2025年北师大版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年北师大版选择性必修3生物上册阶段测试试卷82考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、利用基因重组技术制造的全新致病菌比一般生物武器的危害性大；其原因是（）

①人类从来没有接触过这种致病菌②无药可医。

③具有某种易感基因的民族容易感染，而施放国的人却不易感染A.①B.②C.②③D.①②2、下图为早期胚胎结构图；下列叙述中正确的是（）

A.图中1称为胚胎干细胞，可发育成胚盘等多种细胞B.图中2称为原肠腔C.图中3为滋养层细胞，在胚胎发育中退化消失，不能分化为其他结构D.图中1和3细胞都来自同一个受精卵细胞3、下面有关微生物培养、分离等的叙述，错误的是（）A.检验自来水中大肠杆菌数是否超标，可用滤膜法来分离并计数B.检测同种水样中细菌的数量时，设置空白培养基检验培养基制备是否合格C.配制培养基时要注意各种营养成分，必须含有碳源、氮源、无机盐、水及生长因子D.对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存，但该方法保存的菌种易变异4、科学家用灭活的病毒把骨髓瘤细胞与经过免疫的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，灭活病毒的作用是（）A.病毒比较小，可钻入到细胞内B.灭活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以让细胞聚集C.灭活的病毒已失去感染性，对各种动物细胞不造成破坏，但所保留的融合活性可使不同的动物细胞进行融合D.灭活的病毒带有目的基因，通过融合可以让杂交细胞带有目的基因5、应用特定的测序技术发现某明代古沉船船体饱水木材样品与沉积物中含有丰富的原核微生物类群，与漆黑海底现场取的木材样品与沉积物中的菌群种类相似，但是菌群含量存在明显的差异。下列叙述正确的是（）A.可用加入酚红试剂的鉴别培养基鉴定古沉船船体木材中是否存在纤维素分解菌B.在漆黑的海底现场获取的木材样品中含有大量能够进行化能合成作用的硝化细菌菌群C.海底沉积物为多种多样的细菌菌群提供了生长、繁殖所需的全部的碳源和氮源D.用血细胞计数板统计某细菌的种群数量时后盖盖玻片会导致所得结果比实际值偏大6、如图是培育“试管婴儿”的主要过程。2012年中国首例“设计试管婴儿”诞生；该女婴出生目的是挽救患有重度致命贫血病的14岁姐姐。

下列叙述错误的是（）A.“设计试管婴儿”需在②时进行遗传学诊断B.“试管婴儿”“设计试管婴儿”均属有性生殖C.“设计试管婴儿”的技术不属于“治疗性克隆”D.该女婴造血干细胞不能挽救其他贫血病患者7、在降雨量少且分布不均匀的西北地区，苹果树腐烂病在各个苹果产区经常发生，已经成为苹果产量和安全种植的主要限制因素，筛选苹果腐烂病的拮抗放线菌对该病的防治具有重要意义。科研工作者利用PDA培养基培养放线菌和苹果树腐烂病菌。在PDA培养基平板上进行下图所示的操作，将培养皿置于28°C培养箱培养，待甲图培养皿的菌体长满培养皿时，测量乙图中放线菌周围抑菌圈的直径，进行筛选。下列分析不正确的是（）

A.甲图的培养皿为对照组，乙图的培养皿为实验组B.应从发病的土壤取样，分离得到苹果树腐烂病菌和放线菌C.PDA培养基中含有两种微生物生长发育所需的水、碳源、氮源和无机盐等D.乙图中显示抑菌圈直径越小的放线菌，其拮抗苹果树腐烂病菌的能力越强8、20世纪60年代，科学家尝试通过体细胞杂交技术将番茄（2n）和马铃薯（4N）杂交，希望培育出一种地上结番茄、地下长马铃薯的“超级作物”。下列关于“超级作物”培育技术的叙述，错误的是（）A.PEG诱导原生质体融合利用了细胞膜的流动性B.体细胞杂交前需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁C.马铃薯细胞与番茄细胞完成融合的标志是再生出细胞壁D.可用灭活的病毒诱导马铃薯细胞与番茄细胞进行融合评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)9、我国科学家提出的异种克隆大熊猫实验技术路线如下图。相关叙述错误的是（）

