盐酸克伦特罗莱克多巴胺尿检阳性原因分析报告教学材料

盐酸克伦特罗、莱克多巴胺尿检阳性原因分析研发中心一、β-兴奋剂类物质的简介二、β2-肾上腺素受体激动的作用机理三、主要检测方法的优缺点比较四、出现假阳性的原因分析五、客户投诉的处理主要内容目前已发现以下九种肾上腺素受体亚型:α1Αα1Β、α1D、α2A、α2Β、α2C、β1、β2、β3、β4.β-兴奋剂即肾上腺素β受体激动剂。这些受体亚型在机体的共存使得对器官功能的调节更加精细。肾上腺素激动剂就是一类专门作用于肾上腺素受体的物质，是一类苯乙胺类药物,是天然儿茶酚胺类化学合成的衍生物。一、β-兴奋剂简介肾上腺素激动剂的作用相似，仅在作用强度、作用时间和作用受体的选择性上有差别。

去甲肾上腺素主要激动α1受体，对β1的作用弱，对β2几乎无作用。

多巴胺主要针对β1受体和α1受体，对β2作用较小。

异丙肾上腺素主要作用于β受体，盐酸克伦特罗就是主要针对β2受体起作用的。

β2受体激动剂,属苯乙醇胺类,为儿茶酚胺、肾上腺素和去甲肾上腺素的化学类似物。一般可分为含取代基的苯胺型(如克伦特罗）、苯酚型(如沙丁胺醇)、苯二酚型(如特布他林)等三大类。2002年3月农业部发布了《食品动物禁用的兽药及其它化合物清单》明确规定β2激动剂被禁止所有用途,禁用于所有食品动物。2003年12月,农业部、卫生部和国家药品监督管理局又联合发布了《禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物品种目录》,β2激动剂被列在头条。β2受体激动剂是通过兴奋气道平滑肌和肥大细胞膜表面的β2受体，舒张气道平滑肌、减少肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒及其介质的释放、降低微血管的通透性、增加气道上皮纤毛的摆动等缓解哮喘症状。除松弛支气管平滑肌外,该药也激动机体其他部位的β2受体,如子宫、骨骼肌和血管平滑肌起作用。

二、β2-肾上腺素受体激动的作用机理

作用模型其造成的对代谢的影响：耗氧量增加20%~30%，糖原分解，血糖增高，脂肪分解，血液中的游离脂肪酸升高同时可致血钾增加长期使用后易引发肌肉震颤、四肢和面部肌肉最为明显，其他症状有心动过快，心率失常，腹痛，肌肉疼痛，恶心、晕眩等。人吃了残留的猪肉组织后可能会出现的中毒症状有：面部潮红、头痛、头晕、胸闷、心悸、四肢麻木等。长期使用的中毒症状：三、主要检测方法及优缺点比较

测定β2受体激动剂残留量方法的有很多,主要为确证法和筛选法。确证法中有气相色谱-质谱联用法(GC/MS)和液相色谱-质谱联用法。筛选法有免疫分析法（有放射免疫分析技术(RIA)和酶免疫分析技术(EIA)

)、液相色谱法、薄层色谱法。ELA方法：是检测CL、莱克多巴胺等较高效的方法,是用酶标记的抗体或抗抗体来进行的抗原-抗体反应。ELISA检测限可达0.05ng/g。优点：快速、操作简单、费用低、灵敏度较高,缺点：只能检查出克伦特罗及其同类药物(β-肾上腺受体激活剂)的存在,不能确定其各自化学本质,假阳性率高。HPLC法：盐酸克伦特罗做HPLC分析时不需要衍生,是利用β-肾上腺素能激动剂分子可与C18或C8固定相分子相互作用，应用反相柱检测β激动剂类物质。优点：检测精确度高，其最低检测限范围为1~15ng／g，而且假阳性率低，与GC-MS法相比样品不必衍生；缺点：检测过程烦琐、检测时间长，需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。GC-MS法优点是能在多种残留物同时存在情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。与HPLC相比，GC-MS法灵敏度更高，假阳性率更低，其缺点也同HPLC法一样。我国已将HPLC法作为检测饲料中CLB残留的半确证法，将GC-MS法定为确证性方法，主要用于最后确认和仲裁。四、出现假阳性的原因分析

由于目前大部分质检部门均以ELISA试纸检测方法作为前期的筛选方法。而ELISA方法中的抗原抗体结合的非特异性，使得其检测结果假阳性率很高。就像之前讲的α受体激动剂也可能会影响其检测结果。与克仑特罗具有相同的苯乙胺醇结构的物质或代谢后产生类似结构的物质均可能使产生假阳性。与莱克多巴胺的体内代谢产物有同样或类似结构的物质会导致莱克多巴胺的检测出现假阳性。其他的β-兴奋剂物质也是一样。因为饲料组成成分复杂，而动物体内代谢产物的结构种类也很多，所以还有很多物质也有报道会对莱克多巴胺、盐酸克伦特罗的尿检有影响，但是具体造成的原因还不是很清楚。比如饲料中硫酸锌、有机铬添加量较大。或者有使用以下药物的：泰乐菌素、盐酸四环素（四环素类药）、海达（