2026高考生物一轮基础知识练：第22章 发酵工程（含答案）

2026全国版高考生物一轮

第5部分生物技术与工程

第22章发酵工程

第1节传统发酵技术的应用

五年高考

（2024湖北,1,2分）制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核

生物，常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是（）

A.食用醋的酸味主要来源于乙酸

B.醋酸菌不适宜在无氧条件下生存

C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶

D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内

2八★（2024江苏,14,2分）关于“利用乳酸菌发酵制作酸奶或泡菜”的实验，下列叙述正确的

是（）

A.制作泡菜的菜料不宜完全淹没在煮沸后冷却的盐水中

B.制作酸奶的牛奶须经过高压蒸汽灭菌后再接种乳酸菌

C.发酵装置需加满菜料或牛奶并封装，以抑制乳酸菌的无氧呼吸

D.控制好发酵时间，以避免过量乳酸影响酸奶或泡菜的口味和品质

3次*（2022湖北,11,2分）关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述错误的是（）

A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气

B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程

C.葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体

D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌

三年模拟

4.★★（2025届福建名校联盟质检,8）生物技术与人们的生活息息相关，在食品制造方面广

泛应用。下列有关说法错误的是（）

A.在泡菜的腌制过程中，为缩短制作时间，可在盐水中加入少量陈泡菜液

B.与葡萄酒的制作不同，葡萄醋的制作过程需要消耗氧气，且发酵温度更低

C.利用玉米进行酒精发酵时，添加纤维素酶可以提高酒精的含量

D.制作腐乳时,酵母、曲霉和毛霉均参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉

5达★（2025届辽宁七校协作体开学考,10）早在《诗经・邺风・谷风》中就有“我有旨蓄，亦以

御冬”的记载。“旨蓄”就是储藏的美味食品，也就是腌制的泡菜等。下列有关叙述错误的是

A.制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的

B.制作泡菜过程中,食盐用量过高容易造成亚硝酸盐含量增加

C.常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌，它们都是好氧细菌

D.腌制泡菜时可通过向坛盖边沿的水槽注水保持发酵所需环境

6.★★★（2025届湖南长沙一中阶段检测,9）霉豆腐渣的原料是加工豆腐或豆浆后剩下的

“副”产品——豆腐渣。采用传统发酵的办法，利用毛霉糖化淀粉和分解大豆蛋白的能力对

豆腐渣进行加工,大致过程如图所示。下列说法正确的是（）

原料处理——将豆腐渣烘干至含有一定水分后冷却

拌霉-----将干净的稻草覆盖在豆腐渣上面

发酵-----?

保存

A.将豆腐渣烘干的主要目的是灭菌

B.拌霉即接种，与家庭酿制葡萄酒一样，都采用自然接种的方法

C.图中“?”处的条件是密封无氧

D.在发酵过程中，豆腐渣中的蛋白质被分解成甘油和氨基酸

第2节微生物的培养技术及应用通

・考法微生物的分离和鉴定3、4、7、8、11、13

五年高考

^★★（2024湖南,6,2分）微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是

（）

①灼烧接种环②冷却接种环，拔出试管棉塞

A.①②⑤⑥B.③④⑥⑦

C.①②⑦⑧D.①③④⑤

2.★★（2023辽宁,9,2分）细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的,

利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落

数/m3）。下列叙述错误的是（）

A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理

B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置

C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值

D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高

3.★★（2023河北」2,2分）为筛选能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，下列相关实验设

