2025年北师大版选择性必修三生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年北师大版选择性必修三生物下册月考试卷681考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。有关叙述不正确的是（）A.“中中”和“华华”的获得涉及核移植和胚胎培养的过程B.克隆猴体细胞中的遗传物质与核供体的遗传物质完全相同C.以雌性和雄性个体细胞作为核供体，得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目相同D.以雌性和雄性个体细胞作为核供体，得到的两个克隆动物体细胞的性染色体组合不同2、利用乳腺生物反应器生产药用蛋白是动物基因工程的重要应用，目前科学家已在牛和山羊等动物乳腺生物反应器中获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α-抗胰蛋白酶等医药产品。下列有关乳腺生物反应器的叙述错误的是（）A.受体细胞可选用受精卵或早期胚胎的桑椹胚细胞B.获得转基因动物需利用胚胎移植技术C.鉴别药用蛋白基因是否导入受体细胞一般利用DNA分子杂交法D.转基因动物产生的生殖细胞可能含有药用蛋白基因3、如图为胚胎发育过程中的某一时期示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团B.该时期称为桑椹胚期，已经发生细胞分化C.进行胚胎分割时，可以选择图示时期的胚胎进行D.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化4、下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（）A.随NaCl溶液浓度增大，DNA的溶解度逐渐增大B.新鲜的猪血中不含DNA，新鲜的鸡血中含DNAC.在酒精溶液中，某些蛋白质的溶解度大于DNA的溶解度D.在50～60℃水浴中，DNA遇二苯胺试剂后即呈蓝色5、高等哺乳动物受精后不久；受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚；囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程。下图为该过程中的某一时期示意图。下列有关叙述不正确的是（）

A.图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团B.高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化D.②将来发育成胎儿的各种组织，③将来发育成胎盘和胎膜6、下图表示利用葡萄汁进行发酵时可能发生的物质变化。下列有关叙述正确的是（）

A.图中需要O2参与的过程只有③⑤B.当氧气、糖源都充足时，醋酸菌可以直接发生过程⑤C.过程②④所需要的最适温度相同D.酵母菌发生过程①②的场所不同评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、下图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径；下列有关叙述正确的是（）

A.获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因B.奶牛2体内不同组织细胞的基因组成一定相同C.成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养8、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物，中华鲟是一种濒危野生动物。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是（）A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现C.改造后的中华鲟和现有中华鲟不再是同一物种D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质9、厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质，易腐烂变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是（）

A.巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源，圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源B.要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法C.将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为3．9×105D.处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为1：110、苯丙酮尿症是一种严重的单基因遗传病。图1是某患者的家族系谱图，其中部分成员Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1和Ⅱ2的DNA经限制酶MspⅠ酶切，产生不同的片段，经电泳后与相应探针杂交结果见图2.下列分析正确的是（）

A.个体Ⅱ1是杂合体的概率为2/3B.个体Ⅱ2与一杂合体婚配生患病孩子的概率为0C.个体Ⅱ3是隐性纯合体，有19kb探针杂交条带D.个体Ⅱ4可能为杂合体，有2个探针杂交条带11、人群中有部分人体内缺乏乳糖分解酶,饮用鲜牛奶后会导致肠胃不适；消化不良。“低乳糖奶牛”的诞生,有望给患有“乳糖不耐症”的人群提供“放心奶”。如图是“低乳糖奶牛”的培育过程,相关叙述不正确的是（）

A.犊牛的性状和黑白花奶牛的性状完全一致B.卵母细胞需在体外培养到MⅡ期然后用离心法去核C.犊牛的出生体现了动物细胞核的全能性D.体细胞核移植技术可用于人类组织器官的移植和保护濒危动物12、利用胶体金检测技术检测抗原最常用的是双抗夹心法。双抗夹心法需要准备待测抗原的配对抗体；一个抗体用胶体金标记（即胶体金标记抗体）并固定在结合垫上，另一个抗体固定在NC膜的检测线（T线）上。另外，还需要准备能与金标抗体特异性结合的二抗并固定于NC膜的控制线（C线）上，如图所示。下列说法错误的是（）

