2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷（江苏专用）（解析版）

高级中学名校试题PAGE2025学年高二生物下学期期中模拟卷（江苏专用）（考试时间：75分钟试卷满分：100分）注意事项：1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。4．测试范围：选必三全部5．难度系数：0.76．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。1．研究者用酸笋开发具有降低胆固醇功能的益生菌。先将酸笋发酵液接种到含有CaCO3的固体培养基上，筛选出乳酸菌，然后将乳酸菌接种到含有胆固醇的培养液中，筛选出能够降解胆固醇的乳酸菌。下列叙述正确的是（）A．酸笋发酵过程中需要定期排气以确保发酵罐内压强稳定B．与酸笋风味形成相关的乳酸菌为厌氧型，所以不会分布在空气中C．培养基上生长的菌落直径与溶钙圈直径比值小的菌落即为目标菌落D．胆固醇既可为乳酸菌的生长提供氮源，也可参与动物细胞膜的组成【答案】C〖祥解〗酸笋制作的原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。【详析】A、乳酸菌是厌氧菌，发酵过程中不产生气体，不需要定期排气，A错误；B、在自然界中，乳酸菌分布广泛，空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内都分布有乳酸菌，B错误；C、乳酸菌发酵产生的乳酸能与CaCO3发生反应，使CaCO3分解成可溶性物质乳酸钙和CO2，导致菌落周围出现溶钙圈，故溶钙圈直径与菌落直径的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，培养基上生长的菌落直径与溶钙圈直径比值小的菌落即为目标菌落，C正确；D、胆固醇属于脂质，含有C、H、O元素，主要为微生物的生长提供碳源，胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，D错误。故选C。2．亚硝酸细菌为一类可将NH3氧化为HNO2的化能自养细菌，因其常常和其他细菌伴生在一起难以纯化。下图为从某污水厂污泥中分离、筛选和鉴定亚硝酸细菌的示意图，相关叙述错误的是（）A．过程①接种9个平板，目的是在合适的浓度下筛选出相应的单菌落B．过程②挑取单个菌落接种到斜面上保存，并在试管底部做好标记C．过程③进行平板划线，可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面D．与富集培养基相比，筛选亚硝酸细菌的培养基中应不含有机碳源【答案】B〖祥解〗微生物常见的接种的方法：①平板划线法：通过接种环在固体培养基表面连续划线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落，这种接种方法称为平板划线法。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详析】A、过程①接种9个平板，目的是在合适的浓度下筛选出相应的单菌落，同一浓度下接种了3个平板的目的是排除偶然因素的影响，实现平行重复，A正确；B、过程②挑取单个菌落接种到斜面上保存，并在试管壁上做好标记，B错误；C、过程③进行平板划线，可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，进而可以获得单个菌落，C正确；D、亚硝酸细菌为一类可将NH3氧化为HNO2的化能自养细菌，因此，与富集培养基相比，筛选亚硝酸细菌的培养基中应不含有机碳源，D正确。故选B。3．某酿酒厂以无核黄皮果为辅料研制出黄皮甜米酒，该酒具有消食、润肺和清热解毒等功效。制作黄皮甜米酒的工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（）A．对糯米进行蒸煮可利用高温杀死杂菌，并有利于细胞破裂释放糖类用于发酵B．甜酒曲中的根霉能产生糖化酶，将淀粉依次水解为蔗糖、葡萄糖C．酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，代谢物的生成在后发酵阶段完成D．黄皮甜米酒口感好、酒精度低，适宜长期大量饮用【答案】A〖祥解〗发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵。【详析】A、对糯米进行蒸煮的主要目的是使淀粉颗粒吸水膨胀并糊化，便于淀粉酶的作用，同时也可利用高温能杀死原料中的杂菌，并有利于细胞破裂释放糖类用于发酵，A正确；B、甜酒曲中的根霉能产生糖化酶，将淀粉依次水解为麦芽糖、葡萄糖，B错误；C、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，C错误；D、黄皮甜米酒虽然口感好、酒精度低，但不适宜长期大量饮用，D错误。故选A。4．南通某学校生物研究小组以蝴蝶兰为材料开展了植物组织培养试验，过程如下图。相关叙述错误的是（）A．取带芽花梗作外植体，是因为芽可产生生长素而更易成活B．花梗插入培养基前要用无水酒精和次氯酸钠进行消毒处理C．过程c、d和e使用的培养基中所含的物质比例存在差异D．过程f“炼苗”目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性【答案】B〖祥解〗组织培养的过程：（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可直接进行扦插生根。（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。激素比值的变化，对生根还是生芽是不同的。当细胞分裂素大于生长素时，促进芽的分化；当细胞分裂素小于生长素时，促进根的分化。【详析】A、芽属于幼嫩部位，能产生生长素，因此取带芽花梗作外植体更易成活，A正确；B、花梗插入培养基前要用体积分数为70%的酒精和体积分数为5%左右的次氯酸钠进行消毒处理，B错误；C、过程c、d和e属于脱分化、再分化和幼苗的生长发育，使用的培养基中所含的物质如激素比例存在差异，C正确；D、过程f“炼苗”是由于试管苗长得弱小，光合能力弱，适应性差，因此需要移栽到野外使其逐渐适应室外环境，提高组培苗对外界环境条件的适应性，D正确。