小球藻的培养

一、小球藻小球藻是单细胞植物，种类较多，多数生活在淡水中，少数生活在海洋里。按植物学分类，小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物，其体型小，直径一般为3～5μm，在显微镜下，需要放大400～600倍才能看到，我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。小球藻所含的营养成分很高，其蛋白质含量达到50%～60%（相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍），含脂肪10%～30%，还含有多种维生素。小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高，这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。因此，小球藻的培养前景广阔。作为培养原料的小球藻，可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水，在显微镜下鉴定，然后再用。也可以向培养它的人索取。1容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等，大规模的培养可用水泥池。首先，要对所使用的容器进行消毒，一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡，再用水冲刷数次。(100mg/L的漂白粉水溶液的配制：①天平称量5g2%漂白粉澄清液；②定量转移至容量瓶中；③加水至1L；④混匀。2％漂白粉上清液的配制法：取漂白粉2克，加少量水搅匀，再加水至100毫升，充分调匀后，待澄清后取上清液使用。）2培养液的准备（1）BG11液体培养基配方：Stock1定容100mL柠檬酸0.3g柠檬酸铁胺0.3gEDTANa20.05gStock2定容1000mLNaNO330gK2HPO40.78gMgSO4·7H2O1.5gStock3定容100mLCaCl2·2H2O1.9gStock4定容100mLNa2CO32gStock5定容1000mLH3BO32.86gMnCl2·4H2O1.81gZnSO4·7H2O0.222gNa2MnO4·2H2O0.391gCuSO4·5H2O0.079gCo(NO3)2·6H2O0.049gStock1取用2mLStock2取用20mLStock3取用2mLStock4取用1mLStock5取用1mL总定容1000mL（2）购买2000元/套，九种原液各200ml（稀释1000倍），10瓶。培养基各取1ml。联系电话：153562722883藻种购买：淘宝轮虫小球藻套装。40元/一套4接种选取生活力强、生长旺盛的藻种，在天气晴朗的上午接种。一般情况下，作为第1级培养，可按藻液与培养液1∶2的比例进行接种。接种的量大，可使藻种迅速成为培养液中的优势种，利用生物间的拮抗作用，减少了污染机会，缩短了小球藻的培养时间。待扩大培养时，可按藻液与培养液1∶4的比例进行接种。5管理5.1搅拌由于小球藻不能游动，只能浮在水中生活，所以必须对培养液进行搅拌，让藻体不断变换位置，使光照、养料和水温均衡，这样有利于藻体的迅速生长和繁殖。常用的搅拌工具有玻璃棒、竹棒，每天搅拌3次，每次1分钟。5.2光照小球藻的培养要有充分的光照，阴雨天光线不足时，可在培养室内用人工光源进行补充，通常用冷白荧光灯，光照强度为2000～3000Lx；但在光线强烈的夏天，要用遮阳网等进行适当避光。5.3温度及pH温度保持在25～30℃，最适宜生长温度为26℃。pH保持在6～8。5.4污染的防治在小球藻的培养过程中，要经常观察藻液的颜色是否正常、是否有沉淀和附壁现象、液面是否有菌膜等异常情况。造成藻种污染的多数情况是原生动物及杂藻的生长。如果显微镜下检查有原生动物生活，可用1mg/L的漂白粉灭杀。对付其他杂藻最好的办法是严格控温和经常检查培养液的pH。6采收当小球藻的培养液变成绿色、用显微镜观察1mL。培养液中大约有100个小球藻时，就可以采收或扩大再培养了。采收时，用0.3%～0.5%的明矾粉溶解在培养液里，约1小时后，小球藻沉在了水底，除去上层的水，就能获得小球藻的浓缩液。二、硅藻1.储存液：(1)金属液（每升含）EDTA二钠-4.360g氯化铁晶体-3.150g五水硫酸铜-0.010g七水硫酸锌-0.022g六水氯化钴-0.010g四水氯化锰-0.180