土壤质量 土壤微生物多样性的测定 第2部分：磷脂脂肪酸分析法 编制说明

一、工作简况，包括任务来源、制定背景、起草过程等 （一）任务来源 （二）制定背景 （三）起草过程 21预研阶段 22立项阶段 23起草阶段 24征求意见阶段 3二、国家标准编制原则、主要内容及其确定依据 3（一）编制原则 3（二）主要内容 3三、试验验证的分析、综述报告，技术经济论证，预期的经济效益、社会效益和生态效益 7四、与国际、国外同类标准技术内容的对比情况 9五、以国际标准为基础的起草情况，以及是否合规引用或者采用国际国外标准 10六、与有关法律、行政法规及相关标准的关系 10七、重大分歧意见的处理经过和依据 八、涉及专利的有关说明 九、实施国家标准的要求，以及组织措施、技术措施、过渡期和实施日期的建议等措施建议错误！未定义书十、其他应当说明的事项 术文件项目《土壤质量土壤微生物多样性的测定第2部分：磷脂脂肪酸分析单位为全国土壤质量标准化技术委员会，由中国科学院南京土壤研究所等单位本文件借鉴ISO国际标准，规范我国土壤微生物多样性的磷脂脂肪酸测试方法，可以为我国磷脂脂肪酸法研究微生物多样性的数据与国际互认提供有利条件，进而为我国在土壤学、微生物学和生态学等领域的相关研究工作提高重会提出本标准的标准建议书和标准草案。同时开始查阅文献，收集国际、国家性的测定磷脂脂肪酸分析法》获得批准成为2024年第三批国家标准化指导性技术文件项目，计划编号20241644-Z全国土壤质量标准化技术委员会就《土壤质量土壤微生物多样性的测定磷脂本标准为修改采用《土壤质量土壤微生物多样性的测定第2部分：使用简单PLFA提取法的磷脂脂肪酸（PLFA）分析法》（ISO/TS29843-2:20），即《Soilquality—Determinationofsoilmicrobialdiversity—Part2:Methodby为基础的标准化文件起草规则》的规定起草。标准编制遵循“实用性、统一性、规范性”的原则，并注重标准的通用性和适用性。提取物分离为中性脂质、糖脂和磷脂。磷脂通过温和的碱性水解反应转化为脂柠檬酸盐缓冲液的体积。22）；ww——土壤水分含量的质量分数，单位为每克干用涡旋仪将样品混匀，在超声波仪中超声30min后放入冰箱，4℃下静置刻度烧瓶中。向含土壤悬浮液的试管中加入5mLBligh-Dyer溶液。再次在涡弃去样品的上层（水相）。在50℃下氮气(N2)吹干下层。样品的吹干提），下保持至少30min。重蒸水，以停止反应。在超声波仪中振摇30min，然后以1300r/min离心5min。），提取下层（水相包括振摇和以1300r/用50µL内标溶液将提取物溶解后待测。气相色谱的参考条件为：进样量Rf×k×m1Ri×m2×Mc——土壤中目标化合物的浓度，单位为纳摩尔Rf,Ri——目标化合物和内标的平均响应；）；）；M——目标化合物的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol）。结合上述三种载气各自的优缺点以及磷脂脂肪酸分析对分离效率要求较高的特点，ISO标准采用氦气作为载气。考虑到氦气的使用成本太高，本方法增加了氢气作为载气的选项，通过使用氢气发生器代替氢气钢瓶来降低风险。为此我们考察了氦气和氢气分别作为气相色谱的载气对脂肪酸甲酯标准样品的分离效果。由如下两张色谱图可以看出，氢气作为载气可以在更短的时间内对脂肪酸甲酯标准样品实现很好的分离，满足磷脂脂肪酸的分析要求。因此本方法pA555045403530252026783080389740414288426783080389740414288443748295994645273768930926997442.557.51012.51517.520minpA20008060402023712073283623712073283628723455376647975877625969406997773279808452898442682468件进行数据分析，可以鉴定出64种脂肪酸。pA5040302007933469552708852698374246844648746336648045457206007933469552708852698374246844648746336648045457206036704045474448645209655565256965773282298453892890649528 . 53852468际标准化组织已经建立了土壤中微生物多样性测定的磷脂脂肪酸分析法。其中Determinationofsoilmicrobialdiversity—Part2:Methodby本标准的制定过程严格遵循现行的法律法规，确保标准的适用性和无冲突酸分析法，扩大其应用范围，为标准化指导性技术文件，与现行的法律、法规础性标准。标准实施后，对土壤学研究具有重要指导意义。建议标准编制组组本文件修改