程、采用转基因技术将目的基因（基因B）导入受精卵的过程、早期胚胎发育过程以及胚胎移植过程。

2；目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质