计错误的是（）

A.从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌

B.平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境

C.对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定

D.检测目的菌株对消化道环境的耐受力

4★★（2023山东,15,2分）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（）

A.不含氮源的平板不能用于微生物培养

B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒

C接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃

D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成月尿酶的微生物

5次山（2022湖北,5,2分）灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正

确的是（）

A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行

B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白陈培养基进行灭菌

D.可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌

6>**（2023重庆,9,3分）垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃

圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（）

一添加木屑堆肥体一年

餐厨垃圾破碎、压等冗渣〈一（好氧）质

油水混合物~>X—沼气

A.压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品

B.添加的木屑有利于堆肥体通气,还可作为某些微生物的碳源

C.X中需要添加合适的菌种,才能产生沼气

D.为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动

7八★★新思维.水解圈不能作为判断产酶能力唯一依据的原因（2024江西,17,12分）聚对

苯二甲酸乙二醇醋（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为

获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题：

⑴方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺（一种磷脂类物

质）为唯一碳源制备培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外,该培养基中至

少还应该有、、等营养物质。

⑵方法2采用技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码

磷脂酶的基因外,该技术还需要、、等“分子工具”。

⑶除了上述2种方法之外，还可以通过技术非定向改造现有微生物，筛选获得能

够高产磷脂酶的微生物。

⑷将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉膏蛋白腺液体培养基中添加2%的琼脂

粉和适量的卵黄磷脂）平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物

产磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板

制作的角度分析，其原因可能

是

8次★★（2022广东,21,12分）研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。

近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附

近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。

7

T

U

•

<-&

一)

毓

思

思

时间（天）

回答下列问题：

⑴研究者先制备富集培养基，然后采用法灭菌，冷却后再接入沉积物样品,28℃

厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物。为了获得纯种培养，除了稀释涂布平

板法，还可采用法。据图分析，拟杆菌新菌株在以为碳源时生长状况最

好。

⑵研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，

推测其原因可能是。（答一点即可）

⑶藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统

组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能

是。

⑷深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的

一般共性外，其特性可能还

有_______________________________________________________________

三年模拟

^★★（2025届贵州部分学校联考,15）图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，图丙是接种

后培养的效果图解，下列相关叙述错误的是（）

丙

A.甲、乙都可用于微生物的计数,且计数结果比实际结果偏小

B.甲、乙都需要将菌种接种在固体培养基上,并可能观察到单菌落

C.甲、乙培养使用后的培养基在丢弃前均需要进行灭菌处理,以免污染环境

D.丙所示结果只能由乙接种方法所得

^.★★★（2025届湖南部分学校联考,10）巴氏芽抱杆菌是一类具有较高月尿酶活性，能够分

解尿素的细菌，能改善土壤肥力。研究人员从土壤样品中分离该细菌的流程如图所

示，①~⑤表示操作步骤。下列说法错误的是（）

适量富集培养9mL9mL9mL

土样无菌水无菌水无菌水

①②③④

A.步骤②富集培养时以尿素为唯一氮源

B.步骤③④采用了稀释涂布平板法

C.步骤⑤接种时，接种环至少要灼烧5次

D.若可用于计数的平板菌落数平均为163个,则锥形瓶中菌液细菌数约为1.6x105个.mL"

