新教材高中生物选择性必修3课件：1 2 1 微生物的基本培养技术(人教版)

第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术知识点1知识点2知识点3课时作业随堂检测///////12356////////////////////////////网络构建·晨读必背4///////培养基的配制1联想质疑自主梳理素养提升营养物质生长繁殖分离鉴定代谢物菌落碳源氮源无机盐维生素酸中性或弱碱(1)所有的培养基中都要加入琼脂。()(2)培养不同微生物的培养基成分完全一样。(

)(3)培养霉菌时一般需将培养基调至碱性。(

)(4)培养厌氧型微生物时，除需要提供无机碳源之外，还需要提供无氧的条件。(

)提示：培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件，其碳源的类型要看其同化作用类型，若为自养型则需要提供无机碳源，若为异养型则需要提供有机碳源。××××[典型例题1]

(2021·北京顺义区期末)下列有关培养基的叙述，正确的是(

)A.培养基所含物质的成分都相同B.培养基只能用于培养微生物C.向固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时可形成肉眼可见的菌落解析培养基的成分不一定都相同，根据培养物的不同可进行调整，A错误；培养基既能用于培养微生物，也可用于微生物的分离、纯化和鉴定，B错误；固体培养基是加琼脂后形成的，再加水不能再制成液体培养基，C错误。D[典型例题2]

(2020·启东中学高二期中)下列有关以CO2为唯一碳源的自养微生物所需营养物质的描述中，错误的是(

) A.铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮素 B.碳源物质不是该微生物的能源物质 C.水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质 D.琼脂是该微生物的营养要素之一

解析铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮素，A正确；以CO2为唯一碳源的自养微生物，二氧化碳不是该微生物的能源物质，B正确；水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质，C正确；琼脂是凝固剂，不是该微生物的营养要素之一，D错误。D[变式训练]

(2021·湖北襄阳四校联考)下列关于微生物培养的叙述，正确的是(

) A.微生物在培养液中培养一段时间后用显微镜观察，可见到形成的菌落 B.NH3可以作为硝化细菌的氮源和能源物质 C.任何培养基都必须含有碳源、氮源、无机盐、水和琼脂 D.某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，比如培养酵母菌时，要添加维生素

解析微生物在固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落，A错误；硝化细菌可利用氧化NH3释放的能量合成有机物，B正确；培养基不一定都含有碳源、氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源，分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，C错误；酵母菌不属于细菌，D错误。B科学思维——培养基的成分与其用途之间的关系下表是

培养基的配方，分析回答：牛肉膏蛋白胨牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质材料牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5g10g5g20g定容至1000mL(1)根据培养基的物理性质，该培养基属于________培养基，理由是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。提示固体该培养基的配方中含有凝固剂琼脂(2)该培养基中主要提供碳源和氮源的物质分别是什么？属于有机物还是无机物？___________________________________________________________。提示牛肉膏主要提供碳源，蛋白胨主要提供氮源。二者均属于有机物。(3)该培养基培养的微生物同化作用类型是________，理由是__________________________________________________________________________________。提示异养型微生物该微生物的碳源和氮源是有机物(4)试从碳源和氮源的角度分析不同类型微生物所需的培养基成分的特点：

自养型生物异养型生物碳源CO2、Na2CO3等无机物____________________________氮源________________________________________________提示糖类等有机物NH3、硝酸盐等无机物尿素、蛋白质等有机物★微生物的种类病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活。目前不能利用人工培养基来培养病毒，只有接种在活细胞或组织中，病毒才能增殖。

(1)琼脂在培养基中仅作为凝固剂，不能为微生物提供能量和营养。(2)扩大培养获得大量菌种时常用液体培养基。

牛肉膏蛋白胨都能为微生物的生长提供哪些营养成分？提示：碳源、氮源和维生素等。(1)培养自养型微生物，通常需要提供无机碳源，如CO2、NaHCO3等；而培养异养型微生物，则需要提供有机碳源，如糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等。(2)如果培养基里没有有机碳源，则通常培养的是自养型微生物；若含有有机碳源，则通常的为异养型微生物。(3)培养基的配方中没有琼脂，则通常为液体培养基；培养基的配方中含有琼脂，则通常为固体或半固体培养基。

