1.2.1微生物的培养技术及应用课件-高二下学期生物人教版选择性必修3

第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用微生物的基本培养技术(第一课时)1.什么是培养基?如何配制?2.什么是无菌技术?3.怎样进行酵母菌的纯培养?

从社会中来向经过杀菌处理的牛奶中添加对人体有益的乳酸菌，再经过发酵就可以制成酸奶，

在家里自制酸奶虽然方便，但是食用自制

酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要

原因是在制作过程中有杂菌混入。讨

论

：什么是微生物?实验室培养微生物有什么要求呢?怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?

从社会中来实验室培养微生物关键：(1)提供合适的营养和环境条件(3)并将需要的微生物分离出来(2)确保其他微生

物无法混入微生物的

纯培养一

.培养基的配制2.培养基(

1

)

概

念

：人们按照微生物对营养物质

的不同需求，配制出供其

生长繁殖

的营养基质。(

2

)

作

用

：注意：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或_

积累其代谢物

__o病毒为非细胞结构生物只能在活细胞中营寄生生

活，目前不能利用人

工培养基来培养。培养皿

培养基不含凝固剂、呈液体状态的培养基液体培养基

常用于工业生产(加凝固剂，如_

琼脂)

琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固固体培养基

微生物的分离与鉴定、活菌计数、保藏菌种含有凝固剂、呈固体状态的培养基注意：①凝固剂(

如

琼

脂

),

不能为微生物提供能量和碳源。②微生物在固体培养基表面或内

部生

长

,可以形成肉眼可见的菌落。固体培养基

菌落：肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体2.培养基(

3

)

种

类

：①物理性质X38Y9液体培养基基础培养基

含一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质选择培养基

用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出

来。

(主要考虑某些微生物的特殊营养需求或它们对某

些化学物质具有抗性)鉴别培养基

用于鉴别不同类型微生物的培养基。

(在基础培养基中

加入某种特殊的化学物质，这种物质会与某种微生物的

代谢物发生反应，产生明显的特征性变化)2.培养基②功能(4)培养基的营养构成：各种培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质。(1)碳源①概念：提供碳元素的物质无机碳源

CO₂

等

自养型微生物②种类：有机碳源

糖类、脂肪酸、石油等

异养型微生物③功能：构成生物体细胞的物质和一些代谢产物；有机碳源也是异养微生物的能源物质。一般情况下，不添加氮源培养基可用来培养固氮微生物③功能：合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢物等

P10

旁栏思考题注意：含有C、H、O、N

的有机物可作为异养型微生物的碳源、氮源、

能

源。①概念：提供氮元素的物质无机氮源

N₂

、

NH₃

、

铵盐、硝酸盐等

②种类有机氮源

牛肉膏、蛋白胨、尿素等牛肉膏和蛋白胨来源于动物

含有糖、维生素和有机氮等

营养物质。(2)氮源例

如

：1.培养乳酸杆菌需要添加维生素

；2.培养霉菌时需将PH

调

至酸性

，培养细菌时

将PH

调至中性或弱碱性；3.培养厌氧微生物时需要提供无

氧条件。除上述几种主要营养物质，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质

以及O₂的需求。生长因子、氨基酸、维生素、碱基等微生物碳源氮源能源蓝细菌CO₂NH₄+、NO₃等光能硝化细菌CO₂NH₃NH₃

的氧化根瘤菌糖类等有机物N₂有机物大肠杆菌，糖类蛋白质等有机物

养型微住物所需的碳源来首尤机碳源蛋白质等有机物异养型微生物所需的碳源来自有

机

碳源无机氮源不但能给自养型微生物提供氮源

，也能作为

能源物质

I几种微生物的营养和能量来源(1)说出该培养基培养的微生物同化作用类型，及判断依据。异养型微生物，该微生物的碳源和氮源是有机物，不能自己合成有机物。(2)

