医院实验室信息管理程序人民医院检验科管理文件人民医院质量管理体系文件 生化标准操作规程

成都市第二人民医院检验科管理文件文件编号：CDEY-LAB-SH

版本/修订号:B/0

主题内容生效日期：20120101

生化标准操作规程第2页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

生

化

标

准

操

作

规

程

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ01

SOP版本/修订号:B/0

生效日期:20120101

主题内容临床标本采集程序第3页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

临床标本采集程序

1.目的：

规范临床标本的采集，减少实验前的影响因素。

2.范围：

适用于为协助疾病诊断和治疗而进行的临床生化样品采集活动。临床样本包括血液、尿

液、胸腹水等各种体液。

3.职责：

临床生化实验室：指导临床各科室正确采集标本，提高实验结果的准确性。

4.程序：

4.1静脉血的采集：

4.1.1静脉血标本采集前病人应注意的问题：

4.1.1.1避免剧烈运动，一般主张抽血前24小时不做剧烈运动，清晨取血，住院病人可在

起床前抽血，匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后取血。

4.1.1.2注意合理饮食。除了急诊或其它特殊原因外，一般主张在禁食12小时后空腹取血,

延长空腹时间（饥饿）或餐后血液的化学成分都会变化.饮酒对实验亦有影响。

4.1.1.3药物的影响。很多的药物进入人体后可影响某些化验项目的结果，病人在化验前

应尽可能停服对实验有干扰的药物。

4.1.2静脉血标本采集前医生、护士应注意的问题：

4.1.2.1.检验申请单填写要求：检验申请单用钢笔或黑笔填写，使用正楷字，字迹清楚,

填写完整。填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标

本采集年月日时、申请医生及采样者签名。

4.1.2.2采用一次性真空采血管，多项化验时应首先将血注入血常规管，然后是抗凝管（注

意要正确使用抗凝剂），最后是非抗凝管。

4.1.2.3采血时的体位建议以坐位5分钟后取血为宜，止血带使用应少于1分钟，以免引

起血液淤滞，造成血管内溶血或血液某些成分的改变。

4.1.2.4当一侧手臂输液时应从对侧手臂取血，以降低对血糖、血钾等实验结果的影响。

4.1.2.5血标本应防止溶血，影响溶血的因素有:使用止血带时间过长；抗凝管使用不当或

抗凝混合时过度振荡；容器污染；血液中泡沫注入试管；标本放置时间过长；突然受冷或受

热及离心力过大等。

4.1.3静脉血标本采集后实验室应注意的问题：

4.1.3.1标本采集后应及时分离血清，标本应尽快检验。

文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ01

成都市第二人民医院检验科生化SOP版本/修订号:B/0

生效日期:20120101

主题内容临床标本采集程序第4页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

4.1.3.2标本应避免光直接照射。

4.1.3.3实验室温度应保持在15℃—25℃,防止标本水分蒸发，标本浓缩。

4.1.4血脂测定标本的采集

4.1.4.1除总胆固醇（）测定不一定用空腹血外，测定甘油三脂、脂蛋白与载脂蛋白时应

禁食（可少量饮水）至少12小时后抽血。

4.1.4.224小时内不饮酒，以免影响甘油三脂水平。