故选B。5．为培育“高产耐盐碱”的水稻植株，某研究小组利用植物体细胞杂交技术设计了如下实验流程图。已知耐盐、高产性状分别受细胞质基因和细胞核基因控制，相关叙述错误的是（）A．①过程可通过观察原生质体的结构与颜色来判断其融合情况B．②过程体现了植物细胞全能性，它是植物体细胞杂交的理论基础C．失活处理后，原生质体A2的细胞质和原生质体B2的细胞核失活D．去壁处理需用到纤维素酶和果胶酶混合酶液，酶液渗透压可略高于细胞液【答案】C〖祥解〗植物体细胞杂交技术：（1）植物体细胞杂交技术：是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。（2）过程：①诱导融合的方法：物理法；化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成；③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。【详析】A、由于叶绿体有颜色且有特定结构，①过程的细胞融合中可通过观察原生质体的结构与颜色来判断其融合情况，A正确；B、②过程是将杂种细胞经组织培养得到再生植株的过程，植物的组织培养体现了植物细胞全能性，它是植物体细胞杂交的理论基础之一，B正确；C、由于耐盐、高产性状分别受细胞质基因和细胞核基因控制，在促使原生质体融合前，需对原生质体进行失活处理，分别使原生质体A2的细胞核失活和原生质体B2的细胞质失活，C错误；D、用纤维素酶和果胶酶混合液酶解细胞壁获取原生质体时应置于较高渗透压溶液中（或等渗溶液）进行，可防止原生质体吸水胀破，D正确。故选C。6．下列有关植物组织培养技术的叙述，错误的是（）A．利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体B．经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞丧失分裂分化能力C．利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株D．培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向【答案】B〖祥解〗植物组织培养过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育成植株。植物组织培养技术有广泛的应用：植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详析】A、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体，A正确；B、经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞具有细胞全能性，在一定条件下可培育成植株个体，B错误；C、茎尖部位的病毒较少，花粉是植物的雄配子，染色体数目减半，故利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株，C正确；D、决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，如培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向，D正确。故选B。7．我国科学家使用小分子化合物处理小鼠体细胞，成功获得诱导多能干细胞（iPS细胞），降低了通过导入原癌基因c-Myc等基因制备iPS细胞的潜在成瘤风险。下列叙述错误的是（）A．iPS细胞的潜在成瘤风险来自于c-Myc基因抑制了细胞的分裂分化B．单基因遗传病患者使用iPS细胞治疗后，体内仍可能携带致病基因C．人工制备的iPS细胞同时具备多方向分化的潜能和自我更新的能力D．使用非亲缘iPS细胞不能解决干细胞移植中HLA造成的免疫排斥【答案】A〖祥解〗一、诱导多能干细胞（iPS细胞）能够通过分裂进行自我更新，也能通过细胞分化形成多种不同类型的细胞。二、原癌基因表达的蛋白质是细胞正常的生长和增殖所必需的，这类基因一旦突变或过量表达而导致相应蛋白质活性过强，就可能引起细胞癌变。相反，抑癌基因表达的蛋白质能抑制细胞的生长和增殖，或者促进细胞凋亡，这类基因一旦突变而导致相应蛋白质活性减弱或失去活性，也可能引起细胞癌变。【详析】A、原癌基因表达的蛋白质是细胞正常的生长和增殖所必需的，因此原癌基因c-Myc等基因会促进细胞的分裂，A错误；B、单基因遗传病患者使用iPS细胞治疗后，只是利用了iPS细胞分化出正常细胞来替代病变细胞，但体内依旧携带致病基因，B正确；C、iPS细胞为诱导多能干细胞，能够通过分裂进行自我更新，也能通过细胞分化形成多种不同类型的细胞，因此同时具备多向分化潜能和自我更新能力，C正确；D、非亲缘iPS细胞HLA不同，使用非亲缘iPS细胞不能解决干细胞移植中HLA造成的免疫排斥，D正确。故选A。8．科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，基本流程如图所示。下列相关叙述正确的是（）A．注射的特定抗原是正常肺细胞和肺癌细胞共有的大分子B．与植物原生质体融合相比，步骤①可用灭活的病毒诱导细胞融合C．步骤③中体外培养杂交瘤细胞时应提供95％O2和5％CO2的气体环境D．抗体—肺癌药物偶联物中的a能特异性结合并杀死肿瘤细胞【答案】B〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详析】A、题意显示，科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，据此可推测，该单抗制备过程中需要注射的特定抗原是肺癌细胞特有的大分子，A错误；B、步骤①为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，可用灭活的病毒诱导细胞融，是动物细胞特有的方法，B正确；C.