高中生物第五章第二节多聚酶链式反应扩增NDA片段新人教版选修

关于高中生物第五章第二节多聚酶链式反应扩增NDA片段新人教版选修第1页，共70页，星期日，2025年，2月5日一、基础知识1、组成元素（一）DNA分子的结构第2页，共70页，星期日，2025年，2月5日一、基础知识C、H、O、N、P1、组成元素（一）DNA分子的结构第3页，共70页，星期日，2025年，2月5日一、基础知识C、H、O、N、P1、组成元素2、基本单位（一）DNA分子的结构第4页，共70页，星期日，2025年，2月5日一、基础知识C、H、O、N、P1、组成元素脱氧核苷酸2、基本单位（一）DNA分子的结构第5页，共70页，星期日，2025年，2月5日一、基础知识C、H、O、N、P1、组成元素脱氧核苷酸2、基本单位3、脱氧核苷酸结构（一）DNA分子的结构第6页，共70页，星期日，2025年，2月5日OOPOHO碱基OOHOOPOHOOH碱基5’3’3’5’碱基脱氧核糖磷酸基团碱基脱氧核糖碱基脱氧核糖5’3’多脱氧核苷酸链结构简图第7页，共70页，星期日，2025年，2月5日连接ATGC第8页，共70页，星期日，2025年，2月5日连接ATGC5'端含磷酸基团3'端（含羟基）第9页，共70页，星期日，2025年，2月5日连接ATGCATGC5'端含磷酸基团3'端（含羟基）第10页，共70页，星期日，2025年，2月5日连接ATGCATGC5'端含磷酸基团3'端（含羟基）3'端5'端第11页，共70页，星期日，2025年，2月5日4、DNA分子的双螺旋结构第12页，共70页，星期日，2025年，2月5日4、DNA分子的双螺旋结构①DNA分子是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链（即一条链为3′→5′，另一条链为5′→3′）盘旋而成的规则双螺旋结构。第13页，共70页，星期日，2025年，2月5日4、DNA分子的双螺旋结构②脱氧核糖与磷酸交替连接，排列在外侧，构成基本骨架；碱基排列在链的内侧。①DNA分子是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链（即一条链为3′→5′，另一条链为5′→3′）盘旋而成的规则双螺旋结构。第14页，共70页，星期日，2025年，2月5日③两条链上的碱基通过氢键连接起来，形成碱基对。碱基对的组成有特定的规律：即腺嘌呤一定与胸腺嘧啶配对，鸟嘌呤一定同胞嘧啶配对。4、DNA分子的双螺旋结构第15页，共70页，星期日，2025年，2月5日（二）DNA的复制2、时期3、场所1、概念第16页，共70页，星期日，2025年，2月5日2、时期1、概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程（二）DNA的复制3、场所第17页，共70页，星期日，2025年，2月5日2、时期有丝分裂间期、减数第一次分裂前的间期1、概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程（二）DNA的复制3、场所第18页，共70页，星期日，2025年，2月5日2、时期3、场所细胞核（主）、线粒体、叶绿体1、概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程（二）DNA的复制有丝分裂间期、减数第一次分裂前的间期第19页，共70页，星期日，2025年，2月5日5、原料6、基本条件4、模板第20页，共70页，星期日，2025年，2月5日5、原料6、基本条件4、模板DNA母链第21页，共70页，星期日，2025年，2月5日5、原料脱氧核苷酸6、基本条件4、模板DNA母链第22页，共70页，星期日，2025年，2月5日5、原料脱氧核苷酸6、基本条件酶、ATP、原料、模板4、模板DNA母链第23页，共70页，星期日，2025年，2月5日7、复制过程第24页，共70页，星期日，2025年，2月5日7、复制过程

①DNA的解旋第25页，共70页，星期日，2025年，2月5日7、复制过程

①DNA的解旋亲代DNA分子利用细胞提供的能量在解旋酶的作用下氢键断裂，部分双螺旋链解旋为两条平行的双链第26页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA聚合酶的特性

DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链。因此，DNA复制需要引物。

第27页，共70页，星期日，2025年，2月5日

②RNA引物的合成第28页，共70页，星期日，2025年，2月5日

②RNA引物的合成以DNA单链为模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物第29页，共70页，星期日，2025年，2月5日