4.1.4.3对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，近期内体重稳定，无急

性病、外伤、手术等意外情况。

4.1.4.妊娠后期各项血脂都会增高,应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映其基本血

脂水平。

4.1.4.5注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药、嘎嗪类利尿剂、B受体阻

滞剂、免疫抑制剂、某些降压药、降糖药、胰岛素及其它激素制剂等，在查血以前应根据所

用药物的特性停止用药数天或数周，否则应记录有关药物的情况。

4.1.4.6对体检对象及作前瞻性观察者，应注意采血的季节，因为血脂水平有季节性变动。

4.1.5采血操作步骤：参见《静脉采血程序》

4.1.6真空采血管的正确使用：肝功、肾功、血脂、电解质、体免1、风湿三项、心肌

酶谱常规生化使用红色管（没有抗凝剂管）；血氨、糖化血红蛋白、心肌损伤三项使用紫头

管（EDTA抗凝）。

4.2动脉血标本采集:用于血气分析

4.2.1用一次性肝素化注射器，从患者动脉取血后，用一块小橡皮塞针头以隔绝空气，并

将注射器放在手中双手来回搓动，充分混匀。

4.2.2抽血过程中出现的小气泡须在抽血后立即排出，血液不得放置过久，应立即送检，

塑料注射器常温下在采血后15nlin内完成检测。若超时，就必须使用玻璃注射器，抽血后排

除气泡封闭，置于4-8℃冰箱或冰水混合物中，可以稳定lh。

4.2.3若自制肝素化注射器，应避免注入过多的肝素溶液，使测定结果产生偏差。

4.2.4请注明病人体温、Hb含量、及吸氧流速。

4.2.5采血步骤：参见《动脉采血程序》。

4.3门诊常规生化检查星期一到星期五抽取静脉血，周末只采急诊项目进行检测。

4.4尿液标本的留取：

4.4.124小时尿液标本：

4.4.1.1准备清洁干燥带盖的广口容器。

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ01

SOP版本/修订号:B/0

主题内容生效日期:20120101

临床标本采集程序第5页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

4.4.1.2病人于晨7时将尿全部排尽弃去，然后开时留尿液，将24小时内历次所排尿液均

留于容器中，包括次日晨7小时所排最后一次尿。

4.4.1.3测量尿液总量（ml数）并记录在化验单匕将全部尿液混匀后取10-20ml置于清洁

干燥容器中立即送检。

4.4.1.4若天气炎热，可根据检验要求在第一次尿液倒入后再加入适量防腐剂：甲苯（二甲

苯）：用于尿液生化检验，按甲苯0.5ml/100ml尿加入。

4.4.1.524小时尿中不能混入异物。

4.4.2常规尿检查标本：

4.4.2.1使用清洁干燥容器，住院病人以清晨第一次尿为主，门、急诊患者可随时留取新

鲜尿液10-20ml送检。

4.4.2.2标本应及时送检。

4.4.2.3尿中不能混入异物。

4.5脑脊液、浆膜腔积液：

4.5.1送检和检查必须及时。

4.5.2为防止凝固，加入100g/L的EDTA钠盐0.1ml可抗凝6ml。

5.相关文件

《静脉采血程序》《动脉采血程序》《生化室标本管理程序》

《不合格标本登记表》

文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ02

成都市第二人民医院检验科生化SOP版本/修订号：B/0

生化室仪器性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第6页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