!1.★★★（2025届安徽多校联考,14）兔子的盲肠发达,其中含有大量的微生物帮助兔子消

化,这可能是兔子能从富含纤维素的食物中获得营养物质的关键。为了分离出兔子盲肠中

分解纤维素能力最强的菌种，下列相关操作正确的是（）

A.为缩小选择范围可用只含纤维素粉的溶液淘汰部分菌种

B.在营养物质充足的有氧环境中更有利于分离得到目标菌种

C.相同条件下可用无菌水模拟接种操作来判断培养基是否符合无菌要求

D.在含有土豆汁的培养基中加入纤维素粉和刚果红可制备鉴别培养基

12>★★★新思维•通过分析不同处理下ZEN降解率对选项进行推理分析（2025届广东多

校联考,15）玉米赤霉烯酮（ZEN）是禾谷镰刀菌的次生代谢物，感染禾谷镰刀菌的饲料表现

发霉的特征。实验小组筛选获得了一株ZEN降解菌XJ-140,并检测了菌株XJ-140的不同

组分及细胞上清液经不同失活处理后对ZEN的降解率,实验结果如表所示。下列叙述错

误的是（）

位置及处理方式ZEN降解率/%

未处理65

上清液

蛋白酶处理36

细胞内容物38

活菌体37

灭活菌体22

A.筛选ZEN降解菌应从新鲜禾谷饲料中取样

B.根据结果推测ZEN降解酶是一种分泌蛋白

C.该实验的因变量是ZEN的降解率

D.活菌体细胞对ZEN降解酶具有黏附作用

”.★★★（2025届江西重点高中联考,17）煤化工企业产生的焦化废水中的毗陡（C5H5N）具

有明显的致癌、致畸和致突变作用，易在生物体内富集，会对人体健康及生态系统产生危害。

实验人员从焦化废水处理系统中分离出甲、乙两种毗咤降解菌，采用平板培养法比较二者

降解此咤的能力。回答下列问题：

⑴配制液体培养基I进行扩大培养，成分如表所示，将甲菌株、乙菌株分别接种在两瓶液体

培养基I中培养。培养基中能为菌株的生长提供碳源的物质是，为菌株的生

长提供氮源的物质是。配制好的培养基要进行灭菌，对培养基灭菌常用的方

法是。

MgSO4NH4NO3吐陡水

5g10g10g定容至1000mL

⑵配制不含NH4NO3（其他条件不变）的液体培养基n,然后在培养基I和培养基n中加入

一定量的，分别制成平板I、II,并在两平板上打A、B两孔（大小相同），如图1所示。

在无菌条件下，将等量、等浓度的甲菌株菌液和乙菌株菌液分别接种到平板I的A和B

两孔处，平板II也进行同样的操作。在相同且适宜的条件下培养一段时间，两个平板的两孔

处的降解圈大小如图2所示。

AB

据图分析能够得出的结论：

（答出2点）。根据图中所示实验结果可知，治理焦化废水中吐咤造成的污染应选用的菌株

是。

⑶实验人员采用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法分别对取自平板n中的甲细菌的数

量进行计数，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因

是。

14.（2025届重庆南开中学期中,18）噬菌体生物扩增法是一种检测样本中有害菌数量的方

法，其原理是噬菌体能专一感染宿主细胞，进入宿主细胞的噬菌体DNA将不受杀病毒剂的

灭活,在裂解宿主细胞后继续在相关平板上增殖形成噬菌斑。现以该方法检测某重度污染

水样中大肠杆菌的数量，操作步骤如下：

①将一定浓度的T2噬菌体悬液0.1mL与0.1mL待测水样混合，保温约5min后,向悬液

中加入0.2mL杀病毒剂；

②随后立即加入大量（L6mL）无菌培养液；

③将步骤②所得培养液全部接种到长满大肠杆菌的平板上,培养约24h;