②RNA引物的合成

③DNA的生成以DNA单链为模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物第30页，共70页，星期日，2025年，2月5日

②RNA引物的合成以DNA单链为模板，在引物酶的作用下合成小段的RNA引物

③DNA的生成以DNA单链为模板，在DNA聚合酶的作用下，在RNA引物的末端由5′端→3′端合成DNA。第31页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA合成的方向

子链由5′

端向3′端延伸第32页，共70页，星期日，2025年，2月5日思考：DNA复制的前提是什么？体外扩增DNA如何打开双链？第33页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA复制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA复制的前提是什么？体外扩增DNA如何打开双链？第34页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA复制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA复制的前提是什么？体外扩增DNA如何打开双链？双链的解开第35页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA复制的前提是______________；用_________________方法思考：DNA复制的前提是什么？体外扩增DNA如何打开双链？双链的解开控制温度第36页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA分子的热变性原理：第37页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA双链单链DNA分子的热变性原理：第38页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA双链单链复性（缓慢冷却）DNA分子的热变性原理：变性（加热80-100℃）第39页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA双链单链复性（缓慢冷却）变性的目的：复性的目的：DNA分子的热变性原理：变性（加热80-100℃）第40页，共70页，星期日，2025年，2月5日DNA双链单链复性（缓慢冷却）变性的目的：复性的目的：解开双链有利于引物Ⅰ和引物Ⅱ与两条单链的结合DNA分子的热变性原理：变性（加热80-100℃）第41页，共70页，星期日，2025年，2月5日思考：高温使DNA解旋，但普通DNA聚合酶会失活，__________________找到耐高温DNA聚合酶。第42页，共70页，星期日，2025年，2月5日思考：高温使DNA解旋，但普通DNA聚合酶会失活，__________________找到耐高温DNA聚合酶。托马斯.布鲁克第43页，共70页，星期日，2025年，2月5日体外DNA复制的条件(PCR反应的条件)第44页，共70页，星期日，2025年，2月5日①DNA模板；②分别与两条模板链相结合的两种引物；③四种脱氧核苷酸；④耐高温的聚合酶；⑤控制温度，但不需解旋酶。体外DNA复制的条件(PCR反应的条件)第45页，共70页，星期日，2025年，2月5日（三）PCR的反应过程1、PCR的反应步骤第46页，共70页，星期日，2025年，2月5日1、PCR的反应步骤

PCR一般经历三十多次循环，每次循环可以分为三个基本步骤──变性、复性和延伸（三）PCR的反应过程第47页，共70页，星期日，2025年，2月5日①变性（模板DNA解旋）模板DNA加热至900C以上时，模板DNA双链解离，成为单链。2、循环过程第48页，共70页，星期日，2025年，2月5日靶序列靶序列PCR循环第一步：加热变性第49页，共70页，星期日，2025年，2月5日②复性（退火）温度下降到50℃左右，两种引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。第50页，共70页，星期日，2025年，2月5日PCR循环第二步：引物与靶序列退火第51页，共70页，星期日，2025年，2月5日③延伸温度上升到72℃，在TaqDNA聚合酶的作用下，以脱氧核苷酸为原料，以母链为模板，按碱基互补配对的原则，合成一条新的DNA链第52页，共70页，星期日，2025年，2月5日PCR循环第三步：引物延伸第53页，共70页，星期日，2025年，2月5日靶序列

靶序列第1个PCR循环完成后：得到两个拷贝的靶序列第54页，共70页，星期日，2025年，2月5日95℃变性（1）PCR循环——变性第55页，共70页，星期日，2025年，2月5日（1）PCR循环——变性95℃变性第56页，共70页，星期日，2025年，2月5日95℃变性（1）PCR循环——变性第57页，共70页，星期日，2025年，2月5日55℃复性（2）PCR循环—复性第58页，共70页，星期日，2025年，2月5日（3）PCR循环—延伸第59页，共70页，星期日，2025年，2月5日（3）PCR循环—延伸第60页，共70页，星期日，2025年，2月5日（3）PCR循环—延伸第61页，共70页，星期日，2025年，2月5日（3）PCR循环—延伸第62页，共70页，星期日，2025年，2月5日第63页，共70页，星期日，2025年，2月5日第64页，共70页，星期日，2025年，2月5日第65页，共70页，星期日，2025年，2月5日第66页，共70页，星期