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文档简介
…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页,总=sectionpages22页第=page11页,总=sectionpages11页2024年中图版选修3生物上册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围:全部知识点;考试时间:120分钟学校:______姓名:______班级:______考号:______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题,共16分)1、用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是A.都需用培养箱B.都须用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D.都可体现细胞的全能性2、下列说法不正确的是()A.胚胎工程技术包括胚胎移植、胚胎分割、体外生产胚胎技术B.试管牛的培育过程属于克隆过程C.提供胚胎的个体称为“供体”,接受胚胎的个体叫“受体”D.胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程3、1958年;美国科学家斯图尔德应用植物组织培养技术,将二倍体胡萝卜韧皮部的一些细胞进行离体培养,最终发育成完整的新植株(如下图)。关于这一科学事实,下列叙述中错误的是。
A.该实验证明了植物细胞具有全能性B.此过程的整个阶段必须给予光照C.此过程中细胞只能进行有丝分裂D.利用该技术获得的后代能保持亲本性状4、下列生物学实验中,对材料的选择不合理的是()A.物质鉴定一般选择本身无色或色浅的材料B.DNA粗提取需选择猪血等DNA含量高的材料C.可选择植物花药观察减数分裂各时期的图像D.选择胚胎或幼龄动物组织进行动物细胞培养5、下列关于植物组织培养和动物克隆的说法,不正确的是()A.植物组织培养获得的试管苗可能为单倍体,也可能为二倍体B.同一株植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因型一定相同C.动物克隆的技术基础是动物细胞培养D.为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素6、“鉴别”与“筛选”是生物学研究中常用的技术手段。下列有关叙述错误的是()A.胚胎移植前,可取滋养层细胞做DNA分析,鉴别动物性别B.生物大分子RNA可用于鉴别蜥蜴与其他物种亲缘关系的远近C.植物体细胞杂交过程中,原生质体融合后需经筛选获得所需杂种细胞D.制备单克隆抗体时,用选择培养基筛选出产生所需抗体的杂交瘤细胞7、下列有关胚胎工程叙述正确的是()A.内细胞团的胚胎干细胞具有发育的全能性,体外培养可发育成新个体B.进行早期胚胎体外培养时,需配制不同成分的营养液,以培养不同发育时期的胚胎C.培养胚胎干细胞过程中加入胚胎成纤维细胞是为了促进细胞分化D.通过胚胎干细胞核移植,可以培育出与细胞核供体完全相同的复制品8、2018年中国科学院神经科学研究所宜布,攻克了克隆灵长类动物这一世界难题,首次成功以体细胞克隆出了两只猕猴——“中中”和“华华”,流程如下图。对于该过程的分析错误的是()
A.过程①表示胚胎移植B.克隆猴的性状与核供体性状不完全相同C.克隆猴的成功说明动物体细胞的细胞核具有全能性D.与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目减半评卷人得分二、多选题(共7题,共14分)9、下列可以用于从基因文库中寻找目的基因的方法是()。A.原位分子杂交法B.利用免疫方法C.制备特定的DNA探针D.利用PCR扩增法10、利用农杆菌转化法可将抗虫基因导入玉米细胞而获得抗虫植株。下列说法正确的是A.若对已知序列的抗虫基因进行大量扩增,应用PCR技术B.将重组的农杆菌Ti质粒喷洒到玉米伤口上,可成功转化C.利用害虫接种实验可从分子水平检测目的基因是否进入了玉米细胞D.将抗虫基因导入细胞质可避免通过花粉传播进入其他植物11、嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(CAR-T细胞疗法)被认为是极具前景的抗癌免疫疗法,该T细胞表面的嵌合抗原受体(简称CAR)能直接识别肿瘤细胞的特异性抗原。下图表示一种典型的CAR-T细胞疗法的操作流程。下列叙述正确的是()
A.CAR-T细胞通过CAR特异性识别肿瘤细胞B.该免疫疗法利用T细胞清除肿瘤细胞体现了免疫防御功能C.回输到病人体内的CAR-T细胞通过体液运输到达肿瘤细胞处D.利用病人自身的免疫细胞治疗癌症,可尽量避免自身免疫系统的攻击12、表中生物工程实验选择的材料与实验目的搭配合理的是()
。组别实验目的实验材料材料特点A获得生产人生长激素的转基因动物乳腺细胞分泌乳汁将相应产物排出体外B获得脱毒苗茎尖分生区附近病毒极少,甚至不含病毒C获得植物突变体愈伤组织细胞分裂能力强,易诱发突变D胚胎干细胞培养囊胚内细胞团能分化形成各种组织和器官A.AB.BC.CD.D13、SRY基因为Y染色体上的性别决定基因;可用SRY-PCR法鉴定胚胎性别,其基本程序如下图。相关说法正确的是。
A.提取滋养层细胞的DNA作为复制模板B.新合成的DNA都含模板DNA的两条链C.新合成DNA都含有胚胎细胞全部的遗传信息D.SRY探针能与雌性胚胎样品中DNA配对14、我国科学家培育“荧光猪”的技术流程如下图所示。图中字母表示有关技术或原理;匹配正确的是。
A.农杆菌转化法B.体外受精C.有丝分裂D.胚胎移植15、下图是我国华北地区某生态农业模式图。相关叙述正确的是()
A.该生态农业的构建主要遵循了物质循环再生、协调与平衡原理B.该生态系统能够保持相对稳定,不需要外界能量的输入C.该生态农业延长了食物链,提高了营养级之间的能量传递效率D.该生态农业能同时实现降低环境污染、增加农民收入、促进产业发展评卷人得分三、填空题(共6题,共12分)16、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题:
(1)在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________
(2)在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________
(3)基因工程中最常用的运载体是______
(4)人的基因在牛体内能表达,说明人和牛______17、自然条件下;奶牛的繁殖率非常低,一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体,其主要步骤如图所示。回答下列问题:
