临床免疫学检验课件 第26章 移植免疫与检测学习资料

第二十六章

移植免疫及检验第一节、概述1、移植(transplantation)☆将身体的某一部分（如细胞、组织或器官），通过手术或其他途径移到同一个体或另一个体的特定部位，并使其继续存活的方法，称移植。

移植免疫学：是研究与排斥反应相关的抗原及其诱导免疫应答机制的学科。2、几个基本概念

移植物（graft）供者(donor)受者或宿主（recipientorhost）

组织相容性（histocompatibility）：

不同个体间进行组织或器官移植时，供者与受者双方相互接受的程度。排斥反应（rejection）：由于供受者间组织不相容，移植物与受者免疫系统相互作用引起免疫应答，导致移植物或受者组织损伤。自体移植(autologousgraft):

移植物取自受者自身。同系移植/同基因移植(syngeneicgraft):遗传背景完全相同的两个个体间移植同种移植(allogeneicgraft):同种不同个体间的移植。异种移植(xenogeneicgraft):不同种属个体间的移植。3、移植类型4、按移植物来源的移植分类

尸体供器官移植活体供器官移植：亲属非亲属其他：异种器官人工器官培养组织和器官第二节移植排斥反应

TransplantRejection一、移植抗原☆

同种异体移植中，决定组织相容性的同种抗原种类很多。主要组织相容性抗原（MHA）

次要组织相容性抗原（mHA）其他组织相容性抗原

移植抗原☆1、主要组织相容性抗原（MHA）

HLA-DRHLA-A、HLA-B、HLA-DQ和HLA-DP，HLA-C

HLA是不同个体间进行器官或组织细胞移植时发生排斥反应的主要成分,这种代表个体特异性的同种抗原又称组织相容性抗原或移植抗原.

2、次要组织相容性抗原（mHA）排斥反应的程度轻，速度慢3、其他组织相容性抗原

ABO抗原系统、组织特异性抗原移植抗原☆组织特异性抗原一类特异性地表达于各种器官、组织、细胞上的抗原系统。如：血管内皮细胞特异性抗原、肾特异性抗原、肝脏特异性抗原、胰腺特异性抗原、心脏特异性抗原、骨髓特异性抗原、皮肤特异性抗原。二、移植排斥反应☆排斥是移植物抗原和宿主体内免疫活性细胞相对抗的结果；排斥反应的本质是受者免疫系统对移植器官的免疫应答反应；移植物本身对受者组织的抗原发生免疫应答。排斥反应的类型☆（一）宿主抗移植物反应（HVGR）

两个必须条件：①供受者间组织相容性抗原不相容；②受者体内的免疫活性细胞（主要是淋巴细胞）能够发生免疫应答。根据排斥反应发生的时间、发病机理、临床表现及病理变化，分为

超急性排斥反应

急性排斥反应

慢性排斥反应（二）、排斥反应的类型☆1、超急性排斥反应（hyperacuterejection）

移植物血液循环恢复后数分钟或数小时（也可在24~48小时）内发生的排斥反应，由体液免疫介导。

*免疫学基础：受者体内预存抗供者同种异型抗原（如HLA抗原、ABO血型抗原、血小板抗原等）的抗体与移植物细胞表面相应抗原结合*可见于移植术前反复多次输血、多次妊娠、长期血液透析或再次移植的个体，也可由于移植抗原与病原微生物具有共同抗原所致。

移植后1周至3个月内发生的排斥反应，由细胞免疫介导。

*免疫学基础：受者T细胞直接识别供者APC表面同种异型MHC抗原，发生激活和增殖，并通过不同效应机制损伤移植物。

*急性血管排斥反应（acutevascularrejection）

宿主针对移植物血管的移植排斥反应，体液免疫应答与细胞免疫应答机制均参与。2、急性排斥反应（acuterejection）：3、慢性排斥反应（chronicrejection）

多发生于移植术后数月或数年的移植排斥反应（1）免疫学因素:慢性排斥反应是急性排斥反应反复发作的结果，导致移植物组织的退行性变。体液免疫应答与细胞免疫应答机制均参与。（2）非免疫学因素：局部缺血、再灌注损伤、免疫抑制剂毒副作用、巨细胞病毒感染、高血压、糖尿病等均可促使慢性排斥的发生。（三）移植物抗宿主反应(GVHD）