A.样品中含有待测抗原时，T线和C线均会显色B.图中的抗体都需要与抗原结合C.结合垫是为了固定金标抗体D.若T线不显色说明检测结果无效13、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶14、CRISPR/Cas9系统基因编辑是一种对靶向基因进行特定DNA修饰的技术；其原理是由一个向导RNA(sgRNA)分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割。受此机制启发，科学家们通过设计sgRNA中碱基的识别序列，即可人为选择DNA上的任一目标位点进行切割（如图所示）。CRISPR/Cas9系统基因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成脱靶。下列相关错误的是（）

A.Cas9蛋白通过破坏目标DNA的氢键实现对DNA的切割，与解旋酶的作用类似B.若脱靶率与sgRNA序列的长度有关，则sgRNA的序列越短脱靶率越高C.利用此技术对目标基因部分DNA片段进行切除可能导致染色体变异D.sgRNA的双链区域的碱基互补配对原则与目标基因的双链区域不同15、免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述正确的是（）

A.图示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象C.电泳检测结果只能判断阳性与否，无法判断牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗体反应通过PCR技术间接扩增放大，从而达到可检测的水平评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)16、哺乳动物核移植可以分为______核移植（比较容易）和______核移植（比较难）。17、20世纪70年代以后；以基因工程为代表的一大批生物技术成果，进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，但是与其他高新技术一样，生物技术也同样具有双刃剑效应。如同其他高新技术一样，转基因成果和转基因技术也需要你的理性看待。在转基因生物安全方面；

（1）你认为转基因生物有哪些优点，①____________②___________③__________。

（2）你认为转基因生物有哪些缺点，①____________②___________③__________。

（3）你对于转基因生物的态度是__________。18、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合______键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。19、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。20、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。21、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。22、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、实验题(共2题，共20分)23、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。

(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变，转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子，最终导致合成的IDUA酶分子量___________；与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性，积累过多的黏多糖无法及时清除，造成人体多系统功能障碍。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构、功能相同，但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中，加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________；从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸；为比较它们的通读效果，科研人员进行了相关研究，实验结果如图。

注：“-”代表未加入。

据图分析，实验组将___________基因导入受体细胞，并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析，携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗，检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量，与不治疗的小鼠相比较，实验结果为_____________，表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。24、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。下图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物______，设计引物的目的是______。

(2)为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位点。

(3)③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是______，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加_______的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加______的培养基（B）上培养，收集_______菌落进一步纯化后将菌体破碎处理；筛选得到SSB蛋白。

(4)将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液_______。评卷人得分五、综合题(共3题，共6分)25、α1一抗胰蛋白酶（α1-AT）是下呼吸道中最主要的蛋白酶抑制剂，其在血清中含量越低，肺气肿越易发生。α1-AT补充治疗不仅是先天性α1-AT缺乏症的主要治疗方法，而且也为其他炎症性肺疾病的治疗开辟了新的途径。我国科研人员通过基因工程的方法生产α1-AT并用于临床，下图是科研人员选用的载体（图中bp表示碱基对，α1-AT基因为1182bp）。回答下列问题。

注：质粒除图示部位外以及目的基因内部和外部均无XbaI；SacI、HindIII三种限制酶的识别位点。

(1)基因表达载体的作用是____________（答出2点即可）。质粒中与该作用相关的结构除图中所示外，还有_____。

(2)科研人员在构建基因表达载体时选用的限制酶是XbaI和HindIII，操作成功后的基因表达载体长_____bp。没有选择限制酶XbaI和SacI的理由是_____。

(3)从人体获得α1-AT基因后，通过PCR技术快速扩增。PCR反应需在一定的缓冲溶液中才能进行，理由是_____。在引物设计上，科研人员在两种引物上分别添加了限制XbaI、HindIII的序列，理由是_____，添加位置应位于引物的_____（填“5'”或“3'”）端。26、非人灵长类与人类具有较高的相似性；是用来开展人类发育生理学和疾病治疗研究的理想生物医学模型。非人灵长类，如恒河猴胚胎工程技术的发展和应用对拓展非人灵长类动物模型的应用前景具有重要价值。回答下列相关问题：

(1)从雌性恒河猴体内采集卵母细胞前，需要连续6d对母体注射__________，其目的是___________。一般将收集到的卵母细胞置于含10%胎牛血清的成熟培养基中，该培养基中的CO2/NaHCO3可以起到__________作用。