生化室仪器性能评价操作程序

1.目的：

为了监测生化分析仪的技术性能，评价其精密度、准确度等是否能达到有关标准。

2.范围：

临床生化分析仪器

3.评价指标及方法：

3.1仪器精密度评价：根据美国国家实验室标准委员会（NCCLS）EP5-A文件的要求分为如

下步骤：

3.1.1仪器熟习阶段：用5天时间熟习仪器的日常操作、调试、维护和保养等程序。

3.1.2熟习文件阶段：熟习NCCLS文件关于精密度评价的内容，时间5天，内容包括评价

目的、要求、方法、试验步骤、统计处理、注意事项和常规质量控制等。

3.1.3实验设计阶段：根据文件要求设计试验方案。包括在整个实验中，使用的试剂、校准

品和质控品等等。

3.1.4实验室评价阶段：

3.1.4.1初步的精密度试验：

在熟习和设计工作结束后，进行一次批内初步试验。方法：连续测定一个适宜的试验物

20次。计算结果的标准差和变异系数。结果：如发现结果与期望结果严重不符，应与制造

商联系在问题得到解决后再继续下一步正式试验。

3.1.4.2正式精密度评价试验：

根据设计的方案，选择具有医学决定水平正常和异常两个浓度的混合血清样本，该仪器

测定项目选定以后，对每个项目、每个浓度的样本进行双份测定；每天进行2批试验，上、

下午各测定一次，每个项目连续测定20天。每批同时作质控品的测定。将所测定结果进行

统计学处理，计算批内、批间精密度和总精密度。

3.1.5结果计算：

3.1.5.1批内精密度的评价按下公式计算：

I2

X£(Xg-Xj

9]卜]____________

SM=S

WT41

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ02

SOP版本/修订号：B/0

工.山声生化室仪器性能评价生效日期：20120101

主题内容+

操作程序第7页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

1=总天数（20天）

j=一天内的批数（2批）

Xi“=重复1次结果，j批在第i天

X“z=重复2次结果，j批在第i天

3.1.5.2总精密度评价按以下公式计算：

E（4-

A=、...........-

N21

S=A2-S批内>2

1=天数（2批/天）

Xu=第i天第1批的平均结果（平均重复2次）

X,z尸第i天第2批的平均结果（平均重复2次）

B=

S天同2=B2-A2/2

1=天数（2批/天）

乂.=第i天所有结果的平均值

Xi=所有结果的平均值

SJ=S批内2+S»2+S^2=（2B2+A2+Swr2）/2

3.1.5结论：批内标准差s应为美国临床试验室室间质量评价允许误差（TE）的1/4,

天间标准差S应为该允许误差的1/3,对达到这样要求的可认为它的随机误差属于可接受的

低水平。

3.2仪器准确度评价：根据美国国家实验室标准委员会（NCCLS）EP9-A2文件的要求分为

如下步骤：

3.2.2熟习文件阶段：用5天时间熟习仪器的日常操作、调试、维护和保养等程序。

熟习NCCLS文件关于准确度评价的内容，时间5天，内容包括评价目的、要求、方法、

试验步骤、统计处理、注意事项和常规质量控制等。

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ02

SOP版本/修订号：B/0

生化室仪器性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第8页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

3.2.3设计阶段：根据文件要求设计试验方案。包括在整个实验中，使用试剂、校准品

和质控品等等。

3.2.4实验室评价阶段：根据设计的方案，分析系统为评价仪器+配套的试剂、校准品、质

控品，作为试验方法，对比系统为对比仪器+与分析系统相同的试剂、校准品、质控品，作

为对比方法试验，收集分析物浓度在医学决定水平范围内均匀分布的当天新鲜血清，不要使

用已知对任一实验有干扰的样本（如溶血），测定从低于参考范围的低限到高于参考范围的

高限进行。每个项目至少选择40份临床样本，每天测8个样本，将样本按次序排列，分别

在评价仪器和对比仪器上测试，先测试一遍，每个样本测双份，做双份第2次测定时，样本

顺序全部倒过来。第一次序号为1、2、3、4、5、6、7、8,第2次序号为8、7、6、5、4、

3、2、1连续测定5天时间。将评价仪器测定结果分别与对比仪器的测定结果作好记录进

行比较，用SPSS统计软件，作统计学处理，作预期偏差分析和相关回归分析，并计算相关

性和准确度分析。

3.2.5实验数据的收集和处理：

3.2.5.1对实验数据的初步检查：设参比方法测定结果为x值，试验方法测定结果为y值,

40份样本得到80个x和y对应结果。检查结果有无离群值表现。计算每一样本每一方法成

对结果的差值和差值的均值。以4倍的各方法的差值的均值为判断限，各方法内样本的成对

差值在限值内，说明双份测定结果符合要求。若原始数据的40份样本结果，有剔除的数据

应另做实验补上。若最大差异超过临床允许误差，认真查找原因，停止继续实验。

3.2.5.2数据作图：目视判断作两张图。一张散点图：Y轴：试验方法每样本双份测定的

均值；X轴：对比方法每样本双份测定的均值。另一张作偏差图：Y轴：每样本两种方法双

份测定的均值差；X轴：对比方法每样本双份测定的均值，以直线X=0作为水平中线作图。

从这两张图中了解线性关系、有无明显的离群点、是否呈恒定变异等情况。若实验结果有良

好的线性关系，则可继续。若实验点分布呈非线性关系，则需寻找修正点修正后方可继续进

行以下数据处理。

3.2.5.3相关性分析：根据以上得出的r值，用r值检验x取值范围是否适当。要求r大

于或等于0.975（或大于或等于0.95）,则认为x范围是适合的；若r小于0.975,再多

作实验，扩大数据范围。

3.2.5.4回归分析：用直线回归分析方法来估计斜率和截距。对40份样本，80对（x小⑴）

数据以回归式y=bx+a表示这些数据的直线趋势。理想的结果b=l、a=0,若bWl、aWO表

示两方法间在测定样本时的系统误差。根据临床使用要求，b接近1,a接近0,可在各个临

床决定水平浓度Xc处，了解y方法引入后相对于x方法的系统误差（SE）,SE=I（b-1）Xc+a

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ02

SOP版本/修订号：B/0

生化室仪器性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第9页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

