山东大学 萤火生物科技有限责任公司商业策划书

专业•创新•高效•责任•精干

萤火生物科技有限责任公司

4年技术研发、13家实险室及医院实地调研、20余项独

有技术专利、4项主打产品、四大主要盈利点、19成功案例。

2014年5月份公司提交注册申请

目前在进行项目2项

双光子探针技术处于国际领先水平！

怀揣创业梦想，秉承社会责任。萤火团队期待您的投资!

萤火生物科技有限责任公司

创业足迹

2010年7月，济南，团队成员在实验过程中了解到荧僻针，开始产生浓

厚兴趣。

2010年8月，济南，了解到当前国外探针巨头垄断，国内市场对廉价优质

探针的迫切需求。

2010年10月，国家级晶体翻斗重点实验室,团队成员加入双光子荧粉针

研发课题组，跟随科研团队进行相关研究。

2011年5月，双光子荧光探针项目获得国家大学生创新创业实验计划立项。

2012年4月，济南，团队相关技术与产品累计获得20余项技术专利，发表

10余篇学术论文。

2012年6月，济南，第八届〃挑战杯"创业计划竞赛,探索创业之路。

2012年7月，团队研发成果完成实验室测试，形成成熟产品。

2012年8月，北京，与北京金铭康生物企业交流学习经验。

2012年10月，澳洲，与澳洲PCRA公司洽谈合作事宜.

2013年3月，济南，与齐鲁制药达成合作协议，向其提供免费试用产品。

2013年5月，济南，与山东省齐鲁医院签订合作协议。

2013年8月，济南，于山东大学科技园建立产品生产基地。

2013年10月，济南，为山东大学第二医院提供产品。

2013年11月，济南，与红桥股份投资有限公司达成合作协议。

2014年5月，公司提交申请，准备注册。

2014年7月，北京，清华英特尔夏令营，接受知名导师培训。

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产业•创新•高效•责任•精干

2014年8月，济南，于济南市药谷高新产业园区建设生产基地。

2014年8月，东阳，与浙江天使生物达成项目相关合作协议。

2014年9月，上海，与国家人类基因组南方研究中心沟通产品事宜，获得

较为积极回应。

萤火生物科技有限责任公司

推着信

尊敬的“创青春”全国大学生创业大赛组委会：

我很高兴报存山东大学的唐敬尧等同学凭借以“新型生物双光子

荧光探针”为主背产品的济南装火生物科技有限公司参评“创青春”

全国大学生创业大赛＜

本人是在和关的科研过程中了解到该项目的，发现新型生物双光

「荧光探针染色效果较一般的荧光探针好，同时其激发轮居低、生物相

溶性较好的优点也促使该类架针能够更好地实猊染色效果和更高效地

发挥荧光标氾能力.

此外，本人与该项”的相关负责人交流了解到,景火团队之前参

写了一定的项目实地运营，具有较丰富的实践经蕤。并通过其窗加了

“国家大学生创新创业训经计划课题立项”，取得广事便的成处，相

信他们能以挑战激情与科研人的产谍作风.成功践行大学生坦承社会

货任的创业梦想.

因此,我愿意推荐该团队参加“创青春”仝国大学生创W大赛.

原山东大学勺命科学学院院长

微生物技术诲家重点实验室主任、博七生导师

2014年6月

专业•创新•高效•责任•精干

推荐信

尊敬的“6J宙年”全臼大学生创救大赛和委会：

我很高兴推洋山东大学的唐效光等同学为借以“斯型生物双光了荧光探针”为土

营产慕的济南至火生物科技有限公司参评“01吉存”全国大学4创业人玄，

本人是在与其导师丁晓强教授交流中了髀到该项H，发m布型生物双光子荧光探

计染色效果收破的荧光探ti好,同H其激发储盘低、生物相沿忙较灯的优点也促使

咳类探骨住步更好地实现染色效果布生底效地发挥荧光标记能力.

此外，本人在与该项目相关伙资人深入交流中/修到，作过去2年时间里,山东

大学为火创业团队走方了仝臼多家重点商校女吃空、超研单位和大空•:甲妥院.以国

内巨大的市场容量为切入点，提出了创办集白土研发、生产5消售•体化的生物科技

公司.我认为这对于打饭区外行业垄断，拉动我国生物探工篌城发底具有币大急义.

萤火团队之前参与了一定的灰口实地运营,其日权上返的交送绎63并力这共参

加r“国家大学生创新创业训练i!•划课四立项”，取得了丰域的成果,相俏他们能以掌

'，激情、严遂作风，成功戏行大学生担承叶会责任的创业梦想.