A.科学家通过对母兔注射孕激素，进行超数排卵处理以获得更多的卵母细胞B.异种重构囊胚在体外培养时，为保证无毒无菌环境，往往需要在培养液中加入维生素C.囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成，后者将来可发育成胎儿的各种组织D.兔子宫提供的生理环境与大熊猫差异大，异种重构囊胚可能不能正常发育出大熊猫幼仔10、下列有关利用酵母菌发酵制作葡萄酒的叙述，错误的是（）A.葡萄糖在酵母菌细胞的线粒体内分解成丙酮酸B.制作葡萄酒时，酵母菌先在有氧条件下大量繁殖C.制作过程中，酵母菌始终处于碱性环境D.酵母菌的发酵产物不会影响自身的代谢活动11、科学家将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），下图为该实验示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.应用该技术可缓解器官移植时器官供应不足的问题B.iPS细胞所携带的遗传信息与肌肉细胞相同C.关键基因表达使细胞功能趋向专门化，降低了细胞的分化程度D.图示过程体现了iPS细胞的全能性12、下列关于植物组织培养及其应用的说法中，正确的是（）A.植物体体内具完整细胞结构的活细胞均可作为组织培养的外植体B.不同培养阶段的培养基中生长素与细胞分裂素的比例应不同C.单倍体育种和转基因植物的培育需要利用植物组织培养技术D.利用植物组织培养技术可实现某些重要细胞产物的工厂化生产13、驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（）A.驱蚊草的培育属于细胞工程育种，优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍B.驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法C.驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，无细胞脱分化和再分化的过程D.驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是基因突变14、在单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞（即瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞）的筛选是必不可少的步骤。筛选杂交瘤细胞所用的HAT培养基成分和细胞增殖时所需的核苷酸的两条形成途径（D途径，S途径）如下表所示。已知融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的中间合成途径缺失株，即只有起始合成途径，效应B细胞有两条核苷酸合成途径。若仅考虑细胞的两两融合，下列说法错误的是（）。HAT培养基成分水，糖类、无机盐、次黄嘌呤、氨基糖呤（叶酸拮抗剂），胸腺嘧啶脱氧核苷等起始合成途径（D途径）由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程中间合成途径（S建径）利用次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸

A.HAT培养基中瘤细胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.杂交瘤细胞能被筛选的原因为既具备增殖能力，又可进行S途径C.筛选出来的杂交瘤细胞分泌的均为同一种特异性抗体D.在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，有D途径的细胞有3种15、利用PCR技术扩增目的基因的过程中两种引物分别为A和B，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述正确的是（）A.从理论上推测，第二轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4B.在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段C.引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因D.耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端16、下图为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AA和BB。据图分析错误的是（）

A.图中①过程通常用纤维素酶和果胶酶处理，目的是获得原生质层B.过程②中关键环节是原生质体的融合，可用灭活的病毒诱导C.经过②和③过程形成的c细胞的染色体组不一定为AABBD.该技术流程的目的是获得杂种植株，优点是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)17、在课题1中，我们学习了稀释涂布平板法。这一方法常用来统计样品中_________________的数目。当样品的稀释度足够高时，____________________。18、基因进入受体细胞的______——“分子运输车”19、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。20、第一步：______21、在___________条件下，DNA与___________反应呈现______________，因此_____________可以作为鉴定DNA的试剂。22、注意：a生理基础：______，______

b植物细胞融合前需用______和______除去细胞壁23、第四步：_____24、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共1题，共9分)25、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共6分)26、炭疽；是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，也是我国规定的乙类传染病。回答下列有关问题：

(1)人通常是通过接触患炭疽的动物或动物制品被感染，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板可能是_____。A．B．C．D．(2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。

①该实验的目的是_____。

②对照组试管中应加入_____，实验过程中为避免杂菌污染进行的操作包括_____（至少写出两点）。

③实验结果为_____时；表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。

④实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是_____，振荡培养的目的是_____。液体培养基变浑浊的原因是_____。