(2)收集到的运动性能良好的恒河猴精子__________（填“能”或“不能”）与采集到的卵母细胞直接完成体外受精，原因是__________。

(3)目前获得恒河猴胚胎的途径有三种。一是体外受精，将精子与卵子共培养后，4~24h后如果观察到__________则判断受精成功；二是利用显微操作仪辅助精子进入成熟的卵母细胞中完成精卵结合，该操作方法叫作__________；三是通过腹部切口冲洗输卵管或子宫来收集胚胎，该步骤叫作____________。以上方法获得的胚胎均要移植进受体子宫内才能继续发育，胚胎移植后其能存活的生理基础是__________。

(4)科研人员通过将携带绿色荧光蛋白（ECFP）基因的人免疫缺陷病毒载体注入恒河猴胚胎囊胚腔，从而实现了对非人灵长类动物的基因修饰。上述操作程序中最关键的步骤是__________（写具体）。27、米酒；旧时叫“醴”，其酿制工艺简单，口味香甜醇美。下图表示发酵过程中的代谢途径。回答下列问题：

(1)制作时用糯米酿制，需要等煮熟的糯米温度降低后再拌上酒曲（酵母菌）进行发酵，这是为了防止________________________________。在家中用陶土罐酿制米酒时，不需要进行严格的灭菌处理，这是因为_________________________________。

(2)陶土罐中要预留部分空间，一方面通过①②过程可以___________________________，另一方面是为了避免_____________________________。

(3)制作成功的米酒若暴露在空气中，酒味会逐渐消失而出现醋酸味，此时发挥作用的微生物是________。此现象在_________（填“冬季”或“夏季”）更易发生，其原因是_________________________________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、B【分析】【分析】

1；动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。克隆动物的细胞核来自供体，其染色体和供体的一致。

2；获取克隆猴过程：将供体细胞核移入去除核的卵母细胞中；诱导融合成重组细胞，诱导发育形成早期胚胎，将早期胚胎移入代孕母猴子宫中继续发育，获得克隆猴。

【详解】

A；动物克隆过程涉及到核移植技术、早期胚胎培养技术以及胚胎移植技术；A正确；

B；克隆猴的核遗传物质由核供体细胞提供；但细胞质中的遗传物质由去核卵母细胞提供，故克隆猴体细胞中的遗传物质与核供体的遗传物质大部分相同，B错误；

C；哺乳动物雌雄个体的体细胞中；细胞核内常染色体的数目是相同的，性染色体组合是不同的，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，则得到的克隆动物的体细胞中常染色体的数目相同，C正确；

D；哺乳动物雌雄个体的体细胞中；细胞核内常染色体的数目是相同的，性染色体组合是不同的，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，则得到的两个克隆动物体细胞的性染色体组合不同，D正确。

故选B。

【点睛】

本题考查动物细胞的核移植技术等相关内容，意在考查学生识记和理解能力，难度不大。2、A【分析】【分析】

利用乳腺生物反应器生产药用蛋白；是使目的基因在乳腺细胞中特异性表达，从乳汁中分离；提纯，获得所需要的药物蛋白。

【详解】

A；受精卵全能性易于表达；培育转基因动物，应选择受精卵作为受体细胞，A错误；

B；目的基因导入受精卵；受精卵发育为早期胚胎，要移植入子宫继续发育，B正确；

C；检测目的基因是否成功插入受体细胞染色体DNA；可利用碱基互补配对的原理，用DNA分子杂交法，C正确；

D；转基因动物体细胞含有目的基因；故形成配子可能含目的基因，故D正确。

故选A。

【点睛】

本题考查基因工程相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。3、B【分析】【分析】

分析题图：图示为胚胎发育过程某一时期示意图；该时期为囊胚期，其中①为透明带；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。

【详解】

A；由以上分析可知；图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团，A正确；

B；据图分析；图示时期为囊胚时期，该时期细胞已经发生分化，B错误；

C；图示为囊胚期；进行胚胎分割时，应选择图示时期的胚胎或之前的桑椹胚进行，C正确；

D；①为透明带；囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化，D正确。

故选B。4、C【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：1；DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性；

2；DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA在氯化钠溶液中的溶解度；是随着氯化钠的浓度变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低，高于或低于该浓度，DNA的溶解度都会升高，A错误；

B；哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核和细胞器；没有DNA，但新鲜的猪血中含有血细胞和未成熟的红细胞，所以也含有DNA，B错误；