可以行X，山东大学镇火团队加有应”的团队、失边的技术，广芯的前景，我非

常愿急批荐望火创业团队参加“创百台”全国大学生创业大徭,希望这鄂牛轻人能够

实现心中的创业梦想！祝你们或功！

山东大学本新生院常务副丘长

山东大学经济学玩教收、耳上生牙师

20M年5户

O

萤火生物科技有限责任公司

目录

第一章执行总结.........................................11

1.1我们关注什么—荧光探针前沿技术..................12

1.2我们要做什么一新型荧光探针研发及推广............13

13我们如何做一精询定位，扬帆起航...................16

1.4我们如何成功——四大优势..........................17

第二章创业背景.........................................20

2.1政策支持..........................................21

2.2财政投入..........................................22

2.3市场需求与行业现状................................23

2.4萤火实力..........................................23

第三章技术与产品.......................................24

3.1产品简介..........................................25

3.2技术简介..........................................29

33产品优势...........................................34

3.4技术创新..........................................40

第四章市场分析.........................................41

4.1宏观市场分析......................................42

4.2行业竞争分析......................................44

4.3市场细分与评估.....................................51

9

,7『专业•创新•高效•责任•精干

4.4目标市场选择.......................................52

4.5市场定位...........................................53

4.6市场容量与销量预测.................................53

第五章营销策略..........................................56

5.1营销期...........................................57

5.2营销目标...........................................57

5.3产品策略..........................................59

5.4定价策略..........................................69

5.5渠道策略..........................................71

5.6促销策略..........................................77

第六章公司战略.........................................81

6.1公司简介..........................................82

6.2战略规划...........................................84

6.3盈利模式..........................................87

第七章公司组织与管理...................................89

7.1组织架构..........................................90

7.2品牌经理..........................................93

7.3人力资源管理......................................93

7.4生产运作管理......................................97

第八章投资分析........................................100

8.1公司规模以及股本结构.............................101

萤火生物科技有限责任公司

8.2资金运用.........................................102