(1)从供体奶牛获得的精子,需对其进行___________处理才具有受精能力。
(2)通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞,为使其超数排卵常使用____________激素处理;采集到卵母细胞后,在体外将其培养到___________期;使其成熟。
(3)步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛,步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。
(4)进行步骤乙时,受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________,这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。18、基因治疗:基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因,从而达到治疗疾病的目的。19、今年年初;爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明,新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别,感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题:
(1)新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞,使机体产生_________性免疫反应,人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。
(2)感染病毒后,免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎,此时可通过适度使用_________对病人进行治疗;使其免疫功能下降,以避免肺部严重受损。
(3)科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液,检测相关抗体的水平,结果如图1。据此分析,应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体(单抗)。
(4)将制备的多种单抗分别与病毒混合,然后检测病毒对宿主细胞的感染率,结果如图2。据此分析,对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。
(5)患者康复后一段时间,若再次受到该病毒的攻击,机体内相应的__________细胞迅速增殖分化,产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。20、请写出基因工程的概念:_________________。请写出胚胎移植的概念:_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。21、自然条件下;奶牛的繁殖率非常低,一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体,其主要步骤如图所示。回答下列问题:
(1)从供体奶牛获得的精子,需对其进行___________处理才具有受精能力。
(2)通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞,为使其超数排卵常使用____________激素处理;采集到卵母细胞后,在体外将其培养到___________期;使其成熟。
(3)步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛,步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。
(4)进行步骤乙时,受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________,这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题,共15分)22、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误23、精子入卵后形成雄原核;同时卵子完成减数分裂Ⅱ,排出第二极体后,形成雌原核()A.正确B.错误24、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段,在自然状态下,哺乳动物的受精在子宫内完成。(选择性必修3P56)()A.正确B.错误25、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段;请判断下列题的叙述是否正确?
(_____)(1)从A到C的过程中有机物的含量减少。
(_____)(2)A;B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。
(_____)(3)胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。
(_____)(4)图示过程细胞通过有丝分裂增殖,遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误26、在生态工程建设中,只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题,共21分)27、hNaDC3(人钠/二羧酸协同转运蛋白-3)主要分布于肾脏等重要器官,它具有促进人肾小管上皮细胞能量代谢和转运等功能。科研人员利用基因工程技术构建绿色荧光蛋白与hNaDC3融合基因,并在肾小管上皮细胞中表达,以动态观察hNaDC3在肾小管上皮细胞中的定位情况,为进一步研究hNaDC3的生理功能奠定基础。研究主要过程如图(实验中使用的限制酶SacⅠ的识别序列是GAGCT↓C,限制酶SacⅡ识别序列是CCGC↓GG)。请分析回答:
(1)与PCR相比,过程①需要的特有的酶是______,应从人体______(器官)的组织细胞中获得模板RNA。
(2)DNA分子被SacⅠ切割后,形成的黏性末端是______。过程②选用SacⅠ、SacⅡ分别切割hNaDC3基因和质粒载体,可实现目的基因定向插入并正常表达的原因是______。
(3)过程③可获得多种重组DNA,可依据不同DNA分子的大小,运用______(技术)分离;筛选重组表达载体。