3.2.5.5计算预期偏差Be及其可信区间：估算测定项目在给定的医学决定水平Xc处的预期

偏差Be,按下式计算：Bc=a+(b-l)Xc,预期偏差95%的可信区间，按下式计算：

及通1]=Be±2Sy.x

3ZZ(x.-x)2

反仇-婿或=归―厂包)

S-=V2N-2-SyW-VN-2

Be为预期偏差Syx为回归线标准差

3.4.5.6配对t检验：试验方法测得的结果与对比方法测得的结果作配对t检验，求出t

和P值。若P值大于0.05,说明两方法测定结果无显著性差异，准确性好，试验方法符合

临床要求，可接受。

3.2.6结论：以美国临床实验室修正法规时室间评估的允许误差为判断依据，由方法学比

较评估的系统误差(SE)不大于允许误差，认为该仪器的系统误差属于可接受的低水平。

3.3仪器携带污染率：

3.3.1目的：为了监测测定含量高的样本后在测定含量低的样本所产生的影响。

3.3.2方法：为避免测高值标本后再测定低值标本时所产生的影响，在做携带污染率试验

前，先测一定数量标本，使测定数值达到稳定，然后取一份高值标本，连续测定3次(。、

i2.is),随后立即取一份低值标本连续测定3次5、j2,j3)»o

3.3.3.结果计算：按Biouqnton法求出携带交叉污染率计算公式，然后算出平均携带污染

率。

携带污染率=(jrj3)/(i3T3)*100%

3.3.4结论：平均携带污染率根据临床实验要求在一般生化分析仪在2%范围内属于可接受,

全直动生化分析仪要求在0.5%范围内可接受。

3.4仪器线性评价：

3.4.1目的：评价该仪器线性范围。

3.4.2收集样木：选择与实际测定的样本相一致的样本作为线性评价的样本(如病人的混

合血清)，用病人的混合样本加入分析物作为高值样本或临界异常高值样本，用临床异常样

本选为低值样本。

3.4.3浓度范围的确定：以分析项1=1的线性要求为准。线性评价选择5个不同浓度，先选择

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ02

SOP版本/修订号：B/0

生化室仪器性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第10页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

低值和高值样本各一个，低值样本为1号，高值样本为5号，两者3:1混匀为2号，等份混

匀为3号，1:3混匀为4号，2〜4号样本的浓度按下式计算：

样本浓度=C|V,+C5V5

V,+V5

C,代表1号低色什令小凌V）代表所取1号低值样本体积

c5代表5号高值样本浓度v5代表所取5号低值样本体积

3.4.4.评价方法：5个不同浓度的样本，分析当天完成。一天内作2次测定，第一次从低

浓度到高浓度样，每个实验样品作3次重复测定；第二次从高浓度到低浓度，每个实验样品

作3次重复测定。记录所有的结果作数据处理。

3.4.5结果的统计学处理：根据实验样品的配制稀释关系，计算出各实验样品内含分析物

的浓度，为这些样品的预期值。将这些样品再经测定方法检测，得到个检测值。按以上实验

要求，对每个样本作6次重复测定，得6个实测值，它们和预期值形成6对预期值、实测值。

采用直线回归方程对数据作统计，以预期值作横坐标，实测值作纵坐标，得直线回归Y=bx+a。

3.4.6结论：若b很接近1,a近于0,说明仪器的线性范围较好，能满足临床要求，在线

性范围内测定值和预期值相关良好，相关系数大于0.975,线性评价处于可接受范围。

4.支持性文件

NCCLS(EP5-A)文件

NCCLS(EP9-A2)文件

文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ03

成都市第二人民医院检验科生化SOP版本/修订号：B/0

生化室试剂性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第11页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