8.3投及回报.........................................102

8.4指标分析.........................................102

第九章财务分析........................................105

9.1财务预测假设.....................................106

9.2主要财务预测.....................................103

9.3财务报表预测.....................................107

9.4财务报表分析.....................................112

第十章风险投资的退出...................................116

10.1退出时间........................................117

10.2退出方式........................................117

第十一章法律分析......................................120

11.1组建阶段的法律分析..............................121

11.2运行阶段的法律分析..............................122

113环境政策与相关法律法规的支持....................124

第十二章风险分析......................................125

12.1技术风险........................................126

12.2财务风险........................................126

12.3市场风险........................................127

12.4管理风险........................................127

12.5宏观经济风险....................................128

专业•创新•高效•责任•精干

附录...................................................129

第一章执行总结

1.1我们关注什么——荧光探针前沿技术12

1.1.1技术现状12

1.1.2政策支持12

1.13财政投入13

1.1.4市场需求与行业现状13

1.2我们要做什么——新型荧光探针研发及推广13

1.2.1公司简介13

1.2.2主营产品14

1.2.3相关服务15

13我们如何做一精确定位，扬帆起航16

13.1公司资本发展规划16

1.3.2技术产品发展规划17

1.3.3市场开拓发展规划17

1.4我们如何成功——四大优势17

1.4.1团队优势17

1.4.2技术优势18

1.4.3市场优势18

1.4.4财务优势19

专业•创新•高效•责任•精干

第一章执行总结

1.1我们关注什么——荧光探针前沿技术

1.1.1技术现状

荧光探针作为分子生物学和生物化学实验中用于指示特定物质（如核酸、蛋

白质、细般构等）的性质和物理状态、显示样品含量的一种工具性标记分子，在

生物实验极关键性作用。6解I学高速发展的今天，荧沼将■幽需求也在日益

增氏藤前途火生物科臃出僦型荧y睇十，成本较低，适用范围广，将会满足

生物活细胞实验的成像要求，在各科研单位、高校实验室、生物医药企业以及医

院的需求量越来越大。

1.1.2政策支持

生物技术是当今国际科技发展的主要推动力，在全球范围内呈现出加快发展

的态势。我国把生物技术作为科技发展的五个战略重点之一，并把生物等战略性新

兴产业培育发展成为我国先导14、支柱性产业。近年来，国务院相继批«发布了《促

进生物产业加快发展的若干政策》、性物产业发展"■+T'规眇及《

印发生物产业发展规划的通知》却战略性新型产业发展。与此同时,科技部发布

《"十ZE"生物胡泼粽阂》，又峋新发^自十廓生物颉技棣出了新的旨

导原则。

萤火生物科技有限责任公司

1.1.3财政投入

作为战略新兴产业发展的重点，生物医药越来越受到各方面的高度关注。来

自国家发展与改革高技术司新兴产业处的信息显示，投资发展方面，发改委与财

政部启动实施了新兴产业计划，目前设置了141只创业投资基金，总规模达到

了390亿元,生物医药领域批g建设了28只创业投资基金，募集了73.6亿元，

孵化了一批创新企业。

1.1.4市场需求与行业现状

当前，生物技术正在进入大规模产业化阶段,生物医药日趋成熟，生物技术引

领的生物产业将成为21世纪经济发展新的增长点。码!J好政策的指引和生物工艺

日益成熟的情况下，生物技术潜在的广阔市场逐渐显现。目前，全国包括生物医药

研究单位、大型医疗机构以及高翔4学研究院所在内的各个相关机构在开展相关课题

研究时存在许多技柳颈，在检5蝌研技术以及核心专O支术等领域亟待突破。创新