(3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用10-4、10-5、10-6三个稀释度的菌液，各取0．2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。稀释度10-410-510-6平板编号A1A2A3B1B2B3C1C2C3菌落数31529830245535112911

由表可知，最适合计数的稀释度为_____，原因是_____。27、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。28、已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性；二室(M)对多室(m)为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。育种工作者利用红果多室(Yymm)番茄植株，采用不同的方法进行了四组实验。请据图回答问题：

(1)以上四种育种实验都主要应用了________的原理，培育中发生了脱分化的过程有________。

(2)用番茄植株的花粉随机进行有关实验，得到幼苗B直接移栽，发育成的番茄植株的基因型和表型分别是________、________，如果植物体C仅是花粉两两随机融合得到的，则植物体C的基因型及其比例是____________。

(3)图中________大部分细胞中染色体数量最少，要保证植物体B可以用于生产，培育中④过程可使用__________________处理幼苗。

(4)图中植物体________少数细胞中染色体数量最多，培育该植物体的过程称为________育种法，植物体D能表现出两个亲本的一些性状，根本原因是___________________________________________。

(5)植物体A只表现红果多室，原因是_______________________________。评卷人得分六、综合题(共3题，共9分)29、研究发现；新冠病毒外壳中的S蛋白具有很强的抗原性，可利用其制备单克隆抗体，制备流程设计如图1所示，相关限制酶及其识别序列如表所示，请分析回答问题：

。限制酶。

识别序列和切割位点。

EcoRⅡ

C↓AATTC

BsuRI

C↓CATCC

Bg1Ⅱ

A↓CATGT

SatⅠ

G↓TCCAC

（1）人体内，分泌抗体的细胞可来自于________细胞的增殖分化。

（2）根据病毒的结构，图中①过程常用___________酶处理，完成②过程需要的酶是___________，过程③构建病毒的基因组文库时，需要______________________酶。

（3）检测④过程是否获得成功的方法是______________________，⑥过程常用的方法是___________。

（4）利用PCR技术扩增无限增殖调控基因时，科研大员设计了如图2一对引物（部分序列），其中下划线部分序列的设计依据是______________________，方框部分序列的设计目的是__________________________________________________________________。

（5）抗体可变区氨基酸的组成和排列顺序可随抗体结合抗原的特异性不同而有较大的变异，由于可变区中氨基酸的种类以及排列顺序千变万化，故可形成许多种具有不同结合抗原特异性的抗体。为克服鼠源性单抗输入人体后产生的免疫排斥反应，科研人员通过人工改造鼠源性单抗获得了嵌合抗体。分析图3，你认为最符合临床要求的嵌合抗体是A～D中的________________。嵌合抗体的研制属于________________这一科技范畴。

30、阅读下列《抗A；抗B血型定型试剂（单克隆抗体）说明书》部分内容；请据此回答问题：

抗A；抗B血型定型试剂（单克隆抗体说明书）

（组成与性状）本品系用产生抗A；抗B抗体的杂交瘤细胞培育的上清液配置而成；专供鉴定人ABO血型用。

（使用方法）将本品与受检红细胞盐水混合；按照有无凝集判定结果。抗A试剂能和A型血；AB型血凝集，抗B试剂能和B型血、AB型血凝集（略）

（注意事项）（略）

（保存及年限）有效期一年；保存于2℃-8℃。

（1）该定型试剂（单克隆抗体）可通过细胞工程的________技术制备的。

（2）制备过程中，首先要提取人的________的红细胞多次注射注射到实验动物体内。

（3）一段时间后，用从实验动物体内提取特定的B淋巴细胞，诱导其与骨髓瘤细胞融合。先用特定的培养基筛选出________，再通过________培养和抗体检测；才能获得用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞。