生化室试剂性能评价操作程序

1.目的：

为了监测生化试剂的性能指标，评价试剂分析结果的准确性、精密性等，确保检质量。

2.范围：

临床生化实验室生化试剂

3.评价指标及方法：

3.1试剂精密度评价：根据美国国家实验室标准委员会（NCCLS）EP5-A文件的要求分为如下

步骤：

3.1.1试剂盒熟习阶段：用5天时间熟习试剂盒，包括以下内容：使用说明书、测定原理、

试剂组成、适用仪器、样本要求、测定定骤、计算公式、注意事项、储存条件和有效期、参

考范围、参考文献、生产许可证、卫药准字号、生产厂商、通讯地址、生产商电话号码。

3.1.2熟习文件阶段：熟习NCCLS文件关于精密度评价的内容，时间5天，内容包括评价

目的、要求、方法、试验步骤、统计处理、注意事项和常规质量控制等。

3.1.3实验设计阶段：根据文件要求设计试验方案。包括在整个实验中，使用的试剂、校

准品和质控品。

3.1.4实验室评价阶段：

3.1.4.1初步的精密度试验：

在熟习和设计工作结束后，进行一次批内初步试验。方法：连续测定一个适宜的试验物

20次。计算结果的标准差和变异系数。结果：如发现结果与期望结果严重不符，应与制造

商联系在问题得到解决后再继续下一步正式试验。

3.1.4.2正式精密度评价试验：

根据设计的方案，选择具有医学决定水平正常和异常两个浓度的混合血清样本，该仪器

测定项目选定以后，对每个项目、每个浓度的样本进行双份测定；每天进行2批试验，上、

下午各测定一次，每个项目连续测定20天。每批同时作质控品的测定。将所测定结果进行

统计学处理，计算批内、批间精密度和总精密度。

3.1.5结果计算：

3.1.5.1批内精密度的评价按下公式计算：

文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ03

成都市第二人民医院检验科生化SOP版本/修订号：B/0

生化室试剂性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第12页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

I2

EE(X「X/

1-1j-1

Sm内=Swr

41

1=总天数（20天）

j=一天内的批数（2批）

Xim=重复1次结果，j批在第i天

Xw=重复2次结果，j批在第i天

3.1.5.2总精密度评价按以下公式计算:

E~4P

1=天数（2批/天）

*”.=第i天第1批的平均结果（平均重复2次）

X,z=第i天第2批的平均结果（平均重复2次）

E区.-X..）2

B=4----------------------

NI-1

S^2=B2-A72

1=天数（2批/天）

X-=第i天所有结果的平均值

Xi二所有结果的平均值

222

S总2=S批内2+S批间2+S天间2二（2B+A+Swr）/2

3.1.5结论：批内标准差s应为美国临床试验室室间质量评价允许误差（TE）的1/4,

天间标准差s应为该允许误差的1/3,对达到这样要求的可认为它的随机误差属于可接受的

低水平。

3.2试剂准确度评价：根据美国国家实验室标准委员会（NCCLS）EP9-A2文件的要求分为

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ03

SOP版本/修订号：B/0

生化室试剂性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第13页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