性、突破性的生物技术发展有助于改变当前生物科研市场核。技术依赖I勒陞断、技

术引进成本高昂的脾,满足国内生物研施术的巨大需求

1.2我们要做什么—新型荧光探针研发及推广

1.2.1公司简介

萤火公司是以生产具有自主知识产权的多种荧光探针为主要业务并提供围绕

荧光探针相应服务的生物类高新技术有限责任公司。

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•创新•高效•责任•精干

1.2.2主营产品

我们萤火公司的主营产品是双光子荧光探针。

图122探针示意图“

荧光探针是分子生物学和生物化学实验中用于指示特定物质（如核酸、蛋白

质、细胞结构等）的性质或物理状态的一类标记分子。用于定量及定性分析，在

分子生物学、病理学、生理学方面的研究中具有重要意义。本公司的主要业务围绕

以下四种荧光探针展开。

•单、双光子半胱氨酸荧光探针

•单、双光子酸性细胞器荧光探针

•单、双光子线粒体荧光探针

•用于活细胞中RNA和核仁成像的荧光探针

上述四类探针是公司前期的主营产品，综合来说，我们的双光子荧光探针与

一般的市售探针相比具有以下几种优势：

•具有卓越的成像效果

•使实验操作更为便捷

•制备工艺简单，成本低

•操作过程更为安全

萤火生物科技有限责任公司

因此我们的探针产品作为生理和病理学研究用简捷、直观的生物检测试剂，

在激光激发荧光生物标记领域具有潜在的应用价值，并将在生物医药研究单位、

大型医疗机构以及高等科学研究院所在内的各个相关机构取得广泛应用。

以上相关探针具体介绍详见第三章。

1.2.3相关服务

•探针个性化定制与生物试剂盒

针对部分客户对荧光探针产品提出的

个性化的需求，公司可以为其进行荧光探

针专业化定制，在协议规定的时间为客户提

供符合个性化要求的荧光探针，并保证交付

荧光探针产品的保密性、完整性、可靠性和

可用性。同时，为了使实验人员能够摆脱繁

图1.2.3试剂盒」

重

的试剂配制及优化过程，公司在设计合成探针的同时可触供相应的实验专用试剂

盒，盒内包括该实验所需的各种基本试剂（如PH缓冲剂、稀释剂、培养基、抗

生素以及培养和观察细胞所用的小型仪器等）及详尽的使用说明，可以增强实验

的可操作性及精确度。同时公司会提供完善的售前售后月艮务。

•实验外包服务、染色图片处理服务以及售前、售后服务

公司利用具有独特竞争优势的专利技术和技术过硬的实验团队，为广大具有

需求的科研单位、医院和医药企业提供专业生物科技实验外包^务，将客户的实验

项目在萤火的实验室中实现，并将最终结果与合成过程春真实反馈给客户。

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芋村•创新•高效•责任•精干

公司力争将萤火生物科技打造成为具有全国竞争力的实验室综合服务提供商。同

时，公司提供染色图片处珊艮务，公司通过建立完善的生物科技研究平台、规范的

技术月躇流程和严格的质量控制本系,为科研机构、医院、医药公司敏供专业的细

胞检测技术和图片染色姬另外，为使客户获得较为满意的月躇，公司设立

多种途径为客户提供售前咨询及售后实验指导服务。

1.3我们如何做—精确定位，扬帆起航

1.3.1公司资本发展规划

萤火生物科技有限公司初始注册资金为300万元，其中团队成员持股比例

为注册资本资金足以应对经营活动中的资金需求主要因为依托山东大

67%O，

学晶体研究所对于学生创业的西寺，公司在创业初期生产以低价形式租用晶体研究

所实验设备，因而无需进行厂房及设备骷股资；且公司落户于山东大学科技园，初期

资金需求较少。

为支持公司在成长期的发展战略及资金需求，将购买公司使用的相关专利

（前两年为支付专利使用费），并将进行增资，注册资本变为500万元。增资

来源包括利润转分配、团队成员自筹资金100万元和吸引另一家风险投资出资

100万元。增资后团队成员持股比例为55%。

O

萤火生物科技有限责任公司

1.3.2技术产品发展规划

作为学生创业实体，萤火生物科技有限责任公司得到了山东大学对学生创业

的支持。经与山东大学协商，在公司的导入期与山东大学签订了9项专利许可使

用（独用）合同，并计划与2014年末以现金形式与山东大学签订对公司业务有

实际帮助的专利转让合同。

萤火在发展过程中也严格地将公司每年的净利润的15%作为公司的研发基

金，专门与山东大学晶体研究所、生命科学学院等科研单位合作开展公司相关技术

与后续产品的研发，保证萤火的第二代等后期产品按计划如期进入市场。

1.3.3市场开拓发展规划

萤火将紧随国家〃十二五"生物技术发展规划的战略步伐，利用自身的创新能

力，依托山东大学雄厚的科研实力，推出低成本、高性能的双光子荧光探针，辐

射济南及周边地区，深耕山东市场。随着公司规模、实力的壮大，在继续巩固原

有山东市场的基础上有步骤地开发全国市场，在全国范围内断型生物探针研发逐

步拓展自己的业务范围，并以高校实验室、科研单位密集的1晾、上海等作为主要二

级市场。

1.4我们如何成功—四大优势

1.4.1团队优势：架构合理，顾问团队强大

萤火创业团队成员来自于山东大学经济学院、管理学院、生命科学学院、晶

育业•创新•高效•责任•精干

体研究所的四个学院的五个专业,其核心'技术由国家重点实验室一山东大学晶体