（4）如果某人的血液与抗A血型定型试剂和抗B血型定型试剂都不发生凝集反应，则此人的血型是________型。

（5）该试剂的保存温度条件苛刻，主要是避免________。31、青蒿素是最有效的抗疟疾药物，但野生黄花蒿青蒿素产量低，为缓解青蒿素供应不足的状况，科学家将tms基因和tmr基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织；改造过程用到的部分结构如图。

（1）科学家将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞的常用方法是_____________________。

（2）图中结构P、T是基因成功转录的保证，其中结构P的作用是____________________。为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来，图中还缺少的结构是___________。

（3）在获得转基因的冠瘿组织过程中，__________________________是核心步骤，在具体操作中常常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因和运载体的两端分别进行切割，这样做的好处是______________________________________________。

（4）T-DNA的作用是可以使目的基因进入植物细胞，并插入到植物细胞中染色体的DNA上，要检测目的基因是否插入到冠瘿组织细胞的染色体DNA上，可采用________技术。

（5）与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快，原因可能是________________________________。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、D【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌；病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

①人类从来没有接触过这种病菌；可以让大批被感染者突然发病，①正确；

②由于从来没有接触过这种病菌；故该病无药可医，②正确；

③生物武器使用时不易控制；使用不当可危害本方安全，故施放国的人也会感染，③错误，D正确。

故选D。2、D【分析】【分析】

1；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液；以清除代谢废物。

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质。

（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。

【详解】

A；图中1称为內细胞团；可发育成胚盘等多种细胞，A错误；

B；图中2称为囊胚腔；B错误；

C；图中3为滋养层细胞；将来发成胎盘或胎膜，C错误；

D；图中1和3细胞都来自同一个受精卵细胞分裂和分化；D正确。

故选D。3、C【分析】【分析】

培养基的概念及营养构成。

（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出的供其生长繁殖的营养基质。

（2）营养构成：各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。

【详解】

A；细菌的数目可以用滤膜法来测定；将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，在该培养基上大肠杆菌的菌落呈黑色，可以根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目，以此来检验自来水中大肠杆菌数是否超标，A正确；

B；检测同种水样中细菌的数量时；设置空白培养基的目的是检验培养基制备是否合格，B正确；

C；培养基不一定都含有碳源；氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源，分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，C错误；

D；对于经常使用的菌种可采用试管固体斜面临时保存；该方法保存的菌种易被污染或产生变异，不适宜长期保存，D正确。

故选C。

【点睛】4、C【分析】【分析】

诱导细胞融合的方法有：物理法；化学法、生物法。其中物理法包括离心、振动和电刺激；化学法中的诱导剂一般为聚乙二醇（PEG），生物法中一般用灭活的病毒。

【详解】

灭活的病毒已失去感染活性；对各种动物细胞不造成破坏，但它所保留的融合活性，可使不同动物细胞进行融合，故在骨髓瘤细胞与效应B细胞融合过程中，灭活病毒起了诱导细胞融合的作用，C正确，ABD错误。

故选C。

【点睛】5、D【分析】【分析】

1；鉴别纤维素分解菌时需要在鉴定培养基中添加刚果红染色剂；纤维素被分解后，无法形成刚果红-纤维素复合物，培养基会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

2；硝化细菌是一种好氧细菌。

【详解】

A；鉴别纤维素分解菌时需要在鉴定培养基中加入刚果红染色剂；而不是酚红试剂，A错误；

B；硝化细菌是一种好氧细菌；需要生活在氧气充足的环境，而在漆黑的海底氧气缺乏，因此在漆黑的海底现场获取的木材样品中不会含有大量能够进行化能合成作用的硝化细菌菌群，B错误；

C；细菌菌群生长、繁殖所需的碳源和氮源不是全部来自于海底沉积物；氮源还可来自水中溶解的无机盐如硝酸盐等，C错误；

D；用血细胞计数板对尿素分解菌进行计数时；若先将培养液加入计数池，后盖盖玻片，可导致培养液体积大于计数室的实际体积，导致结果偏大，D正确。

故选D。6、D【分析】【分析】

试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；“设计试管婴儿”的目的是用于治疗某些疾病；需在②胚胎移植前进行遗传学诊断，A正确；