(4)显微观察导入“绿色荧光蛋白-hNaDC3融合基因”的猪肾小管上皮细胞后发现:转染后第1天绿色荧光混合分布于细胞质和细胞膜,核中未见绿色荧光;到第5天绿色荧光清晰聚集于细胞膜,细胞质和细胞核中未见绿色荧光。根据这一观察结果还不能得出“hNaDC3是在细胞质中生成后,在细胞膜上发挥作用”的结论,需要设置对照实验以排除绿色荧光蛋白本身的定位,对照实验的设计思路是______。
(5)研究人员以较高浓度的葡萄糖溶液培养导入融合基因的猪肾小管上皮细胞,一段时间后发现,转染细胞的细胞膜上绿色荧光明显增强。这一实验结果可以说明______。28、科学家利用细胞融合技术研究细胞膜的结构特性;进行了下列实验。
(1)将鼠细胞和人细胞在________培养箱中培养一段时间,用________处理;获取实验用的单细胞悬液。
(2)将两种细胞在37℃下混合培养,在培养液中加入______________诱导融合,形成融合细胞,一般两两融合的细胞有_____________种。
(3)细胞膜的主要成分是磷脂和蛋白质。将连接了荧光染料的抗体与融合细胞在一定条件下培养,抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合,其目的是标记膜蛋白,以便于显微镜观察。用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和_________,开始时,鼠的细胞为绿色,人的细胞为红色,两种颜色不混合;一段时间后,可观察到红绿荧光交替分布的“嵌合体”。统计____________;结果如下图所示。
(4)科学家据此提出两种假说解释嵌合体的形成。
假说一:融合细胞合成了新的膜蛋白;
假说二:原有膜蛋白在细胞膜平面上运动。
①使用_______________抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞;均对嵌合体形成没有显著影响,这个结果否定了假说一。
②在15℃、20℃和26℃的培养温度下重复上述实验,这些实验的结果为_________,为假说二提供了证据支持。29、神经纤毛蛋白-1(NRP-1)是血管内皮生长因子的新型受体;通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。本研究将为NRP-1单克隆抗体靶向治疗乳腺癌提供数据基础。
(1)取乳腺癌(MCF7)组织块,运用_____技术获得MCF7细胞用于后续实验。用重组的人_____蛋白对小鼠进行注射,使小鼠产生免疫反应,制备杂交瘤细胞,将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,吸取培养孔中的________(填“上清液”或“沉淀细胞”),进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养,获得NRP-1单克隆抗体(NRP-1MAb)。
(2)将MCF7细胞制成单细胞悬液;等量注入4组裸鼠右前腋下,接种后3天开始给药,共给药7次。每隔5天测算一次肿瘤的肿瘤体积,如下图所示。
对照组注射_____;从上图中可以看出_____。
(3)注射不同剂量NRP-1MAb33天后;剥离肿瘤组织称重,实验结果如下图:
该结果表明____________________________________________________。
(4)基于以上研究,科学家们对该抗体的用药方式有两种观点:谨慎用药和适宜浓度用药。你支持哪个观点,并说出理由___________________________________。评卷人得分六、综合题(共4题,共40分)30、“脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术;通过荧光蛋白“点亮”大脑内的神经元,帮助科学家了解大脑。
(1)Cre酶是该技术的关键酶;能随机识别两个相同的loxP序列,催化如图1所示的反应。
通过Cre-loxP系统敲除基因的基本原理是:Cre酶随机识别DNA分子上两个相同的loxP序列并从特定位点切断DNA双链;切口被重新连接后,保留片段_____,从而实现目标基因的敲除。
(2)研究者设计图2所示的DNA片段;转人小鼠体内,获得仅含一个图2所示片段的转基因小鼠。
①构建基因表达载体时;需用限制酶和_____酶处理三种荧光蛋白基因;两种loxP序列,将它们与脑组织特异表达启动子M相连接。
②研究者用显微注射法将图2所示表达载体导入小鼠的_____中;得到仅含一个图2所示片段的转基因小鼠,再经过进一步筛选,获得纯合的转基因小鼠a。
(3)图2所示序列的两个loxP1之间或两个loxP2之间的基因,只会被Cre酶识别并切割一次。为使脑组织细胞中Cre酶的表达受调控,研究者将Cre酶基因与启动子N(由信号分子X开启)连接,获得纯合转基因小鼠b,将图3所示纯合小鼠a和b杂交,得到F1。
①无信号分子X作用时,F1脑组织和其他组织细胞的色彩分别是_____。
②有信号分子X作用时,F1:出现“脑彩虹”;请阐述机理:_____。
(4)研究者希望具有更丰富的颜色组合,即在一个细胞内随机出现两种或两种以上颜色叠加,形成更多颜色的“脑彩虹”,请依据题目信息,写出设计思路:_____。31、人胚胎干细胞(hESCs)可在体外增殖并分化成多种类型的体细胞。科研人员诱导hESCs定向分化为前脑神经干细胞(FNSCs);探索FNSCs移植对脑缺血小鼠运动功能异常的治疗效果。回答下列问题。
(1)在人体内,胚胎干细胞可由_____________分离而来,具有发育的___________性。
(2)在饲养层细胞上培养hESCs使其增殖,然后在培养液中添加特定的_____________;诱导hESCs定向分化为FNSCs。
(3)获得FNSCs后,对生理状态相近的成年____________(填“健康”或“免疫缺陷”)小鼠进行手术,构建脑缺血模型小鼠,并随机均分为甲、乙两组,甲组注射一定量的缓冲液作为对照组;乙组注射___________作为实验组。五周后,比较实验组和对照组小鼠的___________;以评估FNSCs的治疗效果。
(4)胚胎干细胞因在多领域具有重要价值而备受关注,但其来源有限。2022年3月,中科院在《自然》上公布研究成果:科研人员诱导培养多能干细胞,得到了具有全能性的8细胞期胚胎样细胞,这些细胞相当于人类全能干细胞。该技术得到的8细胞期胚胎样细胞与人体胚胎发育___________(填“卵裂”“囊胚”或“原肠胚”)期的细胞相似,对解决器官移植中的____________(答出2点即可)问题有重大意义。32、为进行牛胚胎移植;可通过下列途径获得优良胚胎,请回答相关问题:
(1)在途径①中,为一次性获得数目较多的胚胎,可用激素对供体母牛做______处理。若进行体外受精,应使用培养到_____的卵母细胞。