步骤③中体外培养杂交瘤细胞时应提供95％空气和5％CO2的气体环境，C错误；D、抗体—肺癌药物偶联物中b代表肺癌药物，a代表抗体，所以能杀伤肿瘤细胞的为b，D错误。故选B。9．下列关于生物技术操作或应用的叙述错误的是（）A．动物细胞培养时常拧松培养瓶瓶盖，以避免杂菌污染并确保细胞所需的气体供应B．核移植时常通过显微操作法去除卵母细胞的核，此操作需刺穿透明带C．克隆动物和试管动物培育过程中均需获取卵母细胞和进行胚胎移植D．胚胎分割技术中的胚胎可以来源于核移植，提高了胚胎的利用率和成活率【答案】D〖祥解〗动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。【详析】A、细胞培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，这与培养箱内的气体可以进入细胞培养皿或培养瓶中，保证细胞对气体的需求，同时避免杂菌污染，A正确；B、核移植时常通过显微操作法去除卵母细胞的核，显微操作去核法是在刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下，去除卵母细胞核，B正确；C、克隆动物和试管动物培育过程中均需获取卵母细胞和进行胚胎移植，C正确；D、胚胎分割技术中的胚胎可以来源于核移植，能提高胚胎的利用率，不能提高成活率，D错误。故选D。10．下图为某二倍体哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图。下列叙述错误的是（）A．哺乳动物卵细胞的发生是在雌性动物的卵巢中开始的B．受精作用促进次级卵母细胞完成减数第二次分裂C．当卵细胞质膜和透明带之间出现两个极体、雌雄原核融合，表示受精作用完成D．精子接触透明带时，透明带会发生生理反应从而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗题图分析：图中细胞Ⅰ为卵原细胞，细胞Ⅱ为经过复制的初级卵母细胞，细胞Ⅲ可表示次级卵母细胞，细胞Ⅳ是经过受精作用形成的受精卵，受精卵进行的是有丝分裂。【详析】A、哺乳动物卵细胞的发生是在雌性动物的卵巢中开始的，A正确；B、受精作用促进次级卵母细胞排出第二极体完成减数第二次分裂，进而形成了雌原核，为受精做准备，B正确；C、受精完成的标志是雌雄原核融合，当卵细胞质膜和透明带之间出现两个极体、雌雄原核融合，表示受精作用完成，C正确；D、在精子接触卵细胞膜时，会发生透明带反应，能防止多个精子入卵，D错误。故选D。11．胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术，该技术流程如图。已知雄性奶牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列，依据该重复序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系（SRY-PCR）。下列叙述错误的是（）A．体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到两个极体说明受精成功B．活体采卵前诱导母牛超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C．取滋养层细胞进行SRY-PCR，应选择结果为阳性的胚胎进行移植D．受体母牛不会发生免疫排斥反应，所以移植前不需要进行免疫检查【答案】C〖祥解〗体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。（1）卵母细胞的采集和培养：①主要方法是用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后从输卵管中冲取卵子。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。（2）精子的采集和获能：①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。【详析】A、当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体或者雌、雄原核时，说明卵子已经完成了受精，A正确；B、活体采卵前诱导母牛超数排卵所注射的激素是促性腺激素只能作用于性腺，所以只能作用于特定细胞，B正确；C、取滋养层细胞进行SRY-PCR，结果为阳性的胚胎说明其含有Y染色体，为雄性，为多获得可以生产牛奶的奶牛应该选择结果为阴性的胚胎进行移植，C错误；D、受体不会对外来胚胎发生免疫排斥，因此不需要进行免疫检查，D正确。故选C。12．为了降低免疫排斥反应，研究者借助CRISPR/Cas9技术对移植的猪心脏进行了基因编辑。CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割、其机制如图所示。下列说法错误的是（）A．Cas9蛋白作用于磷酸二酯键B．sgRNA通过与目标DNA碱基互补配对引导Cas9蛋白到位C．sgRNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越低D．经过改造的转基因猪，可以利用核移植、胚胎分割得到更多的可移植器官供体【答案】C〖祥解〗基因工程中的操作工具及其作用：①“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶），能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。②“分子缝合针”——DNA连接酶，E·coliDNA连接酶，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合黏性末端和平末端。③“分子运输车”——载体。移植的器官会被人的免疫系统视作抗原加以攻击，使用免疫抑制剂可以减轻免疫排斥反应。