研究所的于晓强瘫提供，并由山东大学经济学献授王兴旭授指导创业。

1.4.2技术优势：效果好，壁垒高，成本低

(1)7项专利+多篇顶级论文

萤火的荧光探针技术获得山东大学

生命科学学院、医学院多个课款组实践认

可，并在国内外顶级期刊中发表学术论文

多篇，并拥有国家级发明专利7项。MJ这用/IwnfMMtKflVMB6riiumSrsrTw

图1.4.2专利

(2)研发成本低

生产荧光探针的设备成本较低，约80万人民币，制备荧光探针的实验室所占

面积小，50M2即可，制备荧光探针所用原料成本低廉。仅就目前而言，萤火团

队尚处于起步阶段，其技术水平已经可以和日本的Dojingd。以及美国的

molecular两家公司相媲美。

1.4.3市场优势：市场容量大，进入优势强。

荧光探针是生物科研中最为常用的试剂之一，涉及的实验种类广泛、消耗量

可观。萤火生物科技的荧光探针成本较低、实验效果显著，已在山东大学生命科

学学院、化学与化工学院、医学院以及齐鲁医院的多个课题研究中得到应用。

O

萤火生物科技有限责任公司

1.4.4财务优势：财务框架完备合理，可行性高

(1)股本结构合理

萤火科技初始注册资本为300万元，第二年年末，注册资本达5」500万元，

团队成员持股比例为35%,于教授持股20%,预计吸引两家风投,分别持股为

20%,25%

(2)盈利能力强

预计萤火科技第五年销售收入达到为1870万元,实现净利润为717万元。

萤火科技的经营活动五年累计产生现金2574.19万元，十年净现金流量为

1934.95万,萤火科技能保持良好的财务状况和现金流动性。

(3)项目可彳济生高

财务分析表明，萤火科技的五年期预计项目净现值为593.69万元，内含报

酬率为23.8%,动态投资回收期为2.6年,平均销售净利率16.88%,萤火科技

具有稳定的获利能力。

(4)合理的风险投资退出

萤火科技设定的风险投资退出时间为进入后4至5年(即2020年左右)。

风险投资退出首选方式为管理层回购。此夕公司为风险投资退出准备的备选方案

为国内创业板上市，根据财务强表预测,2019年左右萤火科技完全满足创业板上

市的财务要求。

O

第二章创业背景

2.1政策支持21

2.2财政投入22

2.3市场需求与行业现状23

2.4萤火实力23

萤火生物科技有限责任公司

第二章创业背景

2.1政策支持

生物技术是当今国际科技发展的主要推动力，生物产业已成为国际竞争的焦

点，对解决人类面临的人口、健康、粮食、能源、环境等主要诃题具有重大战略意

义。近年来，生物技栉口产业在全球范围内呈现出加快发展的态势，全球生物产业

的销售额每5年翻一番，年增长率高达30%。我国也大力推动生物产业的发展,

把生物技术作为科技发展的五个战略重点之一，并把牛物等战略性新兴产'11，培育发

展成为我国先导性、支柱性产业。2007年，国务院《生物产业发展十一五规划》

出台后,行领导即向全行进行了转发并提出了贯彻意见。此后，与国家发改委联合

发布《国家发展改革委、国家开发银行关于印发共同推动我国生物产业融资工作意见

的通知》、《国家开发银行生物产业疆项目开发评审指导意见》和《关于生物产业

发展情况及国家开发锄推货K策的建议》。2009年，国务院关于《促进生物产业

加快发展的若干政策》颁布后，彳亍领导也向全行转发并发布了贯彻执行意见。这些

文件的发布，标志着国开行正式将生物产业列入重要的开发领域,并形成了国开行生

物产业信贷政策。国家开发银行陈元董事长以战略家的思绮口目胱，提出生物产业将

是国家重点方静口发展的战略性产业，开发银行第只极介入该领或国开行陈元董事

长还两次为中国生物产业大会题词：〃发挥开发银行融资推动作用，促进生物产

业大发"；"汇聚精英，展现精彩，共谋发展〃。姚中民、李吉平副行长也分

别在第三次生物产业大会发表演讲。

这一系列的政策扶持，大力推进了生物技术研发和创新成果产业化，产业化

>1s创新s商皴sit:精丰

项目大幅增加，市场融资、外资利用和国际合作取得积极进展，生物产业产值以年

均22.9%的速度增长，2011年实现总产值约2万亿元。2011年11月，为进一

步促进我国生物科技与产业的快速发展，科技部发布《"十二5〃生物技术发展规

划》,对创新发展自主核心的生物高新技术提出了新的指导原则，要求充分吸纳前

沿生物技术的最新成果,加强协同创新，形成自主核心技术，培育原始创新成果,

集成各方力量，支撑战略性新兴产业发展。2012年12月，国务院在

《国务院关于印发生物产业发展规划的通知》中对生物产业重点领域和主要任务

进行了规范，其中对生物制造产业提出了〃开辟多元途径,提高产品经济性，推

动生物制造产业规模化发展”的要求。

2.2财政投入

《"十二5”生物技术发展规划》强调，国家将设立战略性新兴产业发展专项

资金，建立稳定的财政投入增长机制，增加中央财蹴入，创新西寺方或国家将

整合政解U支计划（基金）和科研基础条件建设等资金，加大财政对生物技术及产

业的文寺力度，同时将制定完善的税4:寺政策，鼓励金融机构力口大信贷支持，引

导金融机构建立适应生物等战略性新兴产业特点的信贷管理制度，促进金融机构

加大对战略性新兴产业发展的支持力度。发挥多层次资本市场的融资功能，大力发