(2)在途径②中,用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞,原因是____;动物细胞培养时数量达到一定程度后出现_____现象而使细胞停止分裂;需用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞继续培养。
(3)进行胚胎移植的优势是____________。33、Leigh氏综合征是一种攻击神经系统的严重神经障碍;其致病基因位于线粒体DNA中。一位母亲约有1/4的线粒体携带有这种致病基因,她的前两个孩子因为患有Leigh氏综合征而夭亡。她的第三个孩子因为授受另一名女性捐赠的健康基因而成为全球首个拥有“三个父母”的男婴。请根据男婴孕育过程回答下面的问题:
(1)该母亲的前两个孩子患病夭亡的原因是________。该健康男婴孕育过程中依次使用了________、体外受精、早期胚胎培养和________等技术。
(2)图示过程中代表该母亲卵母细胞的________(填“A”或“B”)。取卵之前,该母亲需要注射________激素。
(3)将受精卵移入发育培养液中继续培养至桑葚胚或________;再进行胚胎移植。
(4)在胚胎孕育过程中医疗团队特意选择了男性胚胎移入子宫发育原因是___________________。参考答案一、选择题(共8题,共16分)1、C【分析】动、植物成体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行,动物成体的体细胞离体培养用液体培养基,不能体现细胞的全能性,植物成体的体细胞离体培养不一定用液体培养基,能体现细胞的全能性。故C正确。2、B【分析】【分析】
试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精;并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植后产生后代的技术。
【详解】
A;胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术;如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术,A正确;
B;试管牛是由受精卵发育而成;应为有性生殖,克隆属无性生殖,B错误;
C;提供胚胎的个体称为“供体”;接受胚胎的个体叫“受体”,C正确;
D;胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎;或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术;所以胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程,D正确;
故选B。
【点睛】
本题考查胚胎工程技术的原理及分析判断能力。3、B【分析】【分析】
植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下;将离体的植物器官;组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。无性生殖能保持亲本优良性状,植物组织培养就是无性生殖中的一种。
【详解】
将离体的植物细胞培养成完整植株的过程证明了植物细胞具有全能性;A正确;植物组织培养过程的脱分化阶段不需要光照,B错误;植物组织培养过程中细胞只能进行有丝分裂,C正确;植物组织培养过程的生殖属于无性生殖,产生的后代能保持亲本的性状,D正确。
【点睛】
关键:熟悉植物组织培养技术的原理(细胞的全能性)、繁殖方式(无性生殖)、培育条件(脱分化不需光照,再分化需要适宜光照)等是解答本题的关键。4、B【分析】【分析】
哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和众多细胞器;没有DNA。
【详解】
A;物质鉴定实验中;材料本身不能干扰实验结果,所以一般选择本身无色或色浅的材料,A正确;
B;猪血为哺乳动物成熟的红细胞;没有DNA,B错误;
C;植物花药可以进行减数分裂的细胞多;故可以用来观察减数分裂各时期的图像,C正确;
D;动物细胞培养时;一般选择胚胎或分化程度低的细胞,如幼龄动物组织,D正确。
故选B。5、B【分析】【分析】
1;植物组织培养技术的过程:外植体经过脱分化形成愈伤组织;愈伤组织再分化形成新植体;
2;动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础;
动物细胞培养的条件:(1)无菌;无毒的环境:①消毒、灭菌;②添加一定量的抗生素;③定期更换培养液;以清除代谢废物;
(2)营养物质:糖;氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等;还需加入血清、血浆等天然物质;
(3)温度和pH:36.5℃±0.5℃;适宜的pH:7.2~7.4;
(4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的pH)。
【详解】
A;花药离体培养获得的试管苗是单倍体;植物体细胞离体培养获得的可能是二倍体,A正确;
B;以同一株绿色开花植物的任何细胞经组织培养获得的愈伤组织的基因型不一定相同;如花粉细胞和体细胞培养形成的植株愈伤组织的基因型不同,B错误;
C;动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础;因此动物克隆的技术基础是动物细胞培养,C正确;
D;为了防止细胞培养过程中细菌的污染;可向培养液中加入适量的抗生素,D正确。
故选B。
【点睛】6、D【分析】【分析】
用特定的选择培养基进行筛选杂交瘤细胞;在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
【详解】
A;滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘;取滋养层细胞做DNA分析不会对胚胎发育造成影响,A正确;
B;生物大分子DNA、RNA、蛋白质均具有物种特异性;可用于鉴别蜥蜴与其他物种亲缘关系的远近,B正确;
C;植物体细胞杂交过程中;同种细胞也可能发生融合,原生质体融合后需经筛选获得所需杂种细胞,C正确;
D;制备单克隆抗体时;用抗原抗体杂交技术选出产生所需抗体的杂交瘤细胞,D错误。
故选D。7、B【分析】【分析】
胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术;如胚胎移植;体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。