【详析】A、由于DNA和RNA之间可进行碱基互补配对，因而sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键进而可以将目标基因剪切下来，A正确；B、由于DNA和RNA之间可进行碱基互补配对，因而sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，进而引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，B正确；C、sgRNA序列越短，DNA分子上与其互补的特定序列会越多，错误结合概率越高，C错误；D、经过改造的转基因猪，可以利用核移植，胚胎分割得到更多的可移植器官供体，D正确。故选C。13．如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）A．导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞B．利用农杆菌转化法可将含有目的基因的T－DNA整合到植物受体细胞的染色体DNA上C．扩增目的基因时，利用TaqDNA聚合酶从引物a、b的3＇端进行子链合成D．若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列【答案】A〖祥解〗将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因、启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。【详析】A、导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是乳腺细胞，而是受精卵或早期胚胎细胞，A错误；B、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物细胞中染色体的DNA上，B正确；C、引物的延伸方向为3'端，扩增目的基因时，利用耐高温的DNA聚合酶从引物a、b的3'－端进行子链合成，C正确；D、启动子是位于DNA上RNA聚合酶的结合部位，mRNA是由基因启动子后面的序列编码而来的，若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列，D正确。故选A。14．γ-氨基丁酸在医药等领域有重要的应用价值。利用L-谷氨酸脱羧酶（GadB）催化L-谷氨酸脱羧是高效生产γ-氨基丁酸的重要途径之一。研究人员采用如图方法将酿酒酵母S的L-谷氨酸脱羧酶基因（gadB）导入生产菌株E．coliA，构建了以L-谷氨酸钠为底物高效生产γ-氨基丁酸的菌株E．coliB。下列叙述正确的是（）A．上图表明，可以从酿酒酵母S中分离得到目的基因gadBB．E．coliB发酵生产γ-氨基丁酸时，L-谷氨酸钠的作用是供能C．E．coliA和E．coliB都能高效降解γ-氨基丁酸D．可以用其他酶替代NcoⅠ和KpnⅠ构建重组质粒【答案】A〖祥解〗基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+转化法；（4）目的基因的检测与鉴定：包括分子水平上的检测和个体水平上的鉴定。【详析】A、上图表明，可以从酿酒酵母S中分离得到目的基因gadB，A正确。B、题意显示，用L-谷氨酸脱羧酶（GadB）催化L-谷氨酸脱羧是高效生产γ-氨基丁酸的重要途径之一，E．coliB中能表达L-谷氨酸脱羧酶（GadB），因此可用E．coliB发酵生产γ-氨基丁酸，该过程中L-谷氨酸钠的作用不是供能，B错误；C、E．coliA中没有L-谷氨酸脱羧酶（GadB），因而不能降解L-谷氨酸，而E．coliB中含有该酶的基因，因而能高效降解L-谷氨酸，高效生产γ-氨基丁酸，C错误；D、图中质粒下方括号内备注含多克隆位点，表明质粒上含有多种限制酶的识别序列，但无法判断能否用其他酶代替，D错误。故选A。15．生殖性克隆和治疗性克隆既有相同点，又有本质的区别。下列相关叙述正确的是（）A．前者面临伦理问题，后者也会面临伦理问题B．生殖性克隆与试管婴儿都属于无性生殖C．通过生殖性克隆，可以解决人体移植器官短缺问题D．中国政府的态度是禁止治疗性克隆不反对生殖性克隆【答案】A〖祥解〗一、“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞（简称ES细胞）造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗；二、“生殖性克隆”就是以产生新个体为目的克隆。即用生殖技术制造完整的克隆人。目的是产生一个独立生存的个体。与此相对的是研究性克隆或医学性克隆，指的是产生研究所用的克隆细胞。不产生可独立生存的个体。【详析】A、生殖性克隆和治疗性克隆都涉及伦理问题，我国政府不允许进行任何生殖性克隆人实验，也同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题，A正确；B、生殖性克隆和治疗性克隆两种技术都涉及体细胞核移植技术，属于无性繁殖；试管婴儿是体外精卵结合属于有性生殖，所以它们存在本质上的区别，B错误；C、生殖性克隆由于涉及到新个体的产生，面临诸多伦理问题，不能用于解决人体移植器官短缺问题，C错误；D、中国政府的态度是禁止生殖性克隆，支持治疗性克隆，D错误。故选A。二、选择题：本题共4小题，每小题3分，共12分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。16．活性黑5是一种低毒性、难褪色的含氮染料。为从染料废水堆积池中的污泥获得分解活性黑5能力强的假单胞杆菌，具体操作流程如下图。相关叙述错误的是（）A．培养基Ⅰ中，除了活性黑5以外，还含有水、琼脂、葡萄糖、抗生素B．将细菌从培养基Ⅰ转移到培养基Ⅱ的目的是进一步分离纯化细菌C．高浓度的活性黑5是为了诱导假单胞杆菌发生基因突变D．据图可知，驯化后的假单胞杆菌增强了BVU5基因的复制【答案】ACD〖祥解〗培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对特殊营养物质和氧气的要求。