培养基的配制原则(1)目的要明确：不同微生物需求不同，根据微生物的种类、培养目的进行配制。(2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。(3)pH要适宜：不同微生物适宜生长的pH范围不同，可在培养基中添加缓冲剂维持pH稳定。

(1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常用的无机氮源是铵盐和硝酸盐。(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源和能源。(3)某些微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成生长因子所需要的酶或合成能力有限。无菌技术2联想质疑自主梳理温和表面内部5～6营养芽孢不耐高温62～6530s～1min绝大多数营养成分酒精氯气接种箱超净工作台物体表面空气强烈的理化芽孢孢子沸水流通蒸汽高压蒸汽水蒸气12115～30干热灭菌160～1702～3耐高温干燥充分燃烧涂布器接种针试管口瓶口(1)获得纯净的微生物培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。()(2)灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底。(

)(3)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。()提示：培养基通常采用高压蒸汽灭菌，而接种环则采用灼烧灭菌。(4)培养基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。(

)√√×√[典型例题]

(2021·湖北襄阳四校联考)微生物培养过程中，要重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，正确的是(

) A.煮沸消毒法中100℃煮沸5～6min可以杀死全部微生物的细胞和芽孢、孢子 B.将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 C.加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 D.家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

解析煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，而灭菌能杀灭物体内外一切微生物，包括孢子和芽孢，A错误；指示剂和染料可能混有微生物，因此加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，C错误；家庭制作葡萄酒时，要将容器进行灭菌或消毒，但是葡萄不能灭菌，因为发酵用的酵母菌来自葡萄，D错误。B[变式训练]

(2021·河北衡水调研)防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是(

) A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 C.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，防止被微生物感染 D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境

解析接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，B错误。B★常用煮沸消毒法对玻璃和陶瓷器皿进行消毒(1)用酒精消毒时，体积分数为70%的酒精消毒效果最好，原因是浓度过高，菌体表面蛋白质变性过快，从而凝固形成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌能力减弱。(2)巴氏消毒法的优点是在达到消毒目的的同时，营养物质损失少。(3)使用高压蒸汽灭菌锅时一定要将锅内冷空气彻底排出后，才能密闭升温升压，否则，可能引起锅内压力达到设定值而温度不能达到灭菌要求。

(1)用紫外线进行消毒时适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。(2)一般情况下，在实验操作过程中，对能灭菌的对象进行灭菌处理，如培养皿及用到的各种器具；对无法灭菌的对象则进行消毒处理，如实验操作者的衣着和双手等。

无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？提示：还能有效避免污染环境以及操作者自身被微生物感染。微生物的纯培养3联想质疑自主梳理素养提升1.几个相关概念(1)培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含__________微生物的群体称为培养物。(2)纯培养物与纯培养：由__________繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。(3)微生物纯培养的步骤：包括配制__________________________和培养等。特定种类单一个体培养基、灭菌、接种、分离2.酵母菌的纯培养固体肉眼菌落平板划线稀释涂布平板纯培养物琼脂蒸馏水干热灭菌箱50℃酒精灯火焰单恒温培养箱3.倒平板的具体操作

大于瓶口的缝隙火焰4.平板划线法的具体操作(1)倒平板操作中，等待平板冷却凝固后，要将平板倒置。()(2)平板划线操作中，划完一个区域后要将接种环灼烧，再划下一个区域。(