④观察并计数平板上出现的透明噬菌斑数量。

保温7加杀病毒剂,

接种到平板

II随后立即加,培养24h

入大量无菌

出现噬菌斑

培养液

（1）T2噬菌体在增殖过程中，需要大肠杆菌提供的原料有0

⑵步骤①中所有的T2噬菌体会略微过量，其目的是

杀病毒剂的处理时间对检测结果会产生很大影响，如果处理时间过短，会使检测结果

（选填“偏大”“偏小”或“不受影响”），为确定处理时间是否合理，可设置对照组,对照组的处理

为。

⑶上述实验进行3次重复后，在3个平板中发现噬菌斑的数量分别为58、55、55个，由此

推断原待测样品中的大肠杆菌浓度为。若步骤①中保温时间过长，检测结果

将（选填“偏大”“偏小”或“不受影响”）。

第3节发酵工程及其应用

五年高考

1.★★（2022山东,14,2分）青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死

细菌,以保证自身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程,

下列说法错误的是（）

A.发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖

B.可用深层通气液体发酵技术提高产量

C.选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中

D.青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌

2次★★新情境.井冈霉素的发酵生产分析（2024江西,11,2分）井冈霉素是我国科学家发现

的一种氨基寡糖类抗生素，它由吸水链霉菌井冈变种（JGs,一种放线菌，菌体呈丝状生长）发

酵而来，在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述,

正确的是（）

A.JGs可发酵生产井冈霉素，因为它含有能够编码井冈霉素的基因

B.JGs接入发酵罐前需要扩大培养，该过程不影响井冈霉素的产量

C.提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度，会提高井冈霉素的产量

D.稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化

3八★★（2024山东,14,2分）在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体

大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内镂离

子浓度升高时，可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（）

A.相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢

B.发酵中期添加一定量的硫酸镂可提高柠檬酸产量

C.发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长

D.发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品

4y★★（2024贵州,14,3分）酵母菌W是一种产果胶酶工程菌。为探究酵母菌W的果胶

酶产量与甲醇浓度（i<n<in）的关系。将酵母菌W以相同的初始接种量接种到发酵罐,

在适宜条件下培养，结果如图所示。下列叙述正确的是（）

M果胶酶（要、

320[

2一

024487296120

培养时间（h）

A.发酵罐中接种量越高，酵母菌W的K值越大

B.甲醇浓度为HI时,酵母菌W的果胶酶合成量最高

C.72h前，三组实验中，甲醇浓度为II时，产果胶酶速率最高

D.96h后，是酵母菌W用于工业生产中收集果胶酶的最佳时期

5>★★（2023辽宁,13,2分）利用某种微生物发酵生产DHA油脂,可获取DHA（一种不饱和

脂肪酸）。如图为发酵过程中物质含量变化曲线。下列叙述错误的是（）

7

1

i-

s

发酵时间（h）

注：生物量为每升发酵液中的细胞干重（g•L-）

A.DHA油脂的产量与生物量呈正相关

B.温度和溶解氧的变化能影响DHA油脂的产量

C.葡萄糖代谢可为DHA油脂的合成提供能量

D.12-60h,DHA油脂的合成对氮源的需求比碳源高

6>**（2022湖北,14,2分）废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和

沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是（）

酿酒酵母

A.该生产过程中，一定有气体生成

B.微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料

C.该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质

D.沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理

三年模拟

7」（2025届四川成都外国语期中,6）啤酒生产包括发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵

等工序。其中，糖化是指淀粉酶分解淀粉得到糖浆。下列叙述错误的是（）

A.发芽使大麦种子释放淀粉酶

B.焙烤杀死种子胚但淀粉酶未失活

C.加入淀粉酶抑制剂可加速糖化过程

D.蒸煮后需冷却再进行发酵

8>*（2025届湖北宜昌等四地开学考,15）啤酒、味精和胰岛素的工业化生产比传统发酵

生产要复杂得多,需要通过发酵工程来实现。下列相关叙述错误的是（）

A.利用酵母菌发酵生产的单细胞蛋白，可作为食品添加剂

B.以大豆为主要原料，利用黑曲霉水解其中的蛋白质,经淋洗、调制成酱油

C.青贮饲料中添加酵母菌,可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力

D.传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，发酵工程则以单一菌种的液体发

酵为主

9次★（2025届湖北名校联盟联考,15）湖北宜昌是脐橙之乡，脐橙具有较高的营养价值和药

用价值。采用液体发酵法可酿制出醋香浓郁、酸味纯正的橙醋，提高了脐橙的经济价值。

脐橙醋的酿造工艺流程如图所示，下列相关叙述正确的是（）

脐

脐

脐

黑L

橙

橙

脐清洗、破碎橙后熟、调配成

菌

醋

汁

橙糖度调整酒杀菌、分装品

A.酿制脐橙酒和脐橙醋过程中，都应不断通气培养

B.为获得纯净的酵母菌和醋酸菌,应先稀释再平板划线

C.酵母菌产生的蛋白质可作为单细胞蛋白制成微生物饲料

D.脐橙的品质及发酵时间均会影响橙醋的风味

10>*（2025届安徽部分学校联考,13）生物发酵是一种产品制备的生化反应过程，涉及生

活和生产的方方面面。在工艺流程、产品过程控制技术领域,发酵工程也是国内长期的研

究热点。如图为青霉素发酵工艺的步骤，下列说法错误的是（）

A.将原材料配制为菌体生长所需的营养液，并将配制好的营养液灭菌处理

B.利用高压蒸汽将整个发酵设备杀菌处理，杀灭杂菌

C.为了提高青霉素的产量，发酵时不同阶段可设置不同的温度、溶氧等参数

D.控制好发酵过程中的参数，最终通过提取、分离和纯化措施来获得产品

H.★★新教材.谷氨酸在不同发酵条件下的产物不同（2025届广东一调,12）味精的主要成

分是谷氨酸钠，其生产工艺流程如图所示。下列说法正确的是（）

小麦

、

大

米

等

淀

类

粉糖化加入水、无机盐、尿素

谷

谷

物

X通气、搅拌氨中和、谷氨

发酵液

酸

氨

谷酸严控pH、温族

运扩大嘘种结晶酸钠

状

棒

菌

杆化培养

A.谷氨酸棒状杆菌的主要碳源、氮源分别是淀粉、尿素

B.谷氨酸棒状杆菌的呼吸方式和乳酸菌相同

C.发酵过程中应控制发酵液的pH为弱碱性或中性

D.发酵结束后的发酵液经过滤、离心、纯化、结晶可得到味精

12>★★（2025届安徽江淮十校联考,14）黑曲霉是一种丝状真菌，食品工业以红薯粉为原

料经黑曲霉发酵获得柠檬酸，如图为生产柠檬酸的简要流程图。下列叙述正确的是（）

35℃,35通气柠檬酸

A.黑曲霉与生产果醋时所用主要微生物细胞结构相同，代谢类型也相同

B.将菌种接种至A培养基时,每次划线前涂布器都需要灼烧灭菌

C.发酵罐C中的发酵过程是发酵工程的中心环节,该环节直接影响产品的产量和质量

D.由于黑曲霉发酵适宜温度较高，因此发酵罐C需要不断加热将温度维持在35℃

13>★★★（2024届河北部分高中三模,23）厨余垃圾常见处理方式为微生物高温堆肥处

理和干法厌氧发酵技术。图1为高温堆肥时翻堆频率对厨余垃圾质量影响的相关曲线，图

2为干法厌氧发酵技术流程。回答下

一不翻堆

-48h一次

200

424h一次

盘190。12h一次

烈

眼180

170

1234时间/d

翻堆频率对厨余垃圾质量的影响

（温度为35七）

图1

旋

干

法螺

厌

压

氧挤振动离心自动

预处理

发

水

醉脱筛分脱水处理

厨余垃圾

干法厌氧发酵技术

图2

(1)由图1可推测高温堆肥时所用主要菌种的代谢类型为，翻堆的意义在

于、。

⑵干法厌氧发酵过程中发酵罐需，以保证微生物能充分将厨余垃圾中的有机物分

解成CH4和C02,该过程产生的沼气可作为能源物质，沼渣可肥田，从能量流动的角度分析,

其意义是。

⑶与高温堆肥相比，干法厌氧发酵技术中所用的菌种单一、性状优良，这些菌种可以从自然

界中筛选，也可以通过育种获得。分析从垃圾处理站能筛选出所需目的菌的理由

是。获得的目的菌可用平板划线法纯化，操

作划线时要注意不要将最后一次的划线。

⑷为检测筛选出的目的菌的发酵效果，还需对接种目的菌后产生的沼渣进行C/N(碳/氮)值

的检测，理论上，与发酵前相比，发酵后的C/N的值,原因

是。

第5部分生物技术与工程

第22章发酵工程

第1节传统发酵技术的应用

五年高考

（2024湖北,1,2分）制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核

生物，常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是（）

A.食用醋的酸味主要来源于乙酸

B.醋酸菌不适宜在无氧条件下生存

C.醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶

D.葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内

答案D

2八★（2024江苏,14,2分）关于“利用乳酸菌发酵制作酸奶或泡菜”的实验，下列叙述正确的

是（）

A.制作泡菜的菜料不宜完全淹没在煮沸后冷却的盐水中

B.制作酸奶的牛奶须经过高压蒸汽灭菌后再接种乳酸菌

C.发酵装置需加满菜料或牛奶并封装，以抑制乳酸菌的无氧呼吸

D.控制好发酵时间，以避免过量乳酸影响酸奶或泡菜的口味和品质

答案D

3次山（2022湖北,11,2分）关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述错误的是（）

A.在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气

B.白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程

C葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体

D.生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌

答案C

三年模拟

4八★（2025届福建名校联盟质检,8）生物技术与人们的生活息息相关，在食品制造方面广

泛应用。下列有关说法错误的是（）

A.在泡菜的腌制过程中，为缩短制作时间，可在盐水中加入少量陈泡菜液

B.与葡萄酒的制作不同，葡萄醋的制作过程需要消耗氧气，且发酵温度更低

C.利用玉米进行酒精发酵时，添加纤维素酶可以提高酒精的含量

D.制作腐乳时,酵母、曲霉和毛霉均参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉

答案B

5达★（2025届辽宁七校协作体开学考,10）早在《诗经・邺风・谷风》中就有“我有旨蓄，亦以

御冬”的记载。“旨蓄”就是储藏的美味食品，也就是腌制的泡菜等。下列有关叙述错误的是

（）

A.制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的