(一)动物胚胎发育的基本过程(1)卵裂期(2)桑椹胚(16~32)(3)囊胚/胚泡:细胞开始分化;形成滋养层(胚胎附属结构/胚外结构)和内细胞团(胚胎干/ES细胞,发育全能性),之间为囊胚腔注意题目要求填写滋养层细胞还是滋养层原肠胚:三胚层分化,其将分化成各种器官原基;——哺乳动物胚胎有机物总量增加(胚泡期已着床),其他动物有机物减少PS早期胚胎(桑葚胚和早期囊胚)。
(二)胚胎干细胞。
1;哺乳动物胚胎干细胞来源于囊胚内细胞团(ES)或胎儿的原始性腺(EK)
2;特征:具有发育全能性胚胎干细胞体外培养:分离早期胚胎中的内细胞团;胰酶处理解离培养——饲养层(胚胎成纤维细胞):促进生长;抑制分化。
【详解】
A;内细胞团的胚胎干细胞具有发育的全能性;即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞,但不能经体外培养发育成新个体,A错误;
B;不同阶段的胚胎需要的营养物质不同;因此在体外培养时,需要配制不同成分的营养液,B正确;
C;培养胚胎干细胞过程中;加入胚胎成纤维细胞是为了抑制细胞分化,并非促进分化,C错误;
D;由于胚胎干细胞还未分化;因此通过核移植后,细胞会发生分化,性状与细胞核供体不完全相同,D错误。
故选B。8、D【分析】【分析】
本题考查动物克隆的相关知识。动物克隆过程涉及到核移植技术和早期胚胎培养技术。分析图示克隆猴获取过程:将供体细胞核移入去除核的卵母细胞中;诱导融合成重组细胞,诱导发育形成早期胚胎,将早期胚胎移入代孕母猴子宫中继续发育,获得克隆猴。
【详解】
过程①是将早期胚胎移入代孕母猴子宫中发育,属于胚胎移植,A正确;克隆猴的核遗传物质由供体细胞提供,但细胞质中的遗传物质由去核卵母细胞提供,故克隆猴的性状与核供体性状大部分相同,B正确;克隆猴的成功说明动物细胞核具有发育成完整个体的潜能,即能说明动物细胞核具有全能性,C正确;克隆猴由重组细胞发育而来,重组细胞中的染色体全部来自核供体,重组细胞在生长发育过程中通过有丝分裂增殖,故克隆猴体细胞的染色体数与核供体一样多,D错误;因此,本题答案选D。二、多选题(共7题,共14分)9、A:B:C:D【分析】【分析】
本题考查基因工程;考查对目的基因获取方法的理解。明确选项中各种方法的原理是解答本题的关键。
【详解】
从基因文库中获取目的基因可以根据基因的核苷酸序列、基因的功能或基因的转录产物mRNA,据此可采用原位分子杂交法或制备特定的DNA探针;利用基因指导合成的蛋白质可采用抗原和抗体特异性结合的免疫方法寻找目的基因;若目的基因两端的部分碱基序列已知,可采用PCR扩增法获得目的基因,选ABCD。10、A:D【分析】【分析】
农杆菌转化法(约80%的转基因植物都是用这种方法获得的):
①农杆菌特点:易感染双子叶植物和裸子植物;对单子叶植物没有感染力;Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。
②转化:目的基因插人Ti质粒的T-DNA上进入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
【详解】
A;PCR技术是体外复制特定目的基因片段的技术;若对已知序列的抗虫基因进行大量扩增,应用PCR技术,A正确;
B;将重组的农杆菌Ti质粒导入农杆菌;再用农杆菌去侵染玉米才可能成功转化,B错误;
C;利用害虫接种实验可从个体水平检测目的基因是否进入了玉米细胞;C错误;
D;将抗虫基因导入细胞质可避免通过花粉传播进入其他植物;导致基因污染,D正确。
故选AD。
【点睛】
本题考查基因工程的相关知识,解题关键是识记基因工程的原理及操作步骤,掌握各操作步骤中需要注意的细节问题,能结合所学的知识准确判断各选项。11、A:C:D【分析】【分析】
1;细胞免疫过程为:(1)感应阶段:抗原呈递细胞摄取和处理抗原;并暴露出其抗原决定簇,然后将抗原呈递给辅助性T细胞;(2)反应阶段:细胞毒性T细胞接受抗原刺激后增殖、分化形成记忆细胞和新的细胞毒性T细胞,同时辅助性T细胞能合成并分泌细胞因子,增强免疫功能。(3)效应阶段:细胞毒性T细胞发挥效应。
2;体液免疫的过程是:病原体被吞噬细胞吞噬、处理呈递给辅助性T细胞;辅助性T细胞将抗原呈递给B细胞,B细胞在辅助性T细胞产生的淋巴因子的作用下,增殖分化形成浆细胞和记忆细胞,浆细胞合成和分泌抗体,抗体与抗原特异性结合,形成细胞集团或沉淀物,被吞噬细胞进一步吞噬消化;记忆细胞的作用是进行二次免疫应答。
【详解】
A;根据题干信息“T细胞表面的嵌合抗原受体(简称CAR)能直接识别肿瘤细胞的特异性抗原”可知;CAR-T细胞可以通过CAR识别相关癌变细胞,A正确;
B;该免疫疗法利用T细胞清除肿瘤细胞体现了免疫监视功能;B错误;
C;回输CAR-T细胞时进行的是静脉注射;回输到病人体内的CAR-T细胞通过体液运输到达肿瘤细胞,进行肿瘤细胞免疫治疗,C正确;
D;由于自身免疫细胞没有外部抗原;属于利用病人自身的免疫细胞治疗癌症,可避免免疫排斥现象,D正确。
故选ACD。12、B:C:D【分析】【分析】
囊胚的内细胞团细胞属于胚胎干细胞;具有很强的分裂能力,可以用胚胎干细胞培养;采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时,受体细胞是受精卵,因为受精卵全能性最高。
【详解】
A;采用基因工程技术培养乳腺生物反应器时;受体细胞是受精卵而不是乳腺细胞,因为受精卵全能性最高,A错误;
B;植物分生区附近(如茎尖)含病毒极少;甚至不舍病毒,因此可采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗,B正确;
C;愈伤组织分裂能力强;易发生突变,容易获得突变体,C正确;
D;囊胚的内细胞团细胞具有很强的分裂能力;可以用于胚胎干细胞培养,进而诱导培养成各种组织和器官,D正确。
故选BCD。13、A【分析】试题分析:滋养层细胞是胎儿发育过程中形成的细胞;其DNA可作为复制模板,A正确;DNA复制的特点是半保留复制,新合成的子一代DNA含模板DNA的一条链,B错误;新合成DNA仅含有该种DNA全部的遗传信息,不含有胚胎细胞中其他DNA的遗传信息,C错误;SRY探针能与雄性胚胎样品中DNA配对,形成杂合双链,D错误。
考点:本题考查DNA复制及基因探针的相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识网络的能力。14、C:D【分析】试题分析:A常用显微注射法;B表示动物细胞核移植技术,C表示早期胚胎培养,细胞分裂方式是有丝分裂,D表示胚胎移植。故选CD。
考点:本题考查基因工程和胚胎工程,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构。15、A:D【分析】【分析】