)(3)平板划线法接种时，每一次划线前都要蘸取菌种。()提示：平板划线法接种时，仅在第一次划线前蘸取菌种，不能每一次划线前都蘸取菌种。(4)需要将一个不接种的培养基放在相同的条件下培养，以检验培养基的灭菌是否合格。()√√×√科学探究——平板划线法(1)平板划线法的原理是什么？提示：平板划线法的原理是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在数次划线后培养，可以分离到单个菌落。(2)灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？提示：避免接种环温度太高，杀死菌种。(3)在作第二次划线以及其后的操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？提示：划线末端含有的细菌数目较少，每次从上一次划线的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个的细菌。(4)为何最后一次划线不能与第一次划线相连？提示：最后一次划线已经将细菌稀释成单个的细胞，如果与第一次划线相连则增加了细菌的数目，得不到纯化的效果。(5)平板划线法接种菌种时，哪些操作可防止杂菌污染？提示：①接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧。②划完一个区域后，将接种环灼烧，冷却后再划下一区域。③接种环蘸取菌液时，要将试管口等通过火焰。④划线时将培养皿的皿盖打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划线后及时盖上皿盖。⑤接种操作都在酒精灯火焰旁完成。[典型例题]

(2021·辽宁沈阳铁路实验中学期中)在分

离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如图所示，且甲、乙的对应位置不变。有关叙述错误的是(

) A.配制培养基时需进行高压蒸汽灭菌 B.甲中a区域为划线的起始位置 C.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 D.图示接种过程中接种环灼烧了5次B解析为了能彻底灭菌，配制的培养基需进行高压蒸汽灭菌，A正确；起始划线的区域长出的菌落多且密，甲中d区域为划线的起始位置，a区域为划线的结束位置，B错误；连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落，C正确；由于每次使用接种环前后都要灼烧灭菌，图示甲中共有4次划线接种，接种过程中接种环灼烧了5次，D正确。[变式训练]

(2021·河北邢台期末)下列有关微生物的分离与培养的叙述，错误的是(

) A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B.倒置平板可防止培养皿皿盖上的冷凝水滴落造成污染 C.倒平板时将培养皿的皿盖拿开，以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿 D.检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒温箱中培养

解析获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，A正确；倒置平板可防止培养皿皿盖上的冷凝水滴落造成污染，B正确；倒平板时用食指和拇指夹住皿盖并开启一条缝，使其恰好能让锥形瓶瓶口伸入，随后倒入培养基，C错误；检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒温箱中培养，D正确。C★各种平板★酵母菌纯培养后的平板1.培养基灭菌后，需要冷却至50℃左右时，才能倒平板的原因是什么？你用什么办法来估计培养基的温度？

提示：琼脂是一种多糖，在98℃以上溶化，在44℃以下凝固，倒平板时高于50℃则会烫手，低于50℃时若不及时操作，琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。2.如果制备的培养基需要特殊的pH，则调节pH的操作应在何时进行？

提示：溶化后灭菌前调节pH。将未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天，若无菌落生长，说明培养基的配制成功；否则制备失败，需重新配制。

平板划线法中，三种灼烧接种环操作的目的

网络构建·晨读必背4思维导图液体碳源氮源晨读必背1.培养基是指人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2.消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。3.灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。4.分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。5.采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。随堂检测51.微生物在哪种培养基上生长会形成肉眼可见的菌落(

)A.液体培养基

B.固体培养基C.选择培养基

D.鉴别培养基解析微生物在固体培养基表面生长会形成肉眼可见的菌落。B2.关于微生物的营养，下列说法正确的是(

)A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅提供无机盐D.无机氮源也可能提供能量解析对一些微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源，A错误；CO2是光能自养型细菌的碳源，但不能提供能量，B错误；除水以外的无机物种类繁多、功能多样，如CO2可作自养型生物的碳源，C错误；硝化细菌所利用的氮源是无机氮源——氨，同时氨的氧化过程也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源，D正确。DA3.煮沸消毒法与巴氏消毒法的主要区别是(

)A.温度不同B.时间不同C.前者适用于固体消毒，后者适用于液体消毒D.没有区别解析煮沸消毒法是指在100℃条件下煮沸5～6min，而巴氏消毒法则是在62～65℃条件下消毒30min或在80～90℃条件下处理30s～1min，二者的关键区别是温度不同。4.(2021·河北唐山期中)下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是(