展债券市场，大力发展创业投资和股权投资基金，鼓励有关部门和地7逾府设立创业

投资引导基金，引导社会资本进入生物技术领域创4好殳资。同时，促进产学研结合，

促进生物技术企业创新能力建设；完善知识产权制度，建立良好的激励制度；创新

人才的引进和培养模式，扩大国际与地区合作。

来自发改委高技术司新兴产业处的信息显示，投资发展方面，发改委与财政

萤火生物科技有限责任公司

部启动实施了新兴产业计划，目前设置了141只创业投资基金，基金总规模达

到了390亿元，发改委与财政部批复建设了28只创业投资基金，募集了73.6

亿元，这些基金孵化了一批创新企业。

2.3市场需求与行业现状

当前，生物技术正在进入大规模产业化阶段，生物医药行业日趋成熟，生物制

造、生物能源、生物环保产业快速兴起，生物技术引领的生物产业将成为21世

纪经济发展新的增长点。目前，全国包括生物医药研究单位、大型医疗机构以及

高等科学研究院所在内的各个相关机构在开展相关课题研究时存在不少技术瓶

颈，在检测科研技术以及核心专利技术等领域亟版破。创新性、突破性的生物

技术发展有助于改变当前生物科研市场核支术依赖国夕陛断、技术引进成本高

昂的现状，满足国内生物研究技术的巨大需求。

在生命科学高速发展的今天，荧光探针的需求也在日益增长。而我们的荧光

探针产品作为分子生物学和生物化学实验中的一种工具性标记分子，在生物实验

中起到关键性作用。萤火凭借核心技术赢得核心利润，力争依托公司的先进技术

迅速进入并成为生物探针行业的领航者。

2.4萤火实力

萤火生物科技紧跟国家政策步伐，把握市场迫切需求，依托核心领先技术，

开拓荧断针市场。萤火生物科技拥有专业的生物科技研发团队，以生产具有自主

知识产权的多种荧光探针为主要业务并提供围绕荧光探针相应a艮务。萤火积极探索

生物领域，旨在为生命科学的发展贡献t分力量，务实打造萤火品牌。

第三章技术与产品

3.1产品简介25

3.1.1单、双光子半胱氨酸荧光探针25

3.1.2单、双光子酸性细胞器荧光探针26

3.1.3单、双光子线粒体荧光探针27

3.1.4用于活细胞中RNA和核仁成像的口比咯口比陡盐类荧光探针28

3.1.5探针试剂盒生产29

3.2技术简介29

3.2.1产品生产技术269

3.3产品优势34

33.1单、双光子半胱氨酸荧光探针35

3.3.2单、双光子酸性细胞器荧光探针36

3.3.3单、双光子线粒体荧光探针38

3.3.4用于活细胞中RNA和核仁成像的口比咯毗咤盐类荧光探针39

3.4技术创新40

萤火生物科技有限责任公司

第三章技术与产品

3.1产品简介

萤火公司是以生产具有自主知识产权的多种荧光探针为主要业务，同时为某

些需要特殊要求的实验量身打造特定的探针，出售实验试剂盒,并为同行业各大

高校相关实验室、国内相关科研机构、具备科研能力的大型医院提供实验方案以及

实验技术指导的生物类高新技术有限责任公司。公司依托双光子引发剂及其合成

方法与微加工技术、用于双光子核酸荧粉针M阳离子咔蚌类化合物的研发等技术

背景,成功生产出一系列价格低廉、适用范围广、作用效果好的单、双光子荧光探

针。

3.1.1单.双光子半胱氨酸荧光探针

(1)产品名称：单、双光子半胱氨酸荧光探针

(2)产品用途：半胱氨酸作为构成蛋白质的二

十种氨基酸之一,含有藻基的半胱氨酸在细胞的

生理过程中起着不可替代的作用，本探针可以实

现细胞内半胱氨酸的荧光成像，并给出细胞内半3.1.1单、双光子半胱氨酸荧光探针

胱氨酸表达与分布的信息。

(3)产品背景：尤其是近几年来，双光子荧光三维成像技术发展迅速，而专用

的双光子荧光探针的开发却未及时跟上,特别是在细胞内专一性识别半胱氨酸的

双光子荧光探针国际上未见报道。这在很大程度上制约了利用双光子三维成像技

&

9

芋村•创新•高效•责任•精干

术进行细胞内半胱氨酸的成像与观测。因而开发、研制具有实际应用价值单、双

光子半胱氨酸荧光探针是当务之急。

(4)产品特性：本产品的咔陛口比口定醛化合物是一类新型的半胱氨酸选择性识别

荧糊莲份子，与其功能相近的单光子半胱氨酸荧光探针比，本产品所述咔嗖口比碇

醛类化合物具有价格低、激发能量低、显色强、生物相溶性较好的特点。

(5)技术领域：本产品涉及一种单、双光子荧光探针及其应用，尤其涉及一种

咔嗖毗嚏醛类化合物的单、双光子半胱氨酸荧光探针及其应用。

(6)使用效果：双光子性能好、激发能量低、显色强、生物相溶性较好、双光

子荧光活性吸收截面大等，已在实验室中完成，并在齐鲁医院中试用，取得良好

效果。

3.1.2单.双光子酸性细胞器荧光探针

(1)产品名称：单、双光子酸性细胞器荧

光探针

(2)产品用途：实现细胞内酸性细胞器的

荧光成像，并给出酸性细胞器内的pH分

布的信息。图3.1.2单、双光子酸性细胞器荧光探针

(3)产品背景：酸性细胞器如溶酶体是真核细胞中具有重要生理功能的细胞器

之一，尤其是在细胞内消化，细胞凋亡和自体吞噬等生理活动中起着关键作用。

同时研究发现，酸性细胞器内pH值异常和癌症关系密切。因此，实现细胞内酸

性细胞器的荧光成像，并给出酸性细胞器内的pH分布的信息,有着重要的生命科

学与医学价值。

萤火生物科技有限责任公司