如下步骤：

3.2.1熟习文件阶段：用5天时间熟习试剂盒，包括以下内容：使用说明书、测定原理、试

剂组成、适用仪器、样本要求、测定定骤、计算公式、注意事项、储存条件和有效期、参考

范围、参考文献、生产许可证、卫药准字号、生产厂商、通讯地址、生产商电话号码。

3.2.2熟习文件阶段：熟习NCCLS文件关于准确度评价的内容，时间5天，内容包括评价目

的、要求、方法、试验步骤、统计处理、注意事项和常规质量控制等。

3.2.3设计阶段：根据文件要求设计试验方案。包括在整个实验中，使用的试剂、校准品和

质控品。

3.2.4实验室评价阶段：根据设计的方案，分析系统为评价试剂+配套的仪器、校准品、质

控品，作为试验方法，对比系统为对比试剂+与分析系统相同的仪器、校准品、质控品，作

为对比方法试验，收集分析物浓度在医学决定水平范围内均匀分布的当天新鲜血清，不要使

用己知对任一实验有干扰的样本（如溶血），测定从低于参考范围的低限到高于参考范围的

高限进行。每个项目至少选择40份临床样本，每天测8个样本，将样本按次序排列，分别

在评价仪器和对比仪器上测试，先测试一遍，每个样本测双份，做双份第2次测定时，样本

顺序全部倒过来。第一次序号为1、2、3、4、5、6、7、8,第2次序号为8,7、6、5、4、

3、2、1。连续测定5天时间。将评价仪器测定结果分别与对比仪器的测定结果作好记录进

行比较，用SPSS统计软件，作统计学处理，作预期偏差分析和相关回归分析，并计算相关

性和准确度分析。

3.2.5实验数据的收集和处理：

3.2.5.1对实验数据的初步检查：设参比方法测定结果为x值，试验方法测定结果为y值,

40份样本得到80个x和y对应结果。检查结果有无离群值表现。计算每一样本每一方法成

对结果的差值和差值的均值。以4倍的各方法的差值的均值为判断限，各方法内样本的成对

差值在限值内，说明双份测定结果符合要求。若原始数据的40份样本结果，有剔除的数据

应另做实验补上。若最大差异超过临床允许误差，认真查找原因，停止继续实验。

3.2.5.2数据作图：目视判断作两张图。一张散点图：Y轴：试验方法每样本双份测定的

均值；X轴：对比方法每样本双份测定的均值。另一张作偏差图：Y轴：每样本两种方法双

份测定的均值差；X轴：对比方法每样本双份测定的均值，以直线X=0作为水平中线作图。

从这两张图中了解线性关系、有无明显的离群点、是否呈恒定变异等情况。若实验结果有良

好的线性关系，则可继续。若实验点分布呈非线性关系，则需寻找修正点修正后方可继续进

行以下数据处理。

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ03

SOP版本/修订号：B/0

生化室试剂性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第14页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

3.2.5.3相关性分析：根据以上得出的r值，用r值检验x取值范围是否适当。要求r大

于或等于0.975（或/大于或等于0.95）,则认为x范围是适合的；若r小于0.975,再多

作实验，扩大数据范围。

3.2.5.4回归分析：用直线回归分析方法来估计斜率和截距。对40份样本，80对（x小皿）

数据以回归式y=bx+a表示这些数据的直线趋势。理想的结果b=l、a=0,若bWl、aWO表

示两方法间在测定样本时的系统误差。根据临床使用要求，b接近1,a接近0,可在各个临

床决定水平浓度Xc处，了解y方法引入后相对于x方法的系统误差（SE）,SE=|（b-1）Xc+a

I«

3.2.5.5计算预期偏差Be及其可信区间：估算测定项目在给定的医学决定水平Xc处的预

期偏差Be,按下式计算：Bc=a+（b-l）Xc,预期偏差95%的可信区间，按下式计算：

®*及岫］=&±2沙/届+y二

_IzXGj&J或="（%"

S-=V2N-2—SyW-VN.2

Be为预期偏差Syx为回归线标准差

3.4.5.6配对t检验：试验方法测得的结果与对比方法测得的结果作配对t检验，求出t

和P值。若P值大于0.05,说明两方法测定结果无显著性差异，准确性好，试验方法符合

临床要求，可接受。

3.2.6结论：以美国临床实验室修正法规对室间评估的允许误差为判断依据，由方法学比

较评估的系统误差（SE）不大于允许误差，认为该仪器的系统误差属于可接受的低水平。

3.3试剂稳定性评价：

3.3.1目的：观察试剂的稳定性

3.3.2方法：将试剂密闭避光贮存在2〜8℃和放在室温下25℃,用该试剂（如冻干试剂复

溶后）在不同时间（开瓶后、复溶后和在仪器试剂仓内）分别测定稳定性好、均匀性好的样

品（如质控血清）各参数，稳定观察12个月，记录测定结果。

3.3.3根据测定结果，计算出均值、cv值，根据时间和测定结果相关性分析和方差分析来

分析试剂的稳定性。

3.3.4结论：根据临床实验要求，试剂2C〜8c避光密闭储存稳定12个月，开盖试剂在

试剂仓内至少可稳定2周。

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ03

SOP版本/修订号：B/0

生化室试剂性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第15页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