生态农业是一个农业生态经济复合系统;将农业生态系统同农业经济系统综合统一起来,以取得最大的生态经济整体效益。它也是农;林、牧、副、渔各业综合起来的大农业,又是农业生产、加工、销售综合起来,适应市场经济发展的现代农业。生态工程的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理和系统学和工程学原理。建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用,提高能量的利用率,减少环境污染。
【详解】
A;生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生、协调与平衡、整体性、系统学和工程学原理和物种多样性等原理;鸡粪秸秆用于沼气池,最后沼渣用于农作物的生产主要符合物质循环再生原理;图示生态工程的设计利用了还协调与平衡原理,A正确;
B;由于生态系统的能量流动是单向流动、逐级递减的;因此,任何生态系统均需要不断得到来自系统外的能量补充,B错误;
C;该生态农业延长了食物链;提高提高能量利用率,不能提高营养级之间的能量传递效率,C错误;
D;该生态农业能同时实现降低环境污染、增加农民收入、促进产业发展;从而实现了自然、经济和社会的协调发展,D正确。
故选AD。三、填空题(共6题,共12分)16、略
【分析】(1)在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶;
(2)在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶;
(3)基因工程中最常用的运载体是质粒;
(4)人的基因在牛体内能表达;说明人和牛共用一套遗传密码。
【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码17、略
【分析】【分析】
胚胎移植:
1;胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎;或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术,其中提供胚胎的个体称为“供体”,接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种,作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种),如转基因、核移植,或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎,都必须经过胚胎移植技术才能获得后代,是胚胎工程的最后一道“工序”。
2;胚胎移植的意义:大大缩短了供体本身的繁殖周期;充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
【详解】
(1)体外受精前要对精子进行获能处理;使其具有受精能力。
(2)要使动物超数排卵;利用促性腺激素;需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。
(3)步骤甲是人工受精;将受精卵移入受体母牛,进行的操作叫做胚胎移植(乙);胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。
(4)胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。
【点睛】
胚胎移植的实质:早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。18、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】取代修补19、略
【分析】【分析】
分析图1:表示多年前感染EV并已康复的甲;乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知;多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。
分析图2:表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知;单克隆抗体和病毒混合,加入单抗Ⅲ;Ⅴ后,病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。
【详解】
(1)由题意可知;新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞,使机体产生特异性免疫反应,人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。
(2)免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎;此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗,使其免疫功能下降,以避免肺部严重受损。
(3)由图1可知;多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组,故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。
(4)由图2可知;单克隆抗体和病毒混合,加入单抗Ⅲ后,病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。
(5)患者康复后一段时间;若再次受到该病毒的攻击,机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化,产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。
【点睛】
本题结合图解,考查病毒、单克隆抗体的制备等,要求考生识记病毒的结构,明确病毒没有细胞结构;识记单克隆抗体的制备过程,掌握其优点及相关应用,能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白(或蛋白质)④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆20、略
【分析】【分析】
动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织;将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织;器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
【详解】