B；“试管婴儿”和“设计试管婴儿”均涉及精卵细胞在体外受精；所以均属有性生殖，B正确；

C；“设计试管婴儿”也是利用体外授精和胚胎移植的方法；培育新生命，属于有性生殖，不属于克隆，C正确；

D；只要供者和受者的主要HLA有一半以上相同；即可进行器官移植，因此该女婴造血干细胞也能挽救其他贫血病患者，D错误。

故选D。7、D【分析】【分析】

菌落是指由一个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度；形成肉眼可见的子细胞群落。菌落形态包括菌落的大小；形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等，每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征。不同种或同种在不同的培养条件下，菌落特征是不同的．这些特征对菌种识别、鉴定有一定意义。

【详解】

A；甲图的培养皿为对照组；乙图的培养皿为实验组，A正确；

B；在发病的土壤取样；才能分离得到苹果树腐烂病菌和放线菌，B正确；

C；培养基应含有微生物生长发育所需的水、碳源、氮源和无机盐等营养物质；C正确；

D；放线菌的抑菌圈直径越大；表明其拮抗苹果树腐烂病的能力越强，D错误。

故选D。8、D【分析】【分析】

植物体细胞杂交：来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术）；把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。

【详解】

A；PEG诱导原生质体融合的关键是细胞膜的融合；其结构基础是细胞膜具有一定的流动性，A正确；

B；植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶；因此体细胞杂交前需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，B正确；

C；马铃薯细胞与番茄细胞完成融合的标志是杂种细胞再生出细胞壁；C正确；

D；诱导植物细胞融合的方法有物理法和化学法；灭活的病毒用于动物细胞融合，D错误。

故选D。二、多选题(共8题，共16分)9、A:B【分析】【分析】

分析图解：异种克隆大熊猫的培育首先通过核移植技术获得重组细胞；然后经过早期胚胎培养获得异种重构囊胚，再利用胚胎移植技术将重构囊胚移植如代孕兔体内。

【详解】

A；科学家通过对母兔注射促性腺激素；进行超数排卵处理以获得更多的卵母细胞，A错误；

B；异种重构囊胚在体外培养时；往往需要在培养液中加入抗生素，从而保证无毒无菌环境，B错误；

C；囊胚由滋养层细胞和内细胞团构成；其中滋养层细胞将来发育为胎盘和胎膜，内细胞团将来发育成胚胎的各种组织，C正确；

D；目前；异种重构囊胚在代孕兔的子宫内能正常着床，但是不能正常发育生产出大熊猫幼仔，很可能是代孕兔提供的营养物质不能让异种重构囊胚正常发育，D正确。

故选AB。

【点睛】10、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是单细胞的真核生物；属于真菌，代谢类型是兼性厌氧型。在氧气充足时，酵母菌进行有氧呼吸，将葡萄糖分解为二氧化碳和水；在无氧条件下，进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。

【详解】

A；利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒时；酵母菌进行无氧呼吸，葡萄糖在酵母菌细胞质基质内被分解成丙酮酸，A错误；

B；酵母菌繁殖需要空气；在完全隔绝空气的情况下，酵母菌繁殖几代就停止了，要维持酵母菌长时间发酵，必须供给一定的氧气，故制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖，B正确；

C、酵母菌发酵的后期，由于产生的CO2和其他代谢产物的积累；发酵液呈酸性，C错误；

D；酵母菌发酵产生的酒精会对酵母菌的生长产生抑制作用；D错误。

故选ACD。11、B:C:D【分析】【分析】

1；干细胞的概念：动物和人体内保留着少量具有分裂和分化能力的细胞。

2；干细胞的分类：（1）全能干细胞：具有形成完整个体的分化潜能；（2）多能干细胞：具有分化出多种细胞组织的潜能；（3）专能干细胞：只能向一种或两种密切相关的细胞类型分化。如神经干细胞可分化为各类神经细胞；造血干细胞可分化为红细胞、白细胞等各类血细胞。

