JJF 2202-2025 便携式荧光免疫分析仪校准规范

中华人民共和国国家计量技术规范JJF2202—2025便携式荧光免疫分析仪校准规范CalibrationSpecificationforPortableFluorescenceImmunoassayAnalyzers2025-02-08发布2025-08-08实施国家市场监督管理总局发布JJF2202—2025便携式荧光免疫分析仪校准规范CalibrationSpecificationforPortableFluorescenceImmunoassayAnalyzers→→→→→→→→→→→→→→JJF2202—2025→→→→→→→→→→→→→→→归口单位:全国生物计量技术委员会主要起草单位:中国计量科学研究院广东省计量科学研究院参加起草单位:基蛋生物科技股份有限公司广州万孚生物技术股份有限公司本规范委托全国生物计量技术委员会负责解释JJF2202—2025本规范主要起草人:彭涛(中国计量科学研究院)谢洁(中国计量科学研究院)武利庆(中国计量科学研究院)张国强(中日友好医院)黄彦捷(广东省计量科学研究院)参加起草人:王路海(基蛋生物科技股份有限公司)关丽晶(广州万孚生物技术股份有限公司)Ⅰ (1)2引用文件 (1) (1)4概述 (1)5计量特性 (2)6校准条件 (2)6.1环境条件 (2)6.2测量标准及其他设备 (2)7校准项目和校准方法 7.1重复性 (2)7.2示值误差 (3)7.3线性 (3)8校准结果表达 (3)8.1校准结果处理 (3)8.2校准结果的测量不确定度 (4)9复校时间间隔 (4)附录A校准用荧光校准条的质控要求及荧光标准卡的制备方法 (5)附录B校准用标准物质的选择原则 (6)附录C校准原始记录格式 (7)附录D校准证书(内页)格式 (8)附录E测量不确定度评定示例 (9)ⅡJJF1059.1《测量不确定度评定与表示》共同构成支撑本规范制定工作的基础性系列规范。本规范的校准方法及计量特性等主要参考了YY/T1533—2017《全自动时间分辨荧光免疫分析仪》、YY/T1792—2021《荧光免疫层析分析仪》。本规范为首次发布。1便携式荧光免疫分析仪校准规范本规范适用于基于荧光免疫层析技术原理的便携式荧光免疫分析仪的校准,不适用于采用上转换荧光材料标记的免疫层析试剂的仪器的校准。2引用文件本规范引用了下列文件:YY/T1533—2017全自动时间分辨荧光免疫分析仪YY/T1792—2021荧光免疫层析分析仪凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本规范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。荧光免疫层析试纸条上用于指示目标物是否存在的区域,简称T线。荧光免疫层析试纸条上用于质控试纸条是否有效的区域,简称C线。3.3互换性commutability对于给定标准物质的规定量,由两个给定测量程序所得测量结果之间关系与另一个指定物质所得测量结果之间关系一致程度表示的标准物质特性。4概述荧光免疫层析技术中,根据待测目标物的不同,可以采用“三明治”夹心或竞争抑制的模式对待测物进行定性或定量分析。以“三明治”夹心模式为例,将含有待测物的样品加入到荧光免疫层析试纸条的加样孔中,荧光标记的检测抗体与待测物结合,然后被包被在硝酸纤维素膜上的捕获抗体捕获,形成“检测抗体-待测物-捕获抗体”的“三明治”夹心结构,在一定波长激发光的照射下,荧光标记抗体发射出特定波长的光,其强度与样品中待测物的含量成正相关。便携式荧光免疫分析仪是将荧光免疫层析试纸条上T线和C线上荧光信号转换成电信号并进行分析的一类便携式检测仪器。便携式荧光免疫分析仪由主机(如控制主板、激发光源、光电检测系统、机械扫描控制电路、液晶显示器、外壳等)、随机软件、电源及信息采集装置(如二维条码扫描此外在食品安全领域中的农兽药残留、真菌毒素检测中也有应用。JJF2202—202525计量特性便携式荧光免疫分析仪的计量特性指标见表1。表1便携式荧光免疫分析仪的主要计量特性指标计量特性计量特性指标重复性荧光标准卡T线C线配套试剂T线C线示值误差±20%线性r≥0.975注:重复性计量特性指标二选一;表中技术指标不用于合格性判别,仅供参考。6校准条件6.1环境条件6.1.2相对湿度:≤70%;6.1.3仪器应远离振动、紫外光线干扰。6.2测量标准及其他设备6.2.1装置:高、中、低不同荧光强度的荧光校准条1、2、3,其均匀性和稳定性均不大于2%,校准用荧光校准条的质控要求及荧光标准卡的制备方法见附录A。6.2.2试剂:配套体外诊断试剂盒。6.2.3标准物质:C反应蛋白、甲胎蛋白等有证标准物质。校准用标准物质的选择原则见附录B。7校准项目和校准方法7.1重复性可选用以下方法之一:1)测试荧光标准卡:测试两个梯度荧光标准卡的T线和C线荧光信号;2)使用配套试剂测试有证标准物质:测试线性范围内高、低两个标准物质浓度的T线和C线荧光信号。每个卡连续测10次,分别计算T线、C线荧光信号10次测量结果的算术平均值(M)和标准差(SD),并按公式(1)计算相对标准偏差(RSD)作为重复性的表征。-JJF2202—20253式中:SD—10次测量结果的标准差;7.2示值误差示值误差的校准宜采用便携式荧光免疫分析仪规定检测项目的有证标准物质。