【详析】A、培养基Ⅰ是选择培养基，除了以活性黑5为唯一氮源外，还需添加的成分是葡萄糖（碳源）、水、琼脂（凝固剂），抗生素起杀菌作用，不在该培养基中使用，A错误；B、培养基Ⅰ接种的是污泥稀释液，培养基Ⅱ接种的则是培养基Ⅰ中初步筛选出来的菌株，因而将细菌从培养基Ⅰ转移到培养基Ⅱ的目的是进一步分离纯化细菌，B正确；C、实验目的是从染料废水堆积池中的污泥获得分解活性黑5能力强的假单胞杆菌，使用高浓度的活性黑5的目的是不断筛选出分解黑5能力强的假单胞杆菌，C错误；D、根据图1分析可知，驯化后的假单胞杆菌BVU5基因表达水平升高，即增强了BVU5基因的转录和翻译，D错误。故选ACD。17．骆驼蓬分布在干旱和半干旱地区，能防风固沙。骆驼蓬合成的多种生物碱具有抗肿瘤作用。科研人员利用骆驼蓬下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如下图。下列说法错误的是（）A．下胚轴切段需依次用酒精和次氯酸钠进行消毒处理B．除培养基中植物激素比例不同外，进行过程①③的其他条件相同C．由无毒下胚轴经组织培养获得的骆驼蓬无毒幼苗可抵抗病毒的侵染D．在①②③过程中利用PEG处理培养物，可以获得染色体数加倍的骆驼蓬【答案】BCD〖祥解〗植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖、作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详析】A、为避免杂菌污染，对外植体进行消毒处理的操作为：将流水充分冲洗后的外植体（幼嫩的茎段）用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2～3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2～3次，A正确；B、进行①和③过程的外界培养条件不同，①过程不需要光照，③过程需要光照，B错误；C、由无毒下胚轴经组织培养获得的骆驼蓬无毒幼苗只是不带病毒，并不是能抵抗病毒的侵染，C错误；D、因植物细胞外面的细胞壁阻碍了细胞间的杂交，所以在①②③过程中利用PEG处理培养物，不能获得染色体数加倍的骆驼蓬，D错误。故选BCD。18．杂交瘤细胞在培养过程中会随机丢失来自B淋巴细胞的染色体。研究者将经已免疫的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，使其“染色体核型稳定”。下图表示制备抗A抗原单克隆抗体制备的部分过程，不考虑基因互作和其他变异。下列叙述正确的是（）注：EBV转化细胞能够在选择培养基X中存活，但对乌本苷敏感，骨髓瘤细胞在选择培养基X中不能存活，对乌本苷不敏感。①～⑤代表相关过程，a～g代表相关细胞。A．①向小鼠多次注射A抗原后从脾脏中获得大量a细胞B．③用不含乌本苷的选择培养基X筛选融合的杂交瘤细胞C．⑤过程中通过离心获得的培养液中可获得抗A抗原的单克隆抗体D．若未用EBV感染a细胞，通过研究g中细胞可对抗体基因初步定位【答案】ACD〖祥解〗单克隆抗体的制备：注射特定抗原、从小鼠的脾脏中获得产生特定抗体的B淋巴细胞、将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合、用特定选择培养基筛选出杂交瘤细胞、再利用克隆化培养和抗体检测获得足够多数量的能分泌所需抗体的细胞、将该细胞在体外培养或者注射到小鼠腹腔内增殖、从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量单克隆抗体。【详析】A、①向小鼠多次注射A抗原获得能产生相应抗体的a细胞（相应的B淋巴细胞），A正确；B、分析题意，EBV转化细胞能够在选择培养基X中存活，但对乌本苷敏感，骨髓瘤细胞在选择培养基X中不能存活，对乌本苷不敏感，故③用含乌本苷的选择培养基X筛选出杂交瘤细胞，B错误；C、抗体属于分泌蛋白，细胞会分泌到细胞外，故⑤过程中通过离心获得的培养液中可获得抗A抗原的单克隆抗体，C正确；D、杂交瘤细胞在传代培养时，来自B淋巴细胞的染色体往往会随机丢失，从而导致得到的杂交瘤细胞不能产生抗体，故若未用EBV感染a细胞，通过研究g中的细胞可对抗体基因初步定位，D正确。故选ACD。19．将从苏云金杆菌中获取的Bt基因转入棉花细胞内培育转基因抗虫棉的过程中，需借助多种分子工具经历多个操作步骤。实验人员使用限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割质粒。下图表示常用的限制酶识别序列和切割位点以及质粒上的限制酶切割位点。下列说法正确的是（）A．应选用限制酶MunⅠ和XbaⅠ切割Bt基因才能使之与切割后的质粒相连B．启动子是RNA聚合酶的识别位点，但不是转录成的起始位点序列C．从Bt基因扩增到基因表达载体构建完成共需要5种酶发挥催化作用D．可通过PCR技术检测棉花的染色体DNA中是否插入了Bt基因【答案】BD〖祥解〗限制酶识别DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位将两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒。题中根据不同限制酶的识别序列及切割位点，可对限制酶进行选择。【详析】A、据图，EcoRⅠ切割后的黏性末端和MunⅠ切割后的黏性末端是互补的，NheⅠ切割的黏性末端和SpeⅠ切割的黏性末端是互补的，所以应选择用EcoRⅠ和NheⅠ去切割质粒，用MunⅠ和SpeⅠ切割目的基因，XbaⅠ会切断目的基因，不能选择，A错误；B、启动子是RNA聚合酶识别的部位，能驱动基因转录出mRNA。但启动子是非编码区的DNA序列，该序列不会作为RNA的转录模板，转录的起始位点是位于启动子后面的序列，B正确；C、切割质粒需要的酶是EcoRⅠ、NheⅠ，Bt基因扩增需要DNA聚合酶，切割Bt基因需要的酶是MunⅠ、SpeⅠ，将Bt基因和质粒连接需要DNA连接酶，共需要6种酶，C正确；D、检测棉花的染色体DNA中是否插入了Bt基因，可提取棉花的染色体DNA，用Bt基因的特异性引物进行PCR扩增，如能扩增出Bt基因说明插入成功，反之则失败，D正确。故选BD。