B.制作泡菜过程中,食盐用量过高容易造成亚硝酸盐含量增加

C.常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌，它们都是好氧细菌

D.腌制泡菜时可通过向坛盖边沿的水槽注水保持发酵所需环境

答案C

6达★★（2025届湖南长沙一中阶段检测,9）霉豆腐渣的原料是加工豆腐或豆浆后剩下的

“副”产品——豆腐渣。采用传统发酵的办法，利用毛霉糖化淀粉和分解大豆蛋白的能力对

豆腐渣进行加工,大致过程如图所示。下列说法正确的是（）

原料处理——将豆腐渣烘干至含有一定水分后冷却

拌霉------将干净的稻草覆盖在豆腐渣上面

发酵------?

保存

A.将豆腐渣烘干的主要目的是灭菌

B.拌霉即接种，与家庭酿制葡萄酒一样，都采用自然接种的方法

C.图中“?”处的条件是密封无氧

D.在发酵过程中，豆腐渣中的蛋白质被分解成甘油和氨基酸

答案B

第2节微生物的培养技术及应用画

・考法微生物的分离和鉴定3、4、7、8、11、13

五年高考

1>*（2024湖南,6,2分）微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是

（）

①灼烧接种环②冷却接种环，拔出试管棉塞

握住棉塞上部

A.①②⑤⑥B.③④⑥⑦

C.①②⑦⑧D.①③④⑤

答案D

2.★★（2023辽宁,9,2分）细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的,

利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落

数/n?）。下列叙述错误的是（）

A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理

B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置

C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值

D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高

答案D

3>★（2023河北,12,2分）为筛选能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，下列相关实验设

计错误的是（）

A.从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌

B.平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境

C.对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定

D.检测目的菌株对消化道环境的耐受力

答案B

4.★★（2023山东,15,2分）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（）

A.不含氮源的平板不能用于微生物培养

B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒

C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃

D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成月尿酶的微生物

答案D

5达★（2022湖北,5,2分）灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正

确的是（）

A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行

B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C.为防止蛋白质变性,不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白腺培养基进行灭菌

D.可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌

答案D

6.★★★（2023重庆,9,3分）垃圾分类有利于变废为宝，减少环境污染。如图为分类后餐厨垃

圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是（）

一添加木屑堆肥体一年

餐厨垃圾破碎、压等冗渣〈一（好氧）质

油水混合物~>X—沼气

A.压榨出的油水混合物可再加工，生产出多种产品

B.添加的木屑有利于堆肥体通气,还可作为某些微生物的碳源

C.X中需要添加合适的菌种,才能产生沼气

D.为保证堆肥体中微生物的活性，不宜对堆肥体进行翻动

答案D

7$★★新思维.水解圈不能作为判断产酶能力唯一依据的原因（2024江西,17,12分）聚对

苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为

获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题：

⑴方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺（一种磷脂类物

质）为唯一碳源制备培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外,该培养基中至

少还应该有、、等营养物质。

⑵方法2采用技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码

磷脂酶的基因外,该技术还需要、、等“分子工具”。

⑶除了上述2种方法之外，还可以通过技术非定向改造现有微生物，筛选获得能

够高产磷脂酶的微生物。

⑷将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉膏蛋白腺液体培养基中添加2%的琼脂

粉和适量的卵黄磷脂）平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物

产磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板

制作的角度分析，其原因可能

是_______________________________________________________________

答案（1）选择氮源水无机盐（2）转基因（或重组DNA或基因工程）限制酶

DNA连接酶载体（3）诱变育种（4）涂布可能会造成菌落大小不一，则水解圈直径的大

小不同;且水解圈直径的大小还可能与平板的厚薄和平整度等有关

8.★★★（2022广东,21,12分）研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。

近期在“科学号”考察船对南中国海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附

近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。

7

T

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一)