(4)产品特性：本产品的探针具有适用范围广，价格低，能在活性细胞中专一

荧光成像酸性细胞器的特点；其作为单光子上匕率型和双光子光开关型酸性细胞器

荧光探针应用前景广阔。

(5)技术领域：本产品涉及一种单光子比率型和双光子光开关型荧光探针及其

应用,尤其涉及一种咔嗖口ttl庇类化合物的单、双光子酸性细胞器荧)锵针及其应用。

(6)使用效果：适用范围广、成本低、专一性强等已在实验室中完成,并在齐

鲁医院中试用,取得良好效果。

3.1.3单.双光子线粒体荧光探针

(1)产品名称：单、双光子线粒体荧一、

光探针「心。

(2)产品用途：细胞内线粒体荧光探八飞起左广

针成像，并给出细胞内线粒体数量和5

HO

分

布的信息。图3.1.3单、双光子线粒体荧光探针

(3)产品背景：线粒体是真核细胞内具有重要生理功能的纽胞器之一，是细胞

进行呼吸作用产生能量的重要场所。同时，研究发现，线粒体的数量、分布与细

胞生命活的旺盛程度密切相关，在细胞增殖、分化、细胞间信号传导、细胞内自

由基生成等生理活动中起到重要作用；并与癌症，老年痴呆等疾病关系密切。因此,

开发新型细胞内邮体荧光探针成像，并给出细胞内捌体数量和分布的信息，有

着重鳏生命4^医学价值。

(4)产品特性：本产品的标汜线粒体荧光探针与市售线粒体荧光探针比，具有

育业•创新•高效•责任•精干

价格低、双光子性能好、激发能量低、显色强、生物相溶性较好、能在活性细胞

中专一荧光成像线粒体的特点，在激光激发荧光生物标记领域具有潜在的应用价

值。

(5)技术领域：本产品涉及一种线粒体荧光探针及其应用，尤其涉及一种叱咤

阳离子类化合物的单、双光子线粒体荧光探针及其应用。

(6)使用效果：价周氐、双光子性能好、激发能量低、显色强、生物相溶性较

好等，已在实验室中完成，并在齐鲁医院中试用，取得良好效果。

3.1.4用于活细胞中RNA和核仁成像的毗咯毗咤盐类荧光探针

(1)产品名称：用于活细胞中RNA和核仁成

像的毗咯毗陡盐类荧光探针。

(2)产品用途：用于活细胞中RNA和核仁的

成像。图3.1.4核彳巾像探针

(3)产品背景：核仁和细胞质中的RNA的荧光成像对生物化学和生物医药是

非常有意义的。相比众多的商业DNA探针，RNA探针非常少，因为现有核酸

探针TS与双链DNA有较大的亲f口性，且小分子与RNA的作用机理尚不清楚，

所以RNA探针的研究是比较困难的。

(4)产品特性：本产品提供的叱咯叱碇盐类荧光探针是一类新型的RNA选择

性识别荧光探针分子，与其功能相近的核仁荧光探针比，本产品所述探针具有膜

通透性好、显色强、复染兼容性好、光稳定性较强的特点，预示其作为RNA和

核仁荧光探针具有广泛的应用，有望开发为RNA和核仁相关的生理和病理学研

究用简捷、直观的生物检测试剂。

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(5)技术领域：本产品涉及一种荧光探针，尤其涉及一种用于活细胞中RNA

和核仁成像的口比咯毗咤盐类荧光探针。

(6)产品效果：适用范围广，膜通透性好，细胞毒性低，已在实验室中完成，

并在齐鲁医院中试用，取得良好效果。

3.1.5探针试剂盒生产

为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配制

及优化过程，公司在设计合成探针的同时可以

提供相应的实验专用试剂盒,该试剂盒以探针

为主体，同时包括该实验所需的各种基本试剂

(如PH缰中剂、稀确人培养基、抗生素以及

培养和观察细胞的小型仪器等)及详尽的使用说明，川凰卷砥翩嬲酉酸板'

精确度。

3.2技术简介

3.2.1产品生产技术

(1)单、双光子半胱氨酸荧光探针

首先在咔理氮上引入乙基、丁基或羟乙基，然后^用Vilsmeier反应合成了

相应咔嘤的单醛，然后将咔嘤单醛漠化，最后利用Hack反应得到最终产物咔嘤

毗陡醛类化合物。

制备反应式如下：

专业•创新•高效•责任•精干

首先在咔嗖氮上引入乙基、丁基或羟乙基，然后利用F-C反应合成了相应

乙酰基咔嘤，然后将乙酰基咔监臭化，最后^用Hack反应得到终产物——咔嘤

毗嚏类化合物。

制备反应式如下：

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或

专业•创新•高效•责任•精干

首先在咔嘤氮上引入乙基、丁基或羟乙基，然后利用F-C反应合成了相应

乙酰基咔嗖,然后将乙酰基咔嗖演化,再进行Heck反应，最后将口比嚏离子化,

得到最终产物叱嚏盐类化合物，其中：所述叱口定盐类化合物优选是4-(2-(6-乙酰

基-9-乙基咔嘤3)-乙烯基)-己基毗口定碘盐。

制备反应式如下：

&

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(4)用于活细胞中RNA和核仁成像的毗咯毗咤盐类荧光探针

在此咯氮上引入乙基、丁基或乙醛基，然后^用Vilsmeier反应合成了相应

的单醛，最后^用Knoevenagel反应得到最终产物叱咯毗陲类化合物。具体

的，上S(E)-l-(2-羟乙基)-4-(2-(1-甲基-1H-叱咯2)乙烯基)口比咤碘盐化合物的

制备反应式如下：

pf>edefine

(1c)