1;基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术;是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。
2;胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎;或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。
3;动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织;将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖,其原理是细胞增殖。
4;植物组织培养又叫离体培养;指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。
【点睛】
本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识,意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植,是指将雌性动物体内的的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖21、略
【分析】【分析】
胚胎移植:
1;胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎;或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术,其中提供胚胎的个体称为“供体”,接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种,作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种),如转基因、核移植,或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎,都必须经过胚胎移植技术才能获得后代,是胚胎工程的最后一道“工序”。
2;胚胎移植的意义:大大缩短了供体本身的繁殖周期;充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
【详解】
(1)体外受精前要对精子进行获能处理;使其具有受精能力。
(2)要使动物超数排卵;利用促性腺激素;需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。
(3)步骤甲是人工受精;将受精卵移入受体母牛,进行的操作叫做胚胎移植(乙);胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。
(4)胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。
【点睛】
胚胎移植的实质:早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题,共15分)22、A【分析】【详解】
由于存在防止多精入卵的两道屏障,故一个卵细胞一般只能同一个精子结合,形成受精卵,这句话是正确的。23、A【分析】【详解】
受精过程为:顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带(透明带反应)→卵细胞膜反应(卵黄膜封闭作用)→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成;核膜消失;雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核,同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ,排出第二极体后,形成雌原核,雄、雌原核充分发育后,相向移动,彼此靠近,核膜消失,形成受精卵,故此说法正确。
故正确。24、B【分析】【详解】
受精包括受精前的准备阶段和受精阶段;在自然状态下,哺乳动物的受精在输卵管内完成。
故错误。25、B【分析】【分析】
据图分析;图中A是桑椹胚,B是囊胚,C是原肠胚。图B中1是滋养层,2是内细胞团,3是透明带,4是囊胚腔;图C中5是外胚层,6是滋养层,7是原肠腔,8是内胚层。
【详解】
(1)从A到C的过程中细胞均需要消耗能量;故胚胎中有机物的含量均减少,(1)正确。
(2)桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能;属全能细胞,故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞,囊胚期时细胞出现分化,滋养层细胞不是全能细胞,(2)错误。
(3)胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎;处于A或B时期的胚胎,(3)错误。
(4)图示过程细胞通过有丝分裂增殖;有丝分裂过程中可能发生突变,遗传物质可能会发生改变,(4)正确。
故分别为√、×、×、√。26、B【分析】【详解】
生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的,导致了生态工程的局限性,使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题,因此不能走“先污染、破坏,后治理”的老路,故错误。五、实验题(共3题,共21分)27、略
【分析】【分析】
分析图解:图中过程①表示通过反转录法合成目的基因;过程②表示构建hNaDC3基因的表达载体,过程③表示构建绿色荧光蛋白-hNaDC3融合基因的表达载体,④表示将目的基因导入受体细胞,⑤表示目的基因的检测和鉴定。
【详解】
(1)分析图解;图中过程①表示通过反转录法合成目的基因,因此与PCR相比,过程①需要的特有的酶是逆转录酶(或反转录酶)。由于基因的选择性表达,只能从人体肾脏的组织细胞中获得模板RNA。
(2)根据题意可知,“限制酶SacⅠ的识别序列是GAGCT↓C”;因此DNA分子被SacⅠ切割后,形成的黏性末端是-AGCT。过程②选用SacⅠ;SacⅡ分别切割hNaDC3基因和质粒载体,两种限制酶切割产生的黏性末端不同,因此可实现目的基因定向插入并正常表达。
(3)过程③可获得多种重组DNA;可依据不同DNA分子的大小,运用(凝胶)电泳分离;筛选重组表达载体。
(4)根据实验探究目的“hNaDC3是在细胞质中生成后;在细胞膜上发挥作用”,实验需要设置对照实验以排除绿色荧光蛋白本身的定位,对照实验的设计思路是将GFP基因表达载体直接导入猪肾小管上皮细胞,然后观察绿色荧光在细胞中的分布情况。