3；胚胎干细胞的主要用途是：（1）可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；（2）是在体外条件下研究细胞分化的理想材料；在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段；（3）可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、少年糖尿病等；（4）利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性，移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能；（5）随着组织工程技术的发展，通过ES细胞体外诱导分化，定向培育出人造组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；由题图知；应用该技术可以缓解器官移植时器官供应不足的问题，A正确；

B；iPS细胞导入了外源基因；其遗传信息与肌肉细胞不同，B错误；

C；关键基因表达形成iPS细胞；没有使细胞功能趋向专门化，C错误；

D；过程①②③表示细胞分化；其实质是基因的选择性表达，没有体现iPS细胞的全能性，D错误。

故选BCD。12、A:B:C:D【分析】【分析】

植物组织培养：1；过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化产生胚状体，最好发育成植株（新植体）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；应用：植物繁殖的新途径（快速繁殖优良品种、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种和突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；用于培养的植物细胞必须具有完整的细胞核；以保证有全套的遗传信息，因此植物体体内具完整细胞结构的活细胞均可作为组织培养的外植体，A正确；

B；脱分化过程和再分化过程所需的培养基中生长素与细胞分裂素的比例应不同；如生长素与细胞分裂素用量比值适中时，促进愈伤组织的形成；生长素与细胞分裂素用量比值低时，有利于芽的形成；生长素与细胞分裂素用量比值高时，有利于根的形成，B正确；

C；单倍体育种和转基因植物的培育都要经历细胞到植株的过程；因此都需要用到植物组织培养技术，C正确；

D；利用某些细胞能产生特定的产物；通过组织培养使细胞数量增加，进而增加产量，实现工厂化生产，D正确。

故选ABCD。

【点睛】13、C:D【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁，从而确定原生质体融合是否完成。植物体细胞杂交的意义：在克服远源杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的；采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；

B；要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体；需要采用酶解法（纤维素酶、果胶酶），诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（PEG等试剂）或物理法（电刺激等），B正确；

C；驱蚊草培育过程不同于植物组织培养；但需要采用植物组织培养技术，因此有细胞脱分化和再分化的过程，C错误；

D；驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术；育种原理是染色体数目变异，D错误。

故选CD。14、A:C:D【分析】【分析】

诱导植物细胞原生质体融合物理方法包括离心；振动、电激；化学方法用聚乙二醇，诱导动物细胞融合除了以上物理化学方法可用生物方法，即灭活的病毒。

在HAT培养基中；氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂阻断DNA合成的主途径，未融合的瘤细胞；融合的瘤细胞--瘤细胞不能合成次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，合成DNA的S途径也不能进行，所以最终死亡。

HAT培养基中筛选出的杂交瘤细胞；经选择性培养在适宜条件下可无限增值，然后进行单克降抗体检测，筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；HAT培养基中含叶酸拮抗剂；其中不能进行D途径，A错误；

B；杂交瘤细胞为瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞；既具备增殖能力，又可在HAT培养基中进行S途径，B正确；

C；最终筛选出来的可能有多种杂交瘤细胞；分泌的可能不是同一种特异性抗体，还需进行进一步筛选，C错误；

D；仅考虑细胞的两两融合；在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，会有融合的B淋巴细胞—瘤细胞、融合的B淋巴细胞—B淋巴细胞、融合的瘤细胞—瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、未融合的瘤细胞等多种形式的细胞，这几种形式的细胞均可进行D途径，D错误。

故选ACD。15、A:C:D【分析】【分析】

PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增。

【详解】

A；基因扩增中引物通常是一小段DNA或RNA片段；每一次循环后DNA分子数量增加一倍，从理论上推测，第二轮后只有一个DNA片段只有引物B，含引物A的比例为3/4，A正确；

B；引物A和引物B均不在该片段的端点；因此第一轮循环后，得到的两DNA片段中两条脱氧核苷酸链都不等长，通过绘图可推知，第二轮中也不会出现等长的引物，所以在第二轮循环产物中不会出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，B错误；