培养微生物时，培养基中是否必须有碳源和氮源?不一定，例如培养自养微生物时，

一般不需要添加碳源，微生物可以利

用空气中的二氧化碳；培养固氮微生物时，

一般不需要添加氮源，微生

物可以利用空气中的氮气。材料牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5g10g5g20g定容至1000

mL此培养基可用来培养自养型微生物。圆褐固氮菌虽可以固氮，但其同化作用类型为异养型，培养基中必须提供有机碳源，所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌。编号①②③④⑤成分(NH₄)₂SO₄KH₂PO₄FeSO₄CaCl₂H₂O含量/g0.44.00.50.5100

mL下表是某微生物培养基的成分，请分析该培养基可用来培养哪种微生物?若除去①,此培养基可用来培养圆褐固氮菌吗?A.

该培养基中含有碳源、氮源、水和无机盐四类物质B.

该培养基可用来培养硝化细菌，不能用来培养酵母菌C.

该培养基在培养硝化细菌时，需要密封D.

要用该培养基培养酵母菌，需要加入葡萄糖作为氮源成分NH₄NO₃KH₂PO₄CaCl₂FeSO₄维生素蒸馏水含量0.5g3.0g0.5g0.5g少许定容至1000mL应用1.

(2024

·云南昆明高二期末)下表是培养某种微生物的培养基配方，下列说法正确的是应用2.

(2024

·

陕西西安高二期末)下列有关微生物培养基的配制表述错误的是A.培养硝化细菌的培养基中添加的铵盐可作为能量来源B.尿素固体培养基中的K₂HPO₄能用于维持培养基的pHC.

培养光能自养型蓝细菌的培养基中不需提供有机碳源D.马铃薯琼脂固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源二

.无菌技术1.无菌技术：获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染围绕着如何

避免杂菌污染展开。对操作的空间、操作者的衣着和手用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基无菌技术除用来防止实验室的培养物被其

他外来微生物污染外，还有什么作用?无菌技术能有效避免操作者被微生物感染。消毒灭菌类型煮沸消毒操作方法适用范围100

℃煮沸5~6

min家庭餐具等生活用品巴氏消毒62~65℃消毒30

min或72~76℃处理15s或80~85℃处理10~15s不耐高温的液体，如牛奶化学药物用体积分数为70%-75%的酒精、氯

气、苯酚或煤酚皂溶液等处理皮肤、伤口消毒和空气、

水消毒等紫外线紫外线照射30

min接种室、接种箱、超净工作台二

.无菌技术

①

消毒1.概

念

：使

用较为温和的物理、化学或生物等方法

杀死物体表

面或内

部一

部分微生物。2.常用方法：杀死牛奶中绝大多数微生物，

并基本不破坏牛奶营养成分。②

灭菌1.概念

：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

芽孢和孢子的区别：①

芽

孢

是抗逆性强的休眠体。②孢子是繁殖体(生殖细胞)。①湿热灭菌

利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法。实验室常用高压蒸汽灭菌锅，在压力100kPa

、温度121℃条件下，维持15-30

min对象：培养基●

高压蒸汽灭菌：(效果最好)目的对

象

：耐高温，需保持干燥的物品玻璃器皿(

如培养皿、吸管)金属器具③灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具，

直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌(见下

图

)

。此外在接种过程

中

，试管口、瓶口等容易被污染的部位，也可以

通过火焰灼烧来

灭

菌

。②干热灭菌：干热灭菌箱内，在160-170℃

的热空气中维持下1-2

h达到灭菌3.将试管口通过二

.无

菌

技

术常用酒精擦拭双手是日常防护致病菌感染的措施之一，这是消毒还是灭菌?体积分数为70%和95%的酒精，哪种效果更好?为什么?酒精擦拭属于消毒，酒精消毒时，70%的酒精杀菌效果最好。浓度过高，使菌体表面

蛋白质凝固成一层保护膜，酒精分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌能力减弱。做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接