(5)研究人员以较高浓度的葡萄糖溶液培养导入融合基因的猪肾小管上皮细胞;一段时间后发现,转染细胞的细胞膜上绿色荧光明显增强。这一实验结果可以说明较高浓度葡萄糖能增强肾小管上皮细胞中hNaDC3基因的表达。
【点睛】
本题着重考查了基因工程方面的知识,解题的关键是掌握转基因技术的的原理和步骤。【解析】逆转录酶(或反转录酶)肾脏-AGCT两种限制酶切割产生的黏性末端不同(凝胶)电泳将GFP基因表达载体直接导入猪肾小管上皮细胞,然后观察绿色荧光在细胞中的分布情况较高浓度葡萄糖能增强肾小管上皮细胞中hNaDC3基因的表达28、略
【分析】【分析】
本题是对利用细胞融合技术探究细胞膜的流动性实验的考查;回忆细胞融合技术的过程和细胞膜的成分,然后结合题干给出的信息解答问题。
【详解】
(1)动物细胞培养需要一定的气体环境;因此需要放到二氧化碳培养箱中培养;由于胰蛋白酶能水解细胞膜表面的蛋白质,因此常用胰蛋白酶处理动物组织,使组织细胞分散开,进而制成细胞悬液。
(2)诱导动物细胞融合常用(灭活的)病毒(或PEG);合成后的融合细胞一般有3种。
(3)细胞膜主要由磷脂和蛋白质组成;抗体与荧光染料结合后抗体被标记;当抗体与融合细胞的膜蛋白(抗原)特异性结合时,膜蛋白就被标记;用荧光显微镜观察融合细胞表面荧光的颜色和分布,并观察和统计嵌合体比例。
(4)①假如嵌合体形成是融合细胞合成了新的膜蛋白;用蛋白质合成抑制剂和ATP合成抑制剂分别处理融合细胞,嵌合体形成会受影响。
②温度可以提高分子的无规则运动,因此随着温度增加,嵌合体比例增加(或“随着温度降低,嵌合体比例降低”),说明原有膜蛋白在细胞膜平面上运动,为假说二提供了证据支持。【解析】C02胰蛋白酶(灭活的)病毒(或PEG)3分布嵌合体比例蛋白质合成随着温度增加,嵌合体比例增加(或随着温度降低,嵌合体比例降低)29、略
【分析】【分析】
动物细胞融合;又称细胞杂交,指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。
单克隆抗体制备的过程中需要经过两次筛选;第一次用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;第二次用专一抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
【详解】
(1)取乳腺癌(MCF7)组织块,需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行分散处理后,运用动物细胞培养技术获得MCF7细胞。要制备NRP-1单克隆抗体,需要用重组的人NRP-1蛋白对小鼠进行注射,使小鼠产生免疫反应,产生相应的浆细胞,与该浆细胞与骨髓瘤细胞进行融合处理,制备杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,可以从培养液即上清液中提取到单克隆抗体,可以用抗原-抗体杂交技术进行抗体阳性检测。经多次筛选和细胞培养,获得NRP-1单克隆抗体(NRP-1MAb)。
(2)实验的自变量是给药的剂量和时间,因变量是肿瘤的体积,对照组应该注射等量的生理盐水,根据实验结果可知,NRP-1MAb能够有效地降低肿瘤的体积;中;高浓度抗体的降低效果比低浓度的效果更显著。
(3)注射不同剂量NRP-1MAb33天后,剥离肿瘤组织称重,根据实验数据可知,NRP-1MAb可以明显降低肿瘤组织的重量;中;高浓度抗体的降低效果稍微没有低浓度的好,但这种差异并不显著。
(4)支持谨慎用药理由:随着治疗时间的延长,中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现的不一致性可能会加大;应进行后续研究,现阶段谨慎用药。
支持适宜浓度用药理由:该抗体已经显示了显著的抑瘤效果,中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上虽然出现了不一致性;但这种不一致性很小,可以考虑适宜浓度用药。
【点睛】
本题的难点在于需要考生根据题目信息分析NRP-1MAb抑制肿瘤的作用机理,具有一定的难度。要求考生能够从题干和题图中获取有效解题信息,分析作答。【解析】动物细胞培养神经纤毛蛋白-1(NRP-1)上清液等量的生理盐水NRP-1MAb能够有效地降低肿瘤的体积,中、高浓度抗体的降低效果比低浓度的效果更显著NRP-1MAb可以明显降低肿瘤组织的重量,中、高浓度抗体的降低效果稍微没有低浓度的好,但这种差异并不显著)第1种答案:支持谨慎用药理由:随着治疗时间的延长,中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上出现的不一致性可能会加大,应进行后续研究,现阶段谨慎用药。第2种答案:支持适宜浓度用药理由:该抗体已经显示了显著的抑瘤效果,中高剂量和低剂量的NRP-1MAb在降低肿瘤体积和降低肿瘤重量上虽然出现了不一致性,但这种不一致性很小,可以考虑适宜浓度用药。六、综合题(共4题,共40分)30、略
【分析】【分析】
1;限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列;并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
2;将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同;导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
【详解】
(1)通过图1可知,Cre酶识别两个相同的loxP序列;进行切除,切除后片段1自身环化且带有待敲除基因,片段2没有待敲除基因,故保留片段2,从而实现目标基因的敲除。
(2)①基因表达载体构建过程中需要限制酶和DNA连接酶两种工具酶处理三种荧光蛋白基因;两种loxP序列;将它们与脑组织特异表达启动子M相连接。
②常用显微注射法将基因表达载体导入小鼠的受精卵细胞中;得到仅含一个图2所示片段的转基因小鼠,再经过进一步筛选,获得纯合的转基因小鼠a。
(3)①F1为杂合子,脑组织细胞中有编码红、黄、蓝荧光蛋白的基因、loxP1、loxP2及Cre酶基因;无信号分子X时,Cre酶不表达;仅表达与启动子相邻的荧光蛋白的基因即红色荧光蛋白基因,使脑组织细胞呈红色。通过题干信息可知,“脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术,通过荧光蛋白“点亮”大脑内的神经元,而其他组织细胞非神经细胞,故表现出无色。
②F1为杂合子,有编码红、黄、蓝荧光蛋白的基因、loxP1、loxP2及Cre酶基因;有信号分子X时,启动Cre酶表达
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