兽药中非法添加药物快速筛查法

兽药中非法添加药物快速筛查法

（液相色谱一二极管阵列法）

1适用范围

1.1本方法适用于兽药及其原料与辅料中紫外光谱图库中所列非法添加药

物的筛查。

1.2用于紫外光谱图库之外的具有紫外吸收的非法添加药物的筛查时，需进

行空白试验和检测限测定，并测定对照品溶液的紫外光谱图。

2检查方法

照高效液相色谱法（《中国兽药典》一部附录0512）测定。

2.1超高效液相色谱一二极管阵列法

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂

（ACQUITYUPLCHSST3,1.8pm,2.1x100mm）；以水-lmol/L醋酸镀溶液（取

醋酸铉77g,加水至1000ml,用冰醋酸调节pH值至5.0）（99：I）为流动相A,

甲醇-Imol/L醋酸镂溶液（99：1）为流动相B,按下表进行梯度洗脱；流速

0.45ml/min；二极管阵列检测器，采集波长范围为200nm〜400nm,分辨率为

1.2nm,提取波长按需设定（如230nm、270nm、最大值图等）。

时间(min)流动相A（%）流动相B（%）

0.00982

0.25982

12.25199

13.00199

13.01982

17.00982

供试品溶液的配制

中药固体制剂取50mg,力口甲醇10ml,超声处理10分钟（必要时可调整）;

中药液体制剂取10观〜203，加甲醇10mL摇匀;

化药液体制剂取20期，加甲醇10ml,摇匀；

其他化药制剂取50mg,加甲醇10ml,超声处理约10分钟（必要时可调

整），用甲酹:稀释成含有效成分50Hg〜100|jg/ml的溶液。

对照品溶液的配制（紫外光谱图库外品种）用卬醉制成50~100Rg/ml的

溶液，溶解性差的对照品，可加适量盐酸或氢氧化钾溶液，使其溶解。

测定法取供试品溶液2可注入液相色谱仪，同时记录色谱图与光谱图。

通过与紫外光谱图库中对照光谱图最大吸收波长和图形的比对，确定供试品中是

否含有相应非法添加药物。

可根据实验结果调整进样量或浓度，使紫外光谱图光滑、特征清晰。

结果判定

两者光谱图无明显差异，判为可疑阳性结果。

筛查结果呈可疑阳性的样品，需按农业农村部发布的非法添加检查方法标准

进一步检验。

2.2液相色谱一二极管阵列法

色谱条件与系统适用性试验用卜八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Alllima

Cis,5pm,4.6x250mm）；以磷酸二氢钠溶液（取磷酸二氢钠3.0g,加水1000mL

加三乙胺0.5ml,用饱和氢氧化钠溶液调pH值至7.0）:甲醇（70：30）为流动

相;流速l.Oml/min；二极管阵列检测器,采集波长范围为200nm~400nm,分

辨率为1.2nm,提取波长按需设定。

供试品溶液的配制同2.1。

对照品溶液的配制同2.1。

测定法取供试品溶液10|41〜203注入液相色谱仪，其他同2.1。

结果判定同2.1。

2.3液相色谱一二极管阵列法（磺胺类）

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Alllima

T3,5pm,4.6x250mm）：0.2%冰醋酸溶液:乙晴（70：30）为流动相:流速

l.Oml/min：二极管阵列检测器，采集波长范围为200nm~400nm,分辨率为1.2

nm,提取波长按需设定。

供试品溶液的配制同2.1。

对照品溶液的配制同2.1。

测定法取供试品溶液〜203注入液相色谱仪，其他同2.1。

结果判定同2.1。

2.4液相色谱一二极管阵列法（氟喳诺酮类）

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(AUanlis

Cis,5pm,4.6x250mm)；以磷酸溶液(取磷酸3ml,加水1000mL用三乙胺调

节pH值至3.0±0.1,加乙晴53ml,摇匀)为流动相A,乙晴为流动相B,甲醇

为流动相C,按下表进行嘴度洗脱；流速l.Oml/min；二极管阵列检测器，采集

波长范围为200nm〜400nm,分辨率为1.2nm,提取波长按需设定。

时间(分钟)流动相A%流动相B%流动相C%

089.66.24.2

30.0089.66.24.2

30.2090100

55.0090100

55.2089.66.24.2

65.0089.66.24.2

供试品溶液的配制同2.1。

对照品溶液的配制同2.1。

测定法取供试品溶液1()可~2()惘注入液相色谱仪，其他同2.1。

结果判定同2.1。

附：紫外光谱图库

紫外光谱图库

是指方法2.3,-4是指方法2.4,对应谱图为该方法条件下所得。

216.4

005-1

264.0

烟酰

胺

213.3

005-2

261.7

204.5

006-1241.3

262.8

喳乙

醇

238.1

006-2

260.5

242.5

007-1

259.2

乙酰

甲瞳

239.2

007-2

255.8

234.2

008-1261.6

316.7

瞳烯

酮

008-2不出峰

012-2

226.4

012-4

293.9

288.7

013-1

319.1

环丙

沙星

17852FED呈

271.2

013-2

323.6

»?7丹丙”・

0030-2785

0000-

0070-

0060

278.50050

013-470040-

315.42076/\

0030*

0020

OO1O-

0000-

220X)0240002COOO2000030000320003400036000300004000C

5.418

八洛美沙星

0.80-

0.60-

212.8212.8/\

014-1289.1a

0.40-

323.9

020-

0.00-

,.0025o',002oo'.oo350'.00

20C

12714洛35力息

0.08

0.062004/

洛美280.7M0.04

014-2

沙星326.0

0.02

0.00

200.0025000300'00350.00400

00

郴

>IS播犬tUK

2BBC

OOGO-

0055

OOSO-

OD4S

0040

288.0OOM-

014-420030-

320.1ox>»