3.4试剂线性评价：

3.4.1目的：它是评价该试剂检测线性范围。

3.4.2收集样本：作为线性评价的样本应与实际测定的样本相一致(如血清)，可用病人的

混合样本加入分析物作为高值样本或临异常高值样本，用临床异常低值样本选为低值样本。

3.4.3浓度范围的确定：应以分析项目的线性要求为准。线性评价应有5个不同浓度，可

选择低值和高值样本各一个，低值样本为1号，高值样本为5号，然后两者3：1混匀为2号，

等份混匀为3号，1：3混匀为4号，2〜4号样本的浓度按下式计算：

C1V1+C5V5

样本浓度=----------

V1+V5

C,代表1号低值样本浓度V,代表所取1号低值样本体积

Cs代表5号高值样本浓度%代表所取5号低值样本体积

3.4.4评价方法：5个不同浓度的样本，分析要求当天完成。建议一天内作2次测定，第

一次从低浓度到高浓度，每个实验样品作3次重复测定；第二次从高浓度到低浓度，每个实

验样品作3次重复测定。综合所有的结果作数据处理。

3.4.5结果的统计学处理：根据实验样品的配制稀释关系，可以计算出各实验样品内含分

析物的浓度，为这些样品的预期值。将这些样品再经测定方法检测，得到检测值。按以上实

验要求，对每个样品作6次重复测定，得6个实测值，它们和预期值形成6对预期值、实测

值。采用直线回归方式采用直线回归方程对数据作统计，以预期值作横坐标，实测值作纵坐

标，得直线回归Y=bx+a。

3.4.6结论：若b很接近1,a近于0,说明试剂的线性范围较好，能满足临床要求，在线

性范围内测定值和预期值相关良好，相关系数大于0.975,线性评价处于可接受范围。

3.5试剂干扰试验：

3.5.1目的：评价试剂盒是否受非分析物的影响及影响程度。

3.5.2干扰物的试验浓度：内源性干扰物应为临床样本中可能出现的最高浓度。药物和某

些代谢产物以治疗量10倍的浓度进行实验。

3.5.3确定干扰的标准：以配对t检验0.05判断允许范围。

3.5.4实验方法：采用配对t检验，选择一份样本一分为二，一份加入凝似干扰物作为测

定样本(T),另一分不加作为对照样本(C),如加入的干扰物为液体，对照样本应加同样体

积的水，配制成5种浓度，最高浓度样本为T,最低浓度样本为C,5个系列浓度为：C、(3C+T)

/4、(C+T)/2、(C+3T)/4,做系列干扰值=X「X"列出所有结果供分析，计算95%可信区间：

文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ03

成都市第二人民医院检验科生化SOP版本/修订号：B/0

生化室试剂性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第16页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

%95可信范围=(XT-XC)±1.96*

S为方法批内不精密度n为重复次数定量稀释，各样仅干扰物浓度不一，其它均相同,

所有样品一起随机排列在一批内进行，测定按下列顺序C1、T1、C2、T2、C3、T3、C4、T4…….Cn、

Tn,重复测定3次，计算平均值。

3.5.5干扰分析：对测定和对照组各自进行X和S的计算

3.5.6配对t检验：测定样本和对照样本作配对t检验，算出t值和p值大小。若p值大

于0.05,说明无显著干扰，该试剂不受非分析物的影响；若p值小于0.01,说明有显著干

扰，该试剂受非分析物的影响。

3.5.7结论：干扰值在对照组1.96s（95%可信限）范围内为无显著干扰，可满足临床实验

要求，若该试剂受非分析物干扰，可根据不同浓度测定的干扰值作直线回归，分析浓度和干

扰的关系，最佳可信区间在干扰物浓度的中间水平。

3.6试剂回收试验：

3.6.1目的：是测定比例系统误差。

样品的制备：制备样品时，样品中加入标准液后，总的浓度必在测定方法的分析范围内，

制作高、中、低不同浓度的样本作回收试验，计算平均回收率。加入标准液后，实验样品中

被测浓度要达到医学上具有决定意义的浓度。加入标准液的体积在整个样品中要少，在10%

以内。

低值基础样品：血清2ml+蒸储水0.1ml;

