《甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子检测技术规程（报批稿）》编制说明

1江苏省地方标准《甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子检测技术规程》甘蓝类蔬菜作物种类众多，包括结球甘蓝、花椰菜、青花菜、芥蓝、苤种植面积分别约为700万亩和130万亩，在全国蔬菜周年供应及出口贸易中占有十分重要的地位。江苏省是甘蓝类蔬菜的重要产区，播种面积约为200万亩。甘蓝类蔬菜生产过程中病害频发，由芸薹生链格孢（Alternaria渍状小点，逐渐变成褐色圆形病斑，略具同心轮纹，有时四周有黄色晕圈，湿度大时上生黑色霉状物。叶柄、茎、角果染病时，可见椭圆形或梭形轮纹加强芸薹生链格孢的早期准确检测是提升甘蓝类蔬菜黑斑病防控能力的时间内实现目标区段的高效扩增。相比于PRPA在医学、食品卫生等领域得到较多应用，在蔬菜病害检测方面的应用仍术规程，旨在通过标准化检测，及时掌握黑斑病的发生危害程度，提高黑斑2病的防控意识和能力，对促进江苏省甘蓝类蔬菜产业高质量发展具有十分重项地方标准制（修）订项目，其中122号《甘蓝类蔬菜真菌性黑斑病快速检测技术规程》标准编制的任务，由江苏省农业科学院、江苏省农业技术推广总站和江苏益禾农业科技有限公司共同负责起草制定。经专家建议和进一步的资料检索发现，引起甘蓝类蔬菜黑斑病的病原虽有细菌和真菌之分，但通常只将细菌引起的黑斑病称为细菌性黑斑病，而链格孢属真菌引起的病害则仍称为黑斑病。因此在不改变范围和标准技术内容的基础上，标准起草组对标准名称进行了适当修改，更改后的标准名称为“甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子系统查阅了十字花科蔬菜黑斑病的病原鉴定、发生规律、综合防控和黑斑病菌分子检测等有关的技术资料，对收集的资料进行全面分析、比较，结合标准起草组承担的各类国家和省级项目在黑斑病病原分离、分子检测等方面的研究成果，按GB/T1.1—2020《条，未采纳2条。标准起草组根据专家意3本标准确定的原则是切合实际、措施具体、操作简便、科学规范、技术先进、逻辑严谨和文字简明。主要技术指标来源于标准起草人员工作积累以及国内外文献，并经提炼论证，具有科学性、实用性和指导性。同时，对本芸薹生链格孢是引起甘蓝类蔬菜黑斑病的主要病原。目前，国内尚未正式制定“甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子检测技术规程”的国家或行业技术规程。检测技术的靶标选择、引物设计筛选等研究。最终，标准起草组在结合国内通过生物信息学分析查找芸薹生链格孢特异的DNA序列，随后设计10ATTGCCTTTCTATATCTTTTGACATTATAGTATGACTTCTGATTTGATAATGAGTTCTATCAGCATGCACTTATTGAATGTGTTCATCTCAACTAGAACTATGCTAACATTATTCACTAATGTTTTAGCAACATTTTCTGTTTACTGGTAGATGATCAATAACGTTCTTCCTCATATAGTATCGGAAAGACTAATAGTAAAACGTTCTCTCTTCTATTACTTGTGCGGTTAAGCACTATGGATATCTTTGCAGAGTATATTTTAGGCATGAGGA22251—10：分别使用RPA-F1/RPA-R1、RPA-F2/RPA-R2、RPA-F3/RPA-R3、67对照中添加灭菌超纯水作为模板。如图4所示，病样和阳性对照出现目的条带，阴性对照和空白对照无目的条带，表明该方法可以有效检出芸薹生链格可以有效节约用药成本和减少黑斑病造成的产量损失，提升甘蓝类蔬菜建立甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子检测技术，健全黑斑病防控体系，助推江8有助于降低农药残留和农药污染风险，提高作物生产安全性，促进土壤本标准涉及内容未违反任何相关的法律法规及强制性标准，其中的部分本标准并不涉及有关国家安全、保护人体健康和人身财产安全、环境质量要求等有关强制性地方标准或强制性条文等的八项要