GVHD：移植物中淋巴细胞（主要是T细胞）识别宿主抗原而致敏、增殖分化，直接或间接攻击受者靶组织而发生的一种排斥反应。

免疫学基础：受者免疫功能严重低下，移植物中含大量免疫活性细胞，供、受者间组织相容性抗原不符等。常见于骨髓、胸腺、脾等免疫器官移植。主要效应细胞：骨髓移植物中成熟T细胞。三、排斥反应的发生机制Tc细胞介导的细胞毒作用NK细胞介导的直接细胞毒作用抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCC）抗体介导的补体依赖性细胞毒作用炎症效应细胞因子介导的炎症效应第三节预防排斥反应的免疫措施移植前组织配型移植物与受体的预处理移植前后免疫抑制处理

诱导移植耐受一、组织配型

器官移植的供受者之间组织相容性程度越高，器官存活的机率就越大；ABO血型必须相同或相容；供受者HLA是否相容是移植物存活的主要条件之一。HLA系统含有多种Ⅰ类和Ⅱ类抗原基因，但多数情况下只检测HLA-A、B和DR。HLA基因高度多态性(是无血缘关系的同种器官移植，急性排斥反应难以避免的主要原因）。HLA-DR配型较A、B位点配型重要得多。（一）.HLA血清学定型试验☆SD抗原

HLA-ABCHLA-DRDQ补体依赖的细胞毒(CDC)试验CDC试验原理：

应用一系列已知抗HLA的特异性标准分型血清与待测淋巴细胞混合，然后加入补体，待测淋巴细胞上的HLA抗原与特异的抗HLA抗体结合，激活补体导致靶细胞的溶解，溶解的细胞可被加入的台盼蓝或伊红染料着染，而活细胞不着染。因此可根据靶细胞的死活，确定待检的HLA特异性。

结果的判断：死细胞%记分意义0-101阴性11-202阳性可疑21-404弱阳性41-806阳性>808强阳性

（二）.HLA细胞法分型试验☆LD抗原（lymphocytedefinedantigen）

HLA-D和DP

混合淋巴细胞培养(mixedlymphocyteculture,MLC)混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)原理遗传型不同的两个个体的淋巴细胞在体外培养时，由于HLA抗原不同，能相互刺激导致对方淋巴细胞分裂增殖和转化，可用形态学或3H-TdR掺入法进行检测。LD抗原的相容程度：混合淋巴细胞培养（MLC）：细胞介导的淋巴细胞毒试验：将受者淋巴细胞与灭活的供者淋巴细胞做常规单向MLC，收获致敏的受者淋巴细胞后，再与51Cr标记的、PHA刺激的供者淋巴细胞做CML试验；51Cr释放的程度与供－受者相容程度呈负相关。（三）.HLA基因分型:PCR-RFLPPCR-SSOPCR-SSP（四）.交叉配合试验☆用供者淋巴细胞与梯度稀释的受者血清作淋巴细胞毒交叉配合试验，以检测受者体内抗供者淋巴细胞的细胞毒性抗体。二、移植物预处理

外科技术

三、免疫抑制剂

全身淋巴组织照射、免疫抑制剂化学性免疫抑制剂：环孢霉素A其作用是抑制T细胞活化过程中IL-2基因的转录，阻断IL-2依赖的T细胞分化增殖，能明显延长各种类型的器官移植的存活。生物性免疫抑制剂：是一种“专一”的选择性免疫抑制剂天然药物：有双向免疫调节作用四、免疫耐受（immunetolerance）

诱导受者对移植抗原的特异性耐受，不影响受者的正常免疫功能；不用药（指免疫抑制剂）、不排斥、不感染的“三不状态”，是免疫抑制治疗的最理想状态。控制移植物排斥的最理想方法是诱导特异性耐受。五、移植物选择标准☆一般情况

移植物健康，形态和功能无异常；供者无传染病或相关感染、无代谢病和恶性肿瘤；供、受者年龄相仿；供者器官与受区的大小相接近。ABO血型相容HLA相容性六、移植成功的关键点☆移植物预处理外科技术移植物选择（组织配型）交叉配型免疫抑制第四节移植排斥反应的免疫学监测

移植排斥反应（transplantationrejection)??

器官、组织或细胞移植后，受体发生免疫应答，引起针对移植物的免疫损伤而使其丧失功能的过程。排斥反应的免疫学检测一、免疫细胞生物学活性的检测二、特异性体液免疫的检测三、细胞因子及其受体的检测四、黏附分子的检测与排斥反应五、非特异性免疫学检测六、细针穿刺病理活检免疫细胞生物学活性的检测T细胞亚群和功能检测：