高值分析样品：血清2ml+高值分析纯品标准液0.1ml;

中值分析样品：血清2ml+中值分析纯品标准液0.1ml.

3.6.3方法：将被分析的纯品标准液加入病人样品中，制成高、中、低不同浓度的分析样品，

然后用两种分析方法分别测定3次，计算均值，根据两者测定结果的差值计算回收率。

3.6.4回收率的计算：

加入浓度=标准浓度X标准液量（ml）

血清量ml+标准液量ml

回收浓度=分析样品测得浓度一基础样品测得浓度

回收浓度

回收率（%）=______________X100%

加入浓度

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ03

SOP版本/修订号：B/0

生化室试剂性能评价生效日期：20120101

主题内容

操作程序第17页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

3.6.5结论：理想的结果期望回收率达到100%,但实际测得的回收率有一定的比例误差,

根据临床实验要求，平均回收率的标准误差小于允许误差，可接受。

4.支持性文件

NCCLS(EP5-A)文件

NCCLS(EP9-A2)文件

成都市第二人民医院检验科生化文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ04

SOP版本/修订号:B/0

主题内容生效日期：20120101

生化室校准程序第18页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

生化室校准程序

1.目的

1.1保证测定值的误差在允许范围内；

1.2实现测定结果的溯源性。

2.范围

适用于AU2700、强生干式(VTR0S350)全自动生化分析仪。

3.职责

3.1操作者：负责校准的实施和记录。

3.2室组长：负责安排校准，检查校准记录。

3.3质量负责人：负责检查并监督校准记录。

4.名词概念

4.1校准：在一定条件下的一系列操作来确定检测仪器和检测系统所指示的量值，或者某一

物质，或者参考物质所代表的值，与相应标准所认识量之间的关系。

4.2校准物/校准品：准备用于建立一个或多个定量值的任何物质。

4.3溯源性：通过一条具有规定不确定度的不间断比较链，使测量结果或测量标准的真值能

够与规定的参考标准，通常是国家标准或国际标准联系起来的一种特性。

5.校准程序

5.1仪器校准条件：

5.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。

5.1.2仪器经过大保养后。

5.1.3挪动仪器的安装地点。

5.1.4更换试剂批号。

5.1.5室内质控失控。

5.2校准品

5.2.1校准品种类：见附表。

5.2.2AU2700校准品准备:

5.2.2.1校准品的准备：具体见附表，生化采用的定标品种类相对较多，有干粉的、液体的。

干粉的定标品按照其要求进行复溶，复溶后在规定时间内进行定标，所剩的分装冻存，稳定

的项目可以使用冻存的进行定标，不稳定的项目可以使用其对结果进行粗略的验证。液体的

标准品在按照其规定保存温度中进行保存至效期，每次定标前需按规定于室温中放置相应时

间，以保证校准结果的可靠性。失效的标准品不能用于定标校正。

文件编号：CDEY-LAB-SH-CZ04

成都市第二人民医院检验科生化SOP版本/修订号:B/0

主题内容生效日期：20120101

生化室校准程序第19页共259页

LaboratoryofChengduNo.2People'sHospital

5.2.2.2定标液的位置：蓝色样本架的1号位置放蒸储水，黄色架子用于试剂项目定标架，

各个项目的位置由专业组长或质量管理员设置，具体参见附表，如需改变定标品或定标位置

需经过专业组长决定。

5.2.3强生干式生化仪(VTR0S350)校准品准备

5.2.3.1现在我室采用的是强生配套的标准品进行定标，总共包括四套标准品，分别为KIT1

(BUN,Ca,CREA,GLU,M