)A.配制细菌培养基过程中，需要在倒平板时调节培养基的pHB.配制固体培养基时加入琼脂，其作用是为微生物生长提供碳源C.平板划线法接种时，每次划线之前都需对接种环进行灭菌D.实验结束后，使用完的培养基可以直接丢弃解析配制细菌培养基过程中，需要在灭菌前调节培养基的pH，A错误；配制固体培养基时加入琼脂，其作用是作为凝固剂，而不是为微生物生长提供碳源，B错误；平板划线法接种时，每次划线之前和之后都需对接种环进行灭菌，C正确；实验结束后，使用完的培养基需要经过灭菌处理后才可以丢弃，D错误。C5.(2021·云南师大附中调研)如图

是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5，下列操作方法叙述正确的是(

) A.在1、2、3、4、5区域中划线前都要对接种环灼烧灭菌，

灼烧灭菌后立即进行划线 B.1和5划线可以如图所示，也可以相连在一起 C.在划线操作结束时，要对接种环灼烧灭菌 D.在5区域中才可以得到单菌落

解析灼烧接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却后再进行划线，A错误；划线时注意不要将最后一区5的划线与第一区1相连，B错误；在划线操作结束时，要对接种环灼烧灭菌，C正确；在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，D错误。C课时作业6知识点1培养基的配制1.能作为自养微生物的碳源的是(

)A.糖类

B.石油C.二氧化碳

D.花生粉饼解析自养微生物能利用无机碳源。CD2.下列关于培养基的说法，正确的是(

)A.为微生物的生长繁殖提供营养基质的是固体培养基B.培养基只有两类：液体培养基和半固体培养基C.培养基分装到培养皿后再进行高压蒸汽灭菌D.固体培养基中往往需要加入凝固剂琼脂D3.(2021·东北三省期末联考)下列有关细菌培养的叙述，正确的是(

)A.琼脂固体培养基不含水分B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D.有的物质既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能提供能量解析固体培养基中也含有水分，因为含有凝固剂，所以呈固态，A错误；青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，所以加入青霉素的培养基可抑制细菌生长而不抑制真菌生长，B错误；破伤风杆菌的代谢类型属于异养厌氧型，向其培养基中通入氧气会抑制其生长，C错误；有的物质既可作碳源也可作氮源，如蛋白胨，碳源并不都能提供能量，如CO2等，D正确。4.(2020·河北衡水期中)利用微生物的发酵原理为人类提供生物产品时，首先要获得优良的单一菌种。消灭杂菌，获得单一菌种的方法不包括(

) A.根据微生物遗传组成的差异，在培养基中添加不同比例的核酸 B.根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中添加不同的生长因子 C.根据微生物对碳源需求上的差别，在培养基中添加不同的碳源 D.根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中添加不同的抗生素

解析因为微生物不能直接利用核酸，只有先将核酸水解为核苷酸，才能被微生物利用，所以培养基中加入不同比例的核酸，无法获得单一菌种，A符合题意。AC知识点2无菌技术5.(2021·大同市联考)金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，实验中下列做法错误的是(

) A.对接种环进行灼烧处理 B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌后才能倒掉 C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉 D.接种后双手必须经肥皂洗净，再用体积分数为70%的酒精棉球擦拭

解析带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌后才能倒掉，简单的加热达不到灭菌效果，C错误。B6.培养基配制需要运用灭菌和消毒技术，但两者消灭的微生物种类和数量是不同的。下列哪一项能正确表示消毒结果和灭菌结果之间的关系(