通常情况下,检测项目的校准点至少应包括1个低值点和1个高值点,低值点和高值点至少应相差一个数量级,且低值点和高值点应覆盖客户要求校准区间;当客户要求时,也可进行单点校准。分别测量选定检测项目的校准点,每个校准点分别重复测量3次,计算3次测量结果的平均值。根据公式(2)计算示值相对误差。式中:B—示值相对误差;M—3次测量结果的平均值,单位与标准物质标准值的单位一致;T—标准物质的量值。7.3线性线性的校准宜采用便携式荧光免疫分析仪规定检测项目的有证标准物质。在低值至高值范围内,对至少5个浓度的标准物质(或配制的校准溶液)进行测量,每个浓度重复测量3次,取其平均值。将测量结果的平均值与标准物质的标准值(或校准溶液的配制值)进行线性回归,按公式(3)计算相关系数r。式中:r—相关系数;xi—被分析项目各个浓度水平标准溶液的标准值;—x—标准物质标准值的平均值,单位为标准物质标准值的单位;yi—被分析项目各个浓度水平标准溶液的测量值;-y—测量结果的平均值,单位为标准物质标准值的单位;8校准结果表达8.1校准结果处理经校准后的分析仪应核发校准证书,校准证书应符合JJF1071—2010中5.12的要求,并给出各校准项目名称和测量结果以及扩展不确定度。校准原始记录格式(推荐性4表格)见附录C,校准证书内页格式(推荐性表格)见附录D。8.2校准结果的测量不确定度分析仪校准结果的测量不确定度按JJF1059.1—2012的要求评定,校准结果测量不确定度评定示例见附录E。9复校时间间隔由于复校时间间隔的长短是由仪器的使用情况、使用者、仪器本身质量等诸因素所决定的,因此送校单位可根据实际使用情况自主决定复校时间间隔,复校时间间隔建议JJF2202—20255附录A校准用荧光校准条的质控要求及荧光标准卡的制备方法成。PDMS属于有机硅家族,具有透明性好、生物相容性良好、柔韧性强(杨氏弹性模量约为1MPa~3MPa)、介电常数低、表面张力和溶解度低等特点。油溶性CdTe/CdSe/ZnS量子点是以CdTe为核心、CdSe和ZnS为壳层,表面由疏水配体包裹的核/胶,将含有3种不同浓度量子点的凝胶灌注到毛细管中制备成荧光校准条1、2、3,制备的荧光校准条具有透明性好、荧光强度高而稳定、具有柔韧性等优势。A.2荧光校准条的质控要求使用通过校准后的荧光分光光度计对本规范中使用的荧光校准条荧光信号的均匀性和稳定性等性能进行测量,测量方法如下。均匀性:不同浓度量子点与PDMS混合后形成荧光凝胶,在灌注到毛细管中之前,分别从不同位置(n≥10)取等量的荧光凝胶用荧光分光光度计进行荧光信号测量,测量结果的相对标准偏差不高于2%。稳定性:将制备好的荧光标准条在室温避光条件下储存,6个月内每隔1个月用荧光分光光度计进行荧光信号测量,测量结果的相对标准偏差不高于2%。A.3荧光标准卡的制备方法将荧光校准条1、2、3分别剪成适当长度正好卡在不同厂家便携式荧光免疫分析仪配套的试剂卡壳上,建议选荧光校准条2作为标准卡的C线,同时在T线位置分别放置3个不同浓度的荧光校准条,形成3个不同梯度的荧光标准卡1、2、3,进行重复性校准。JJF2202—20256附录B校准用标准物质的选择原则B.1标准物质的选择C反应蛋白、甲胎蛋白等有证标准物质不可获得或客户要求时,可选用其他检验项目的有证标准物质进行校准。B.2校准示值误差的标准物质校准示值误差的标准物质应具有互换性,由于免疫分析存在基质效应,校准示值误差时不建议将有证标准物质稀释使用,否则可能影响互换性。B.3校准重复性和线性的标准物质校准重复性和线性时可采用高纯有证标准物质按照重量-容量法配制校准溶液,但此时应当考虑配制过程中引入的不确定度;用于线性校准的标准物质的最高浓度与最低浓度应最好相差一个数量级。JJF2202—20257附录C校准原始记录格式(推荐性表格)分析仪名称型号规格制造厂商出厂编号委托单位地址温度湿度记录编号校准日期校准员核验员一、重复性荧光标准卡的梯度荧光标准卡T线和C线荧光信号的测量值平均值RSD/%1234567891CT2CT二、示值误差标准物质的量值标准物质的测量值平均值测量值与标准值的示值误差相对示值误差%123低浓度高浓度标准物质的量值标准物质的测量值平均值线性相关系数r1238校准证书(内页)格式(推荐性表格)序号校准项目校准结果1重复性2示值误差3线性1.校准结果测量不确定度:2.校准技术依据:3.校准的环境条件及地点:环境温度:℃,相对湿度:%校准地点:校准员:核验员:JJF2202—20259附录E测量不确定度评定示例E.1测量方法采用便携式荧光免疫分析仪对标准物质连续测定3次,并与标准物质标准值进行比较,按公式(E.1)计算相对示值误差。E.2测量模型B=(M-T)/T×100%(E.1)式中:B—相对示值误差;M—标准物质3次测量结果的平均值,单位与标准值一致;T—标准物质标准值。E.3合成标准不确定度计算公式依据不确定度传播律,当各不确定度间不相关时E.4不确定度来源不确定度来源包括:(E.2)a)输入量M引入的标准不确定度uM,主要是测量重复性引入的标准不确定度;b)输入量T引入的标准不确定度uT,主要是标准物质引入的标准不确定度。E.5标准不确定度分量评定E.5.1输入量M引入的标准不确定度uM评定选定一台便携式荧光免疫分析仪,对该C反应蛋白标准物质连续测量10次,得到计算单次测量结果