OQ2O・

OOIS-

OOIO

oxx»-

oooo

»OOO240002COOO2BOOOXX)OO32000340003COOO3000040000

018-2120分钟以后出峰

二氟

沙星019-260分钟不出峰

279.7

019-4

316.6

023-1271.1

磺胺

对甲

氧喀

咤

023-2242.8

磺胺

氯哒0247270.0

嗪

磺胺

甲嗯025-1270.0

哩

水杨

酸

水杨

酸镁

呵深

美辛

对乙

酰氨

基酚

氨基

比林

036-2

MA

A（安

乃近201.0

037-1

降解249.7

产

物）

204.5

038-1

260.4

酮洛

芬

199.2

038-2

258.2

水相:有机相40:60

富马

204.5

酸酮039-1

301.1

替芬

204.5

040-1

286.7

芬布

芬

199.2

040-2

283.1

水相:有机相40:60

202.2

布洛

041-1223.5

分

266.4

196.8

041-2221.5

264.1

水相:有机相40:60

氟比209.3

042-1

洛芬249.7

043-260分钟不出峰

甲芬

那酸

茶普

生

204.5

头抱

053-1237.8

毗后

259.2

203.4

头电

054-1231.8

丙烯

281.9

头抱225.9

055-1

地尼289.1

204.5

头先

056-1235.4

地嗪

262.8

头抱203.4

057~1

噗咻274.7

头抱203.4

058-1

西丁237.8

头抱204.5

059-1

替哇274.7

头抱203.4

060-1

映辛275.9

204.5

头抱

065-1236.6

瞳后

268.8

203.4

头抱

066-1264.0

拉定

344.1

头抱211.7

067-1

硫眯334.7

头先

203.4

美他068-1

236.6

酯

203.4

头抱

069-1241.3

美喋

274.7

头抱204.5

孟多070T271.1

酯348.7

头狗203.7

071-1

尼西270.0

202.2

头抱

072-1230.6

哌酮

270.0

头抱212.8

073-1

匹胺275.9

203.4

头抱

231.8

羟氨074-1

265.2

甘卜

341.8

203.4

头抱

075-1239.0

睡吩

329.9

204.5

头抱

076-1236.6

嚏吠

268.8

头抱0777204.5

哩历237.8

头抱203.4

078-1

他噬258.0

头抱203.4

079-1

替安261.6

二甲

204.5

氧节080-1

279.5

咤

194.5

084-2260.5

376.0

5.445

211.7

085-1246.1

299.9

克伦

特罗

209.8

085-2242.8

296.1

莱克

224.7

多巴086-1

277.1

胺

5.443

，010

0.40-盐酸氯丙那林

0.30-

201.0

089-1W0.20-

264.0

0.10-

I___

0.00-

盐酸00250.0030o'.0035o1.00

200.

氯丙

那林33.572计9ft氧内娜能

0.050-

0.040-

u

210.90.030-

089-2260.5

0.020-

328.3

0.010-

3283

0.000-

inn9^nnnwinnavn'nn4nnn

7.7971

0.20-

产2

\盐酸班布特罗

0.15-

盐酸

布

班202.2

090-120.10-

罗

特266.4

O.OS-

\266.4_______________________

0.00.

.00250.00300.0035o'.OO

200

5.1661

R2616盐酸丙卡特罗

206.90.60-

盐酸

卡235.4

丙

己

罗091-1261.60.40-

特

一

298.7

0.20-u\298.7

341.8

341,8

0.00-

20().00250.00300.00350.00

尼美203.4

092-1

舒利302.3

228.3

266.4

093-1

292.7

329.9

盐酸

二氧

丙嗪

223.9

268.8

093-2

295.0

333.1

水相:有机相40:60

227.1

氢氯

094-1273.5

睡嗪

319.1

210.5

097-1250.9

309.5

盐酸

'嗅己

立仁

097-2不出峰

205.7

228.3

273.5

316.7

长春

西汀

98-2不出峰

依他的1205.7

尼酸281.9

206.9

100-1239.0

盐酸

尼

卡357.1

地

平

100-2不出峰

204.5

101-1240.1

莫

尼359.5

地

平

101-2不出峰

204.5

102-1258.0

盐酸

309.5

氯丙

嗪

102-2不出峰

异丙

202.2

托漠103-1

260.4

校

阿昔203.4

104-1

洛韦254.4

4.4971

恩替203.4

105~1

卡韦255.6

200.00250.00300.00350.00

泛昔223.5

106-1

洛韦310.7

磷酸

奥司

.4

203

他韦107-1

酷酸

倍他

.0

201

米松108-1

5

242.

二丙

酸倍

他米

.3

241

109-1

本公

倍他

米松

118461

戊酸

倍他

米松

丙酸

倍氯

米松

倍氯203.4

米松243.7

酸

丁

倍

氯141201.0

A-1

松

他239.0

地塞

米松

醋酸

地塞

.0

201

米松116-1

.5

242

地塞

.0

米松201

117-1

.5

磷酸242

117-2