)解析消毒的结果实际上是部分灭菌。C7.(2021·河北承德调研)下列有关无菌技术的说法，正确的是(

)A.无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物B.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌C.经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，不能在常温下长期保存D.无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌解析无菌技术的关键是防止杂菌的污染，A错误；培养微生物的培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，微生物的接种工具，如接种针、接种环或其他金属用具一般通过酒精灯火焰灼烧来灭菌，B错误；经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，不能在常温下长期保存，C正确；无菌技术中，若处理对象为液体，可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，D错误。知识点3微生物的纯培养8.(2021·宜昌一中联考)如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是(

)CA.步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置B.步骤②将接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后进行平板划线C.步骤③应多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D.步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数解析步骤①倒平板操作时，倒好后待平板冷却凝固，然后将其倒过来放置，A错误；步骤②将接种环在火焰上灼烧后冷却至室温后再蘸取菌液后进行平板划线，B错误；步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行分离纯化，得到单个菌落，但不可用来计数，D错误。9.(2021·雅安市联考)如图所示为实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果。下列相关说法正确的是(

) A.该图最可能是用稀释涂布平板法进行接种的 B.在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌 C.该种微生物有可能是H5N1病毒 D.该培养基上的菌落分布不均匀，代表纯化失败

解析题图最可能是用平板划线法进行接种的，A错误；在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌，B正确；病毒不能在培养基上生存繁殖，C错误；平板划线法，随划线次数的增加，菌落密度逐渐减小，因此分布不均匀，D错误。BD10.如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，错误的是(

)A.该操作步骤是接种，方法是平板划线法B.除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端C.图中细菌密度最小的是5处D.该接种方法适用于细菌的计数解析题图中所示的接种方法是平板划线法，该方法要求连续划线多次，直到最后一次划线的末端细菌呈单个存在，所以该方法仅用于纯化大肠杆菌但不适用于细菌的计数。D11.(2021·河北唐山期中)马铃薯琼脂培养基常用于真菌的筛选，其配制过程如下：将马铃薯去皮切块，加水煮沸至其软烂，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量琼脂，用水定容后灭菌。下列相关叙述错误的是(

) A.应在培养基中加入链霉素，以抑制细菌的生长 B.除碳源外，马铃薯浸出液还提供氮源和无机盐 C.氮源进入细胞后，可参与合成核苷酸等物质 D.加入碘液后，周围为蓝色的菌落一般能产生淀粉酶解析链霉素能抑制细菌的生长，因此在培养基中加入链霉素后可以筛选真菌，A正确；各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，培养基中的马铃薯浸出液除了为微生物生长提供碳源外，还可提供的营养物质有氮源和无机盐，B正确；核苷酸含有氮元素，因此氮源进入细胞后，可参与合成核苷酸等物质，C正确；淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，会形成透明圈，D错误。12.(2021·河北衡水中学期中)如表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是(

)C成分含量成分含量NaNO33gFeSO40.01gK2HPO41g葡萄糖30g琼脂15gH2O定容至1000mLMgSO4·7H2O0.5g抗生素0.1万单位A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基B.由培养基的原料可知，所培养微生物是异养型，培养的微生物可以是酵母菌C.本培养基中抗生素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去抗生素和NaNO3，并应加入尿素解析从培养基成分看，配方中含有琼脂，属于固体培养基，A正确；由培养基的原料可知，葡萄糖属于有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，抗生素能够抑制细菌的生长，因此培养的微生物可以是酵母菌，B正确、C错误；若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去抗生素和NaNO3，并加入尿素作为唯一氮源，D正确。13.(2021·湖北荆州期末)下图是生物兴趣小组为研究“××牌酸奶中乳酸菌种类及其耐药情况”而制定的流程图。请分析回答：(1)与酵母菌相比，乳酸菌在结构上的主要区别是_________________________________________________________________________________________。(2)本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙，乳酸菌在____________________(生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈。从物理形态分析，本研究使用的培养基属于________________类型。(3)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，把锅内水加热煮沸，必须________________后，将锅密闭，继续加热以保证锅内气压上升，达到121℃。灭菌后的培养基应适当冷却后，在________________附近倒平板。(4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤：步骤1：分别取____________________