C；引物A和引物B必须与目的基因配对；如果引物之间或引物自身发生碱基互补配对，则不能扩增目的基因，C正确；

D；由于复制过程子链的合成方向是从子链的5’端向3’端延伸；所以耐热的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3’端，D正确。

故选ACD。16、A:B【分析】【分析】

植物体细胞杂交的过程：

其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。植物体细胞杂交技术可以可以克服远缘杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；植物细胞壁主要成分是纤维素和果胶；因此①过程通常用纤维素酶和果胶酶处理除去细胞壁获得原生质体，不是原生质层，A错误；

B；过程②表示诱导原生质体融合；常使用聚乙二醇作为诱导剂，B错误；

C；经过②和③过程形成的c细胞的染色体组不一定为AABB；也有可能为AAAA或BBBB，C正确；

D；两个物种具有生殖隔离；不能杂交产生可育后代，通过植物体细胞杂交技术可以打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，D正确。

故选AB。三、填空题(共8题，共16分)17、略

【解析】①.活菌②.培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】载体19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的获取21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】沸水浴二苯胺蓝色二苯胺22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞膜流动性植物细胞全能性纤维素酶果胶酶23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的检测和鉴定24、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共1题，共9分)25、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。五、实验题(共3题，共6分)26、略

【分析】【分析】

1；稀释涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液；尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

【详解】

（1）A；B、C中的菌落分布较均匀；是通过稀释涂布平板法获得的，而D是通过平板划线法获得的，划线平板法是从上一次划线的末端开始划线。故选ABC。

（2）①从整个实验过程可以看出；实验通过对皮肤渗出物稀释培养形成的菌落进行扩大培养后，利用噬菌体的作用检测其中是否含有炭疽芽孢杆菌。②对照组中加入的液体不应含有噬菌体，因此应加入等量的生理盐水；在进行微生物培养时为防止杂菌的混入，消毒和灭菌工作是关键，主要包括对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触等。③若实验组液体培养基的浑浊度低于对照组，说明实验组中的炭疽芽孢杆菌被噬菌体侵染与破坏，即该疑似患者感染了炭疽芽孢杆菌。④炭疽芽孢杆菌属于细菌，能寄生在人和动物体内，说明它是异养型生物，培养时需要借助摇床振荡培养，说明它是需氧型生物；振荡培养的目的是增加培养液中的氧气含量，使细菌与营养物质充分接触，有利于炭疽芽孢杆菌的大量繁殖；培养液变浑浊表明炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

（3）分析表中数据可知，只有稀释度为10-5时菌落数在30~300之间，适合用于计数。【解析】(1)ABC

(2)检验皮肤炭疽病疑似患者的皮肤渗出物中是否含有炭疽芽孢杆菌与实验组等量的生理盐水对操作的空间；操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；实验操作在酒精灯火焰附近进行；操作过程中避免已经灭菌的材料用具与周围物品相接触实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（异养）需氧型增加培养液中的氧气含量；使细菌与营养物质充分接触炭疽芽孢杆菌大量繁殖。

(3)10-5稀释度为10-5时菌落数在30~300之间27、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。第5组，NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针；NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。

②假设NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离，故增大或缩小B1和B2两者之间的距离都会降低CYP3A基因的启动子的活性。【解析】(1)次级自由扩散。

(2)等量的T-2毒素缺失两个调控序列或其中任一个；T-2毒素都不能诱导启动子活性增强。

(3)结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针、NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离。28、略

【分析】【分析】

分析题图：①⑤⑥为植物组织培养；③为花粉离体培养；幼苗B为单倍体，若过程④使用秋水仙素处理幼苗B，则植物体B为可育的纯合植株。

【详解】

（1）由图可知；图中的四种育种方法都利用了离体的植物细胞进行育种，运用了植物细胞具有全能性的原理，离体植物细胞的培育都必须运用植物组织培养技术，该过程中会发生脱分化，即①③⑤⑥。

（2）红果多室(Yymm)番茄植株的花粉基因型及比例是Ym：ym＝1：1；故花粉苗直接发育成的番茄幼苗B的基因型是Ym或ym，但其为单倍体，高度不育，故表型为无果实；而植物体C仅是花粉两两随机融合得到的，基因型及其比例是YYmm：Yymm：yymm＝1：2：1。