三、非选择题：本题共5小题，共58分。20．土壤中的磷大多数以难溶性磷酸盐（如Ca3（PO4）2）的形式存在，不利于植物吸收。科研人员尝试从土壤中筛选将难溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌（可形成溶磷圈），主要流程如图1所示。请回答下列问题：（1）步骤②需充分震荡20min，主要目的是，步骤③将土壤悬浮液稀释了倍。（2）步骤④中的培养基的成分是：葡萄糖、（NH4）2SO4、NaCl、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4·7H2O、MnSO4、Ca3（PO4）2、琼脂粉等。按照培养基成分的不同，该培养基为，其中氮源是。步骤④使用的接种工具为。（3）步骤⑤使用接种环挑取步骤④培养基中的菌落（选填图中的字母），采用的方法在培养基表面接种，目的是。（4）将得到的高效解磷菌接入已灭菌的含难溶磷的液体培养基中培养，每天取样测定溶磷量和pH变化情况，结果如图2所示。①结果表明，高效解磷菌分解难溶磷的能力呈现的趋势。②根据培养液的pH变化情况，推测高效解磷菌的溶磷原理为。（5）请预期该高效解磷菌在农业生产方面可能的应用是（答出1点即可）。【答案】（1）使土壤中的微生物充分释放到水中1000（2）合成培养基（NH4）2SO4涂布器（3）a平板划线获得单菌落（4）先上升后下降溶磷菌可能通过产生酸性代谢物分解难溶磷（5）可将其制成微生物菌肥促进植物对磷元素的吸收〖祥解〗培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。【详析】（1）土壤中含有多种微生物和有机质，步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中；由图观察可知，步骤③中的稀释梯度分别为10、100、1000倍，步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍。（2）根据培养基的化学成分可以把培养基分成合成培养基和天然培养基等，题干中培养基成分完全清楚，该培养基为合成培养基，其中氮源是（NH4）2SO4，步骤④用涂布器涂布。（3）透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小，该比值越大，溶磷能力越强，故待菌落长好后挑出溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较大的菌落；题图可知，应该挑选a菌落；步骤⑤是平板划线操作，该操作的目的是获得单个菌落。（4）①据图可知，1~4d溶磷量随时间延长而逐渐增多，在4~8d溶磷量随时间延长而逐渐减少，即目的菌分解难溶磷的能力先升高后降低②由图可知，加入溶磷菌后培养基的pH迅速降低，溶磷量逐渐增多，之后随着pH回升，溶磷量逐渐减少，据此推测溶磷菌可能通过产生酸性代谢物分解难溶磷。（5）土壤中的磷大部分以难被植物吸收利用的无效态存在，而溶磷菌可将难溶态磷分解为可被植物直接利用的可溶性磷，故可将其制成微生物菌肥促进植物对磷元素的吸收。21．不对称体细胞杂交是指利用射线破坏染色质的供体细胞，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。科研人员用大剂量的X射线处理拟南芥（2n=10）的原生质体，然后诱导其与柴胡（2n=12）的原生质体融合，最终获得不对称杂种植株。回答下列问题：（1）为获得拟南芥和柴胡的原生质体，可将流水冲洗后的外植体用消毒，然后立即用无菌水冲洗，一般再用氯化汞溶液处理5min后，立即用无菌水冲洗。消毒后的外植体用小刀切碎，放入含有酶的缓冲液中，以获得原生质体。（2）可采用二乙酸荧光素（FAD）法测定原生质体活力，已知FAD本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过细胞膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择的原生质体用于融合。（3）获得的原生质体可使用等化学方法（写出一种）诱导融合，融合完成的标志是，在杂种细胞形成杂种植株的过程中，需要避光培养的是阶段，诱导生根的过程中，细胞分裂素和生长素的比值（“=1”、“>1”、“<1”）（4）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，统计结果如下表所示：后代植株类型染色体数目形态DNA分子标记鉴定甲12，与柴胡染色体相似含双亲DNA片段乙12，与柴胡染色体相似无拟南芥DNA片段丙12，与柴胡染色体相似含双亲DNA片段和新的DNA片段由表可知，后代植株中类型一定不是杂种植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，拟南芥亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组，作出以上推测的依据是。【答案】（1）酒精/75%酒精/70%酒精纤维素酶和果胶酶（2）发出荧光（3）PEG/高Ca2+-高pH再生出细胞壁脱分化<1（4）乙甲、丙类型植株细胞的染色体与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段〖祥解〗植物原生质体培养技术：首先用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁得到原生质体，然后向原生质体中导入抗病基因或含有抗病基因的染色体片段，转移至合适的环境中，在高尔基体的作用下再生细胞壁、形成愈伤组织、再分化生根生芽，最终发育成完整的植株。【详析】（1）外植体先用体积分数为70%的酒精消毒30s，无菌水冲洗后，再用质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液处理30min。消毒后的外植体用小刀切碎，加入含有纤维素酶和果胶酶的酶溶液，水浴加热一段时间后，过滤、离心即可获得原生质体。（2）根据题干信息可知，绿色荧光的强度与原生质体的活力呈正相关，因此应选择发荧光的原生质体用于融合。