龄

国

W

时间（天）

回答下列问题：

⑴研究者先制备富集培养基，然后采用法灭菌，冷却后再接入沉积物样品,28℃

厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物。为了获得纯种培养，除了稀释涂布平

板法，还可采用法。据图分析，拟杆菌新菌株在以为碳源时生长状况最

好。

⑵研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，

推测其原因可能是。（答一点即可）

⑶藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统

组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能

是。

⑷深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的

一般共性外，其特性可能还

有_______________________________________________________________

答案（1）高压蒸汽灭菌平板划线纤维素（2）培养条件与深海环境差异大;微生物不

可以在培养基中培养（或生存）;微生物只能在深海环境中生存;培养基没有模拟到深海环

境;某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存（以上答一点即可）（3）拟杆菌作

为分解者，将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到无机环境中，促进碳

循环的顺利进行（4）耐低温、耐高压

三年模拟

9达★（2025届贵州部分学校联考,15）图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，图丙是接种

后培养的效果图解，下列相关叙述错误的是（）

丙

A.甲、乙都可用于微生物的计数,且计数结果比实际结果偏小

B.甲、乙都需要将菌种接种在固体培养基上,并可能观察到单菌落

C.甲、乙培养使用后的培养基在丢弃前均需要进行灭菌处理,以免污染环境

D.丙所示结果只能由乙接种方法所得

答案A

^.★★★（2025届湖南部分学校联考,10）巴氏芽抱杆菌是一类具有较高月尿酶活性，能够分

解尿素的细菌，能改善土壤肥力。研究人员从土壤样品中分离该细菌的流程如图所

示，①~⑤表示操作步骤。下列说法错误的是（）

适量富集培养9mL9mL

土样无菌水无菌水无菌水

①②③④

A.步骤②富集培养时以尿素为唯一氮源

B.步骤③④采用了稀释涂布平板法

C.步骤⑤接种时，接种环至少要灼烧5次

D.若可用于计数的平板菌落数平均为163个,则锥形瓶中菌液细菌数约为1.6x105个.mL"