（3）育种过程中染色体数量最少的是由减数分裂产生的花粉及幼苗B；植物体B中只有一个染色体组；高度不育，可以使用一定浓度的秋水仙素或适当低温处理使之成为二倍体，以用于生产。

（4）植物体D是由番茄体细胞和马铃薯体细胞融合培育而来的；其染色体数量是两个物种亲本的染色体数量之和，有丝分裂中少数细胞中的染色体数量暂时加倍，染色体数量最多；植物体D具有两个亲本的遗传物质，故能表现出两个亲本的一些性状。

（5）植物体A的形成过程中没发生减数分裂，只进行了有丝分裂，没有基因重组，没发生基因突变，故完全表现亲本红果多室的性状。【解析】(1)植物细胞全能性①③⑤⑥

(2)Ym或ym无果YYmm∶Yymm∶yymm＝1∶2∶1

(3)花粉和幼苗B一定浓度的秋水仙素或适当低温。

(4)D植物体细胞杂交具有两个亲本的遗传物质。

(5)该培育过程中只进行了有丝分裂，且没发生基因突变，完全保持了亲本的遗传性状六、综合题(共3题，共9分)29、略

【分析】【分析】

1；图1表示制备新冠病毒外壳中的S蛋白单克隆抗体流程；其中①表示获取新冠病毒的RNA，②表示逆转录得到DNA，③表示用大肠杆菌构建新冠病毒的基因组文库，④表示翻译得到新冠病毒的S蛋白，⑤表示获取无限增殖调控基因的表达载体，⑥表示把含有无限增殖的调控基因的基因表达载体导入细胞X中；表格表示了不同限制酶的识别序列和切割位点。

2；图2表示利用PCR技术扩增无限增殖调控基因时；设计的一对引物（部分序列），下划线部分序列的设计依据是介导序列两端的部分DNA序列。

3；图3表示通过人工改造鼠源性单抗获得的嵌合抗体；人-鼠嵌合抗体：利用DNA重组技术将鼠源单抗的轻链、重链可变区插入含有人抗体恒定区的表达载体中，转化哺乳动物细胞进行表达所产生的单克隆抗体。人-鼠嵌合抗体的人源化程度可达到70%，完整的保留了鼠源单抗的可变区及亲本活性，人抗体恒定区的引入则降低了免疫排斥反应。

【详解】

（1）人体分泌抗体的细胞是浆细胞；浆细胞可来自于B淋巴细胞或记忆B细胞的增殖分化。

（2）病毒只有蛋白质和核酸构成；故步骤①为获取新冠病毒的RNA，可用蛋白酶处理病毒，使病毒的蛋白质分解，最终可分离出病毒的RNA；②过程以RNA为模板，合成DNA，是逆转录过程，需要的酶是逆转录酶；构建基因组文库需要限制酶切割获取一定大小范围的DNA，再使用DNA连接酶将其与运载体连接。

（3）④表示翻译得到新冠病毒的S蛋白；对于蛋白质产物的检测，常采用抗原--抗体杂交技术进行检测：若出现杂交带，则证明成功；⑥过程是把含有无限增殖的调控基因的基因表达载体导入细胞X中（动物细胞），常用的方法是显微注射技术。

（4）引物是根据已知核苷酸序列设计的；且一对引物应分别从两端开始，因此其中下划线部分序列的设计依据是介导序列两端的部分DNA序列；据表可知，GAATTC是限制酶EcoRⅠ的识别序列，而GGATCC是限制酶BamHⅠ的识别序列，因此方框部分序列的设计目的是使扩增出的介导序列两端含有限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列，便于酶切。

（5）结合题意可知；为克服鼠源性单抗输入人体后产生的免疫排斥反应，人-鼠嵌合抗体应保留鼠源单抗的可变区和人抗体恒定区的抗体结构，因此符合条件的是D；蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求，嵌合抗体的研制属于蛋白质工程。

【点睛】