C；在酒精溶液中；某些蛋白质的溶解度大于DNA的溶解度，所以可以用酒精溶液对提取的DNA进行提纯，C正确；

D；二苯胺鉴定DNA分子时需要沸水浴加热；待试管冷却后才能观察到现象，D错误。

故选C。

【点睛】5、D【分析】【分析】

题图分析：图示表示囊胚期胚胎示意图；其中①为透明带，在囊胚期后期会破裂；②为滋养层，将来分化成胎盘和胎膜；③为内细胞团，将来分化形成各种组织。

【详解】

A；由分析可知；图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团，A正确；

B；图示为囊胚期；高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于该时期，终止于生命结束，B正确；

C；孵化是指胚胎（囊胚）从①透明带中伸展出来的过程；C正确；

D；图示为囊胚期；其中②滋养层将来发育成胎盘和胎膜，③内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，D错误。

故选D。

【点睛】6、B【分析】【分析】

1.果酒制作菌种是酵母菌；代谢类型是异养兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃，前期需氧，后期不需氧。

2.参与果醋制作的微生物是醋酸菌；属于原核细胞，适宜温度为30～35℃，需要持续通入氧气。其新陈代谢类型是异养需氧型。

果醋制作的原理：当氧气；糖源都充足时；醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

题图分析：图中过程①表示细胞呼吸的第一阶段；过程②表示无氧呼吸的第二阶段，过程③表示有氧呼吸的第二；三两个阶段，过程④表示果酒制作果醋的过程，过程⑤表示糖类和氧气充足的情况下产生醋酸的过程。

【详解】

A、过程③表示有氧呼吸的第二、三两个阶段，有氧呼吸第三阶段需要氧气参与，过程④⑤表示果醋产生的两个途径，醋酸菌进行的是有氧呼吸，因此③④⑤都需要O2参与；A错误；

B；当氧气、糖源都充足时；醋酸菌可以直接发生过程⑤，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，即过程④，B正确；

C；过程②为酵母菌发生的无氧呼吸过程；所需要的最适温度为18℃～25℃，过程④为醋酸菌发生的过程，所需要的最适温度为30℃～35℃，显然二者所需温度不同，C错误；

D；酵母菌是真核生物；图中过程①表示细胞呼吸的第一阶段，场所是细胞质基质，过程②表示无氧呼吸的第二阶段，场所是细胞质基质，因此酵母菌发生过程①②的场所相同，D错误。

故选B。二、多选题(共9题，共18分)7、A:D【分析】【分析】

分析题图：奶牛1的培育采用了基因工程技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛2的培育采用可基因工程技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；A正确；

B；奶牛2的培育过程中；在囊胚阶段注入了含有外源基因的受体细胞，因此其体内不同组织细胞的基因型可能不同，B错误；

C；奶牛3表明受体细胞的细胞核具有全能性；C错误；

D；结合分析可知；奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养，D正确。

故选AD。8、C:D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。

基本流程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【详解】

A；蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构；A正确；

B；因为基因指导蛋白质的合成；所以改造蛋白质可通过改变基因结构实现，B正确；

C；改造后的中华鲟具有新的性状；但其和现有中华鲟之间没有生殖隔离，仍是同一物种，C错误；

D；蛋白质工程改造的是基因；可以遗传给子代，因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白质，D错误。

故选CD。9、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接种的方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

【详解】

A；微生物的生长需要碳源、氮源、无机盐等物质；只是有些固氮菌由于能利用氮气作为氮源，不需要在培养基中添加氮源，A错误；

B；平板划线法不能用于计数；B错误；

C、将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C错误；

D；根据图示可知；两菌种的接种量比为1:1时比两菌种的接种量比为2:1时效果好，但由于该实验设置的两菌种的接种量比例的组数过少，所以无法判断处理该类厨余垃圾废液的两菌种的最佳接种量比，D错误。

故选ABCD。10、B:C:D【分析】苯丙酮尿症是一种严重的单基因遗传病，假设该病受一对等位基因A、a控制，分析图1，Ⅰ1、Ⅰ2都无病，但其女儿Ⅱ3却有病，所以该病为常染色体隐性遗传病，Ⅱ3基因型为aa，Ⅰ1和Ⅰ2的基因型都为Aa，再结合图2的酶切结果可知，Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1的基因型相同，因此Ⅱ1的基因型为Aa，Ⅱ2表现正常，且从酶切结果看，Ⅱ2与Ⅱ1基因型（Aa）不同，所以Ⅱ2的基因型为AA，由此可以推知，23kb探针杂交条带对应正常显性基因A，19kb探针杂交条带对应隐性基因a。