（3）诱导原生质体融合的化学方法有聚乙二醇融合法和高Ca2+-高pH融合法。原生质体融合完成的标志是融合细胞再生出新的细胞壁。在杂种细胞形成杂种植株的过程中，需要避光培养的是再生出细胞壁脱分化阶段，细胞分裂素和生长素的比值<1，诱导生根。（4）根据表格信息可知，植株后代乙无拟南芥DNA片段，说明其不是杂种植株。甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段，说明甲、丙植株属于杂种植株，它们的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，拟南芥亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以遗传物质重组的方式整合进柴胡的基因组。22．牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原体，它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体，进行相关研究。请回答下列问题：（1）以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，需用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是刺激机体产生更多的，将该细胞与骨髓瘤细胞融合，在HAT培养基上，细胞不能生长，从而筛选获得杂交瘤细胞。（2）杂交瘤细胞（填“能”或“不能”）产生专一抗体，所产生的抗体（填“一定”或“不一定”）能抗VspX蛋白。（3）将上述筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种个杂交瘤细胞以实现，然后通过ELISA法（又称酶联免疫吸附试验法）检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，可与结合的培养孔为阳性孔。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，最终从中获取大量抗VspX抗体。（4）将抗VspX抗体与不同抗原进行杂交，免疫印迹分析如图所示，实验结果显示，表明抗VspX抗体具有。【答案】（1）分泌抗VspX抗体的B淋巴细胞同种细胞融合的细胞和未融合的（2）能不一定（3）1克隆化培养VspX蛋白小鼠腹水（4）抗VspX单克隆抗体不能与3、4结合特异性〖祥解〗单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A、B、AA、BB型细胞；第二次筛选：利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。【详析】（1）依据题干信息，制备以VspX蛋白为抗原制备单克隆抗体，首先需要用纯化的VspX蛋白对小鼠进行多次免疫，其目的是为了刺激机体产生更多的分泌抗VspX抗体的B淋巴细胞（浆细胞），然后利用细胞融合技术，将该细胞与骨髓瘤细胞融合，在HAT培养基上，淘汰掉同种细胞融合的细胞和未融合的B细胞和瘤细胞，从而筛选获得杂交瘤细胞。（2）一种浆细胞只能产生一种抗体，故杂交瘤细胞能产生专一抗体，筛选出来的杂交瘤细胞有多种，不一定能产生抗VspX蛋白的抗体，故杂交瘤细胞所产生的抗体不一定能抗VspX蛋白。（3）将筛选出的杂交瘤细胞培养、稀释后接种到96孔培养板中，每一个孔中尽量只接种1个杂交瘤细胞以实现克隆化培养，然后通过ELISA法检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，可与VspX蛋白结合的培养孔为阳性孔。然后将抗原-抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射小鼠腹腔内增殖，最终从小鼠的腹水中获取抗VspX抗体。（4）据图可知，抗VspX抗体不能与3、4结合，也说明了抗VspX抗体具有特异性。23．近年来，我国科研工作者在国际上首次利用体细胞成功创建克隆猕猴中中、华华和梦梦。体细胞克隆猴的诞生，是人类认识克隆技术，研究细胞功能和治疗性克隆的里程碑式研究结果。同时，也是人类干细胞研究方兴未艾事业的一个开始。克隆上述猕猴的操作流程如图1。与此同时，我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞（AdESCs），操作流程如图2。请回答下列问题：（1）利用酶处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。然后放入气体条件是的恒温箱中培养。（2）请你推测图1中注入的神秘浓度比的药物的作用是，注入细胞的方法是。（3）通常情况下，卵母细胞要发育到减数第次分裂中期时才适合核移植，早期胚胎要发育到时才适合进行胚胎移植。（4）我们大胆推测，通过体细胞克隆猴的研究，将来会找到让高度分化的人体细胞逆向生成胚胎干细胞的方法，进而诱导克隆出用于替换人体相应病变的结构。（5）图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞的原因是二者之间存在。【答案】（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）95%空气和5%的CO2（2）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程显微注射法（3）二/Ⅱ桑葚胚或囊胚（4）相应器官（5）动物细胞融合生殖隔离〖祥解〗动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。【详析】（1）用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理组织可分散成单个细胞，故利用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理一只流产猕猴胎儿的皮肤，获取分散的成纤维细胞，制备细胞悬液。