专业•创新•高效•责任•精干

3.3产品优势

3.3.1单.双光子半胱氨酸荧光探针

(1)专一性：本产品所述荧光探针能够在活细胞中专一性的成像半胱氨酸，荧

光显微图像说明半胱氨酸主要富集在细胞的核周区域。

(2)成本低：与其功能相近的单光子半胱氨酸荧光探针比,本产品所述咔嘤口比

陡醛类化合物的生产成本更低。

(3)性能优良：与其功能相近的单光子半胱氨酸荧光探针比，本产品所述咔理

毗咤醛类化合物具有激发能量低、显色强、生物相溶性好的优势,并具有双光子

荧光活性吸收截面大的特点。

(4)适用范围更广。

图1

图2

图1:3-甲酰基-6-(4-乙烯基毗碇)-9-乙基咔0^对活性Hela细胞进行染色在488纳米激光辐照下

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得到的单光子荧光显微照片。

图2:3-甲酰基-6-(4-乙烯基毗碇)-9-乙基咔嗖对活性Hela细胞进行染色在800纳米激光辐照下

得到的双光子荧光显微照片。

3.3.2单.双光子酸性细胞器荧光探针

(1)选择性强：能在活性细胞中专一荧光成像酸性细胞器，能够在活细胞中高

选择性标记酸性细胞器，在细胞核周区域呈现出明显的荧光显微图像

(2)成本低：与其功能相近的单光子酸性细胞器荧光探针比，本产品所述咔嗖

毗碇酮类化合物的生产成本更低。

(3)观察效果好：激发能量低、显色强、生物相溶飒?、击方的膜蜂,

本产品的咔嘤毗碇类化合物具有高的光开关匕q口双光子荧光活性吸收截面大的特

点。

(4)适用范围广，应用前景广阔。

9

\专业•创新•高效•责任•精干

图为3-乙酰基-6-(4-乙烯基口比淀)-9•乙基咔嗖对活性SiHa和Hela细胞进行染色在宽场荧光显微

镜下得到的荧光显微照片。其中a图为用3-乙酰基-6-(4-乙烯基毗咤)-9-乙基咔理染色得到的荧

光显微照片；b图为明场照片；c图为左中两图合并图即共定位图。

3.3.3单.双光子线粒体荧光探针

(1)定位能力强：本产品的叱咤盐类化合物还具有高的线粒体定位能力和双光子

荧光活性吸收截面大的特点。

(2)使用效果好：本产品所述叱嚏盐类化合物具有双光子性能好、激发能量低、

显色强、生物相溶性较好的特点。

(3)成本低廉：与其功能相近的线粒体荧光探针比，本产品所述毗陡盐类化合物

成本更为低廉。

(4)适用范围广，在激光激发荧光生物标记领域具有潜在的应用价值。

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专业•创新•高效•责任•精干

图3.3.3a此图说明与商业化探针相比，本线粒体荧光探针双光子性能更好。

Hg.S.Confocalfluomcencrim4griofSiHacellsstainedw・hCAI(2)orCAEI(2pMXHoechst33342(5>iM)andD307(5pM).(j)lnMgexofHoechst33342.4^~405001

4^-409-475nm:(b)Inu^aofCAI(I)orCAEI(IIX4M-4Q5mn.518-569nm;(c)InuresofD307.小-633mn.4下一639-69]nm：(d)overhyimagesofa-c

Bar二20Mm.(FOrinterpretationofthem丽encestocolorinthisfifUfckjtend.therc«k(isrcfefred(othewebversonofthisartde.)

图3.3.3b此图说明荧光探针的复染性更好。

3.3.4用于活细胞中RNA和核仁成像的D比咯毗嚏盐类荧光探针

(1)性能优良：膜通透性好、显色强、复染兼容性好、光稳定性较强

(2)应用前景广阔：适用范围广，其作为RNA和核仁荧光探针具有广泛的应

用,有望开发为RNA和核仁相关的生理和病理学研究用简捷、直观的生物检测

试齐！L

(3)生产成本低。

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FixedbymethanolFixedbyparaformaldehyde

Ftj>.3.TheRNasedigestexperimenLFluorescencemwgingofHeUcellsstainedwthSYTORNA-Seiea,PYandINbeforeorafter(reatmemw«hRNase(30ug/ml)for2hJt37℃.

Compoundconcentration:20河.PYandIN：1pw.RNA-Select;InoitMCionrime:30min.ExcilJCioaw4vdength:460-495nm：Detectionwavelength:>510rvn.Bar20pm.

图3.3.4a加RNA消化酶后荧光几乎消失，表面PY和