【详解】

A、由分析可知，个体Ⅱ1的基因型为Aa；杂合体的概率为1，A错误；

B、由分析可知，个体Ⅱ2的基因型为AA；与杂合体Aa婚配，生患病孩子aa的概率为0，B正确；

C、个体Ⅱ3是患者，是隐性纯合体，故有19kb探针杂交条带；C正确；

D、个体Ⅱ4是Ⅰ1（Aa）和Ⅰ2（Aa）所生的表现正常的后代；基因型可能是AA或Aa，若为杂合体就有2个探针杂交条带，D正确。

故选BCD。11、A:B【分析】分析题图：图示为“低乳糖奶牛”的培育过程；首先采用基因工程技术将“乳糖分解酶基因”导入受体细胞，再采用核移植技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术获得转基因克隆动物。

【详解】

A；犊牛的细胞核基因来自黑白花奶牛；但其细胞质基因来自卵母细胞，因此其性状与黑白花奶牛的性状不完全一致，A错误；

B；核移植的受体细胞一般选用MⅡ期卵母细胞；进行去核时，通过显微操作去除卵母细胞中的核，用微型吸管可一并吸出细胞核与第一极体，B错误；

C；犊牛的出生属于细胞核移植技术的应用；体现了动物细胞的细胞核具有全能性，C正确；

D；体细胞核移植技术可用于人类组织器官的移植和保护濒危动物；D正确。

故选AB。

【点睛】12、B:D【分析】【分析】

T线和C线处同时显示横杠；即阳性，若样品中不含病毒，样品经过结合垫时由于不存在病毒抗原，则不存在抗原抗体特异性结合，显色组分仍会随样品继续向前运动，由于不存在病毒抗原，抗体不能与待测抗原结合，故在T线不会显色。

【详解】

A；分析题图可知；若有抗原存在，T线上的抗体能够结合抗原（该抗体经过结合垫时已经与胶体金抗体结合），则T线显色，过量的胶体金抗体会移动到C线处与二抗结合，C线也会显色，故样品中含有待测抗原时，两条线均会显色，A正确；

B；题图中过量的胶体金抗体没有结合抗原；而是与二抗结合，B错误；

C；据题意可知；样本中含有某种抗原，就会首先被结合垫上的胶体金标记抗体结合，形成“抗原—金标抗体”复合物，所以结合垫中固定了金标抗体，C正确；

D；若T线不显色；说明样品中没有抗原，D错误。

故选BD。13、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。14、A:C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：①限制酶；能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；②DNA连接酶，连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键；③运载体，质粒是最常用的运载体，除此之外，还有λ噬菌体衍生物、动植物病毒。

2；基因治疗：把正常的基因导入病人体内有缺陷的细胞中；使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。基因治疗分为体外基因治疗和体内基因治疗两种类型。

【详解】

A；根据题干信息“由一个向导RNA（sgRNA）分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割”；再结合图解可知能够行使特异性识别DNA序列并切割特定位点功能的分子是向导RNA（sgRNA）分子和Cas9蛋白，其类似于基因工程中限制酶，作用的化学键是磷酸二酯键，A错误；

B；非基因编辑对象也可能含有与sgRNA配对的碱基序列；造成sgRNA选错对象与之错误结合而脱靶，sgRNA的序列长短影响成功率，序列越短，脱靶率越高，B正确；

C；染色体变异会引起基因的数目或排列顺序改变；利用此技术对目标基因部分DNA片段进行切除属于基因内部碱基对的改变，不改变基因的数目和排列顺序，故不属于染色体变异，C错误；

D；sgRNA的双链区域的碱基互补配对原则遵循的是DNA与RNA之间的配对关系；而目标基因的双链区域遵循的是DNA之间的配对方式，故两者不同，D正确。

故选AC。15、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一种抗原检测系统；将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会和固定抗体1；抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量，即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量。

【详解】

A；免疫PCR中所用的DNA不选用受检样品（牛乳）中可能存在的DNA。待检测的牛乳中可能含有牛乳腺细胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若图示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，经过PCR扩增后的产物中，不仅有抗体2上的DNA扩增产物，还可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的扩增产物，使检测结果偏大，A正确；