动物细胞培养过程中，培养箱的气体条件是95%空气和5%的CO2。（2）结合图可知，注入的神秘浓度比的药物的作用是激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。图1中的重组细胞是动物细胞，将神秘浓度比的药物注入细胞的方法是显微注射法。（3）卵母细胞培养到减数第二次分裂中期时，细胞已经成熟，具备受精能力，故卵母细胞要发育到减数第二次分裂中期时才适合核移植，早期胚胎要发育到桑葚胚或囊胚时才适合进行胚胎移植。（4）通过体细胞克隆猴的研究，我们将来会找到方法，让高度分化的人体细胞逆向生成胚胎干细胞，并定向诱导胚胎干细胞克隆出相应器官用于替换人体相应病变结构。（5）图2过程涉及的现代生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和动物细胞融合（孤雌单倍体胚胎干细胞和孤雄单倍体胚胎干细胞融合）。由题干可知，大鼠和小鼠是两个远亲物种，二者之间存在生殖隔离，自然状态下无法完成受精作用，或者即便能完成也不能发育，因此不用大鼠和小鼠直接交配制备异源二倍体胚胎干细胞。24．A蛋白是某种激素合成的关键酶。为鉴定该激素合成的部位及生理作用，科研团队利用无缝克隆技术将A蛋白结合蛋白基因（P基因）与葡萄糖苷酸酶基因（GUS基因）融合，构建A蛋白检测探针，通过农杆菌转化法导入拟南芥进行实验。相关原理、过程及质粒的结构如下图所示。请分析回答：（1）无缝克隆原理图中，过程①中T5核酸外切酶沿的方向水解DNA，其目的是形成。过程③所需的酶有。（2）与传统的酶切再连法相比，无缝克隆技术可实现多个片段的连接，且操作时间短、成功率高。NEB官方的无缝克隆线上设计软件强制输入片段的长度必须大于75bp，并提示最好不低于110bp。请推测无缝克隆技术不适合连接小于50bp小片段的原因：（3）图中利用无缝克隆技术构建GUS-P融合基因的关键是引物F1与互补。（4）图中利用双酶切法将融合基因插入Ti质粒，应选用的限制酶为。扩增GUS-P融合基因所需的引物R1序列（5'→3'）的设计依据为（填序号：①同源序列②限制酶的识别序列③P基因的部分序列④GUS基因的部分序列）。据图分析，引物R1和F2应分别为下列引物。①5'-TAAGTTGTCT……-3'②5'-CTTGGATGAT……-3'③5'-TCTGTTGAAT……-3'④5'-ATTCAACAGA……-3'（5）利用农杆菌转化法将目的基因导入拟南芥细胞后，进行植物组培。用对组培苗进行筛选。已知葡萄糖苷酸酶可以水解X-Gluc呈蓝色，将转基因拟南芥置于不同培养液中培养一段时间，然后分离不同部位的组织分别加入X-Gluc进行鉴定，结果如下表所示：部位根茎叶完全培养液蓝色浅蓝浅蓝缺磷培养液深蓝蓝色浅蓝根据上表实验结果分析，该激素最主要的合成部位是，该激素的生理作用是。【答案】（1）5'→3'黏性末端DNA聚合酶和DNA连接酶（2）小片段的DNA黏性末端之间容易随机结合，导致连接效率低且错误率高（3）R2引物5'端序列（4）BclI和SmaI②③②③（5）两根促进植物对磷元素的吸收〖祥解〗基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。【详析】（1）由图可知，无缝克隆时，过程①中T5核酸外切酶沿5'→3'的方向水解DNA，以形成黏性末端。过程③缺口处DNA链的补齐，可以看作DNA分子的复制过程，所需的酶有DNA聚合酶（DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到子链3′-OH末端）和DNA连接酶（将两个DNA片段进行连接）。（2）无缝克隆技术不适合连接小于50bp的小片段，原因可能是小片段的DNA黏性末端之间容易随机结合，导致连接效率低且错误率高。此外，小片段的DNA在操作过程中也更容易丢失或损坏，进一步降低了连接的成功率。因此，NEB官方的无缝克隆线上设计软件会强制输入片段的长度必须大于75bp，并提示最好不低于110bp，以确保连接的效率和准确性。（3）DNA的两条链是反向平行的，用无缝克隆技术构建GUS-P融合基因的关键是引物F13'端序列与R2引物5'端序列互补。（4）利用双酶切法将GUS-P融合基因插入Ti质粒的T-DNA区，如果使用BamHI，会破坏抗性基因Tet'和抗性基因Amp，故选择BclI和SmaI。扩增GUS−P融合基因所需的引物R1序列的设计需要依据P基因的部分序列和限制酶的识别序列，故选②③。根据融合基因的放大图可知，扩增时以DNA的两条链分别作模板，扩增融合基因所需的引物R1和F2应选用下列引物组合为3'端序列可以与③5'-…TCTGTTGAAT-3'配对，5'端序列的互补链可以与②5'-…CTTGGATGAT-3'配对，因此选用的引物组合为②③。（5）利用农杆菌转化法将融合基因导入农杆菌、拟南芥细胞的过程中，需要筛选两次，这两次筛选分别是先筛选出能在含四环素培养基上生长而不能在含氨苄青霉素培养基上生长的农杆菌，再用含草甘膦的培养基筛选出导入融合基因的拟南芥细胞。葡萄糖苷酸酶可以水解X-Gluc呈蓝色，根据表格可知，在完全培养液中，只有根呈现蓝色，说明该激素最主要的合成部位是根，与完全培养液相比，在缺磷培养液中，根的颜色变为深蓝，而在含磷的完全培养液中出现蓝色，说明该激素的生理作用是促进植物对磷元素的吸收，促进葡萄糖苷酸酶合成，水解X-Gluc呈蓝色。2024-2025学年高二生物下学期期中模拟卷（江苏专用）（考试时间：75分钟试卷满分：100分）注意事项：1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。4．测试范围：选必三全部5．难度系数：0.76．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。1．研究者用酸笋开发具有降低胆固醇功能的益生菌。先将酸笋发酵液接种到含有CaCO3的固体培养基上，筛选出乳酸菌，然后将乳酸菌接种到含有胆固醇的培养液中，筛选出能够降解胆固醇的乳酸菌。下列叙述正确的是（）A．酸笋发酵过程中需要定期排气以确保发酵罐内压强稳定B．与酸笋风味形成相关的乳酸菌为厌