答案D

!1.★★★（2025届安徽多校联考,14）兔子的盲肠发达,其中含有大量的微生物帮助兔子消

化,这可能是兔子能从富含纤维素的食物中获得营养物质的关键。为了分离出兔子盲肠中

分解纤维素能力最强的菌种，下列相关操作正确的是（）

A.为缩小选择范围可用只含纤维素粉的溶液淘汰部分菌种

B.在营养物质充足的有氧环境中更有利于分离得到目标菌种

C相同条件下可用无菌水模拟接种操作来判断培养基是否符合无菌要求

D.在含有土豆汁的培养基中加入纤维素粉和刚果红可制备鉴别培养基

答案D

12>★★★新思维•通过分析不同处理下ZEN降解率对选项进行推理分析（2025届广东多

校联考,15）玉米赤霉烯酮（ZEN）是禾谷镰刀菌的次生代谢物，感染禾谷镰刀菌的饲料表现

发霉的特征。实验小组筛选获得了一株ZEN降解菌XJ-140,并检测了菌株XJ-140的不同

组分及细胞上清液经不同失活处理后对ZEN的降解率,实验结果如表所示。下列叙述错

误的是（）

位置及处理方式ZEN降解率/%

未处理65

上清液

一蛋白酶处理36

细胞内容物38

活菌体37

灭活菌体22

A.筛选ZEN降解菌应从新鲜禾谷饲料中取样

B.根据结果推测ZEN降解酶是一种分泌蛋白

C.该实验的因变量是ZEN的降解率

D.活菌体细胞对ZEN降解酶具有黏附作用

答案A

”.★★★（2025届江西重点高中联考,17）煤化工企业产生的焦化废水中的毗陡（C5H5N）具

有明显的致癌、致畸和致突变作用，易在生物体内富集，会对人体健康及生态系统产生危害。

实验人员从焦化废水处理系统中分离出甲、乙两种吐陡降解菌，采用平板培养法比较二者

降解此咤的能力。回答下列问题：

⑴配制液体培养基I进行扩大培养，成分如表所示，将甲菌株、乙菌株分别接种在两瓶液体

培养基I中培养。培养基中能为菌株的生长提供碳源的物质是，为菌株的生

长提供氮源的物质是。配制好的培养基要进行灭菌，对培养基灭菌常用的方

法是O

MgSO4NH4NO3此咤水

5g10g10g定容至1000mL

⑵配制不含NH4NO3（其他条件不变）的液体培养基n,然后在培养基I和培养基n中加入

一定量的，分别制成平板I、n,并在两平板上打A、B两孔（大小相同），如图1所示。

在无菌条件下淅等量、等浓度的甲菌株菌液和乙菌株菌液分别接种到平板I的A和B

两孔处，平板n也进行同样的操作。在相同且适宜的条件下培养一段时间，两个平板的两孔

处的降解圈大小如图2所示。

（答出2点）。根据图中所示实验结果可知，治理焦化废水中吐陡造成的污染应选用的菌株

是。

⑶实验人员采用显微镜直接计数法和稀释涂布平板法分别对取自平板n中的甲细菌的数

量进行计数，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因

是。

答案（1）毗咤毗咤和NH4NO3湿热灭菌法/高压蒸汽灭菌法（2）琼脂在添加了

NH4NO3的培养基中，甲菌株和乙菌株对此咤都有一定的降解能力，且甲菌株的降解能力大

于乙菌株的;在没有添加NH4NO3的培养基中，甲菌株对此咤的降解能力有所下降,乙菌株

不能降解此咤甲菌株（3）显微镜直接计数法统计细菌总数，稀释涂布平板法只统计活

菌数

14.（2025届重庆南开中学期中,18）噬菌体生物扩增法是一种检测样本中有害菌数量的方

法，其原理是噬菌体能专一感染宿主细胞，进入宿主细胞的噬菌体DNA将不受杀病毒剂的

灭活,在裂解宿主细胞后继续在相关平板上增殖形成噬菌斑。现以该方法检测某重度污染

水样中大肠杆菌的数量，操作步骤如下：

①将一定浓度的T2噬菌体悬液0.1mL与0.1mL待测水样混合，保温约5min后,向悬液

中加入0.2mL杀病毒剂；

②随后立即加入大量（1.6mL）无菌培养液；

③将步骤②所得培养液全部接种到长满大肠杆菌的平板上,培养约24h;

④观察并计数平板上出现的透明噬菌斑数量。

(EZZ)

保温，加杀病毒剂,

接种到平板

II随后立即培养24h

入大量无菌

出现噬菌斑

培养液

（1）T2噬菌体在增殖过程中，需要大肠杆菌提供的原料有

⑵步骤①中所有的T2噬菌体会略微过量，其目的是

杀病毒剂的处理时间对检测结果会产生很大影响，如果处理时间过短，会使检测结果

（选填“偏大”“偏小”或“不受影响”），为确定处理时间是否合理，可设置对照组,对照组的处理

为___________________________________________

⑶上述实验进行3次重复后，在3个平板中发现噬菌斑的数量分别为58、55、55个，由此

推断原待测样品中的大肠杆菌浓度为。若步骤①中保温时间过长，检测结果

将（选填“偏大”“偏小”或“不受影响”）。

答案（1）脱氧核甘酸、氨基酸（2）保证所有大肠杆菌都被侵染偏大将待测水样换成

无菌水，其余操作不变（3）560个/mL偏小

第3节发酵工程及其应用

五年高考

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