B；如果第三次冲洗不充分；可能使残留的、呈游离状态的抗体2上的DNA也作为PCR的模板参与扩增，会出现假阳性现象，B正确；

CD；微量抗原抗体反应；是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法。因此，PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关，抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，C错误，D正确。

故选ABD。三、填空题(共7题，共14分)16、略

【解析】①.胚胎细胞②.体细胞17、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人们的愿望；进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋子生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。

基因工程的原理是基因重组；其优点是打破了生殖隔离。但由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的结构；基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解得相当有限；再加上转移的基因虽然是功能已知的基因，但不少却是异种生物的基因；同时，由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此在转基因生物中，有时候会出现一些人们意想不到的后果。

【详解】

（1）转基因生物具有以下优点：

作物产量高；能解决粮食短缺问题；利用基因工程生产的抗虫作物能够减少农药使用，减少环境污染；利用基因工程培育的生长迅速；营养品丰富的生物，能增加食物营养，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能够生产稀缺的生化药物。

（2）转基因生物受限于科学发展水平；可能会产生以下问题：

转基因生物与同种生物杂交；可能产生重组病菌；重组病毒或超级杂草；导入转基因生物的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌或病毒杂交，从而重组出对人类或其他生物有害的病原体，可能使疾病的传播跨越物种障碍。

（3）转基因技术取得了巨大的成果；但科学技术是把双刃剑，面对转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，而不能因噎废食。

【点睛】

本题考查转基因生物的安全性问题，意在考查学生对转基因生物安全性问题的识记与理解。【解析】解决粮食短缺问题减少农药使用，减少环境污染增加食物营养，提高附加值能产生有毒蛋白或新过敏原可能产生重组病菌、重组病毒或超级杂草可能使疾病的传播跨越物种障碍趋利避害不能因噎废食18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸二酯19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖21、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。22、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、实验题(共2题，共20分)23、略

【分析】【分析】

基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换；增添和缺失；而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上，以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程，该过程还需要tRNA来运转氨基酸。

密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。

基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）由题干信息可知；黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后，转录出的mRNA长度不变，说明其没有发生碱基对的增添和缺失，因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变，因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现，导致翻译提前终止，肽链变短，IDUA酶分子量变小，空间结构改变而失活。

（2）由题干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）与普通tRNA的结构；功能相同，据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。

（3）本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果；需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰），同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA，因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶，可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测，即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知，与对照组（含正常IDUA基因的组）相比，含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多，说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上实验可知，携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读，进而产生具有正常功能的IDUA酶，因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比，治疗组小鼠的IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；同时，利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗，与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，则其细胞内都没有相应mRNA，因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用，最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。

(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。

(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高，组织黏多糖积累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异24、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作为受体细胞，其中以大肠杆菌应用最为广泛。研究人员一般先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞；使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。

【详解】

（1）利用RNA通过①过程（逆转录）获得cDNA需要逆转录酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。逆转录第一步以mRMA为模板合成DNA单链；新链与模板链反向平行，由于新链只能由5'端向3'端延伸，所以逆转录第一步的引物应与mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互补配对，即用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；设计引物的目的是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。

（2）对逆转录得到的cDNA扩增时；引物的5'端结合母链的3'端之后DNA聚合酶开始扩增DNA。为确保其与pET41a质粒定向连接，应使用不同种的限制酶切割质粒和目的基因，由图可知，使用EcoRI酶会破环SSB基因，故应在相应引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位点。

（3）由题图分析可知：质粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破坏了氯霉素抗性基因，所以成功组装的重组质粒不能在添加了氯霉素的培养基上生长，③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌；目的是使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后分别将处理后的大肠杆菌先接种在添加卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加氯霉素的培养基（B）上培养，收集能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，经筛选即可得到SSB蛋白。

（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，如果该蛋白有抗原性，会引起机体的免疫反应，产生相应抗体。则后续实验内容应为抽取小鼠血液提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。【解析】(1)逆转录用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物

使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素培养基上生长的。

(4)提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体五、综合题(共3题，共6分)25、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）基因表达载体的作用是：①使目的基因在受体细胞中能稳定存在；并且遗传给子代，②使目的基因能够表达；该作用的发挥需要复制原点。

（2）构建基因表达栽体时选用的限制酶是XbaI和HindIII，操作成功后的表达载体长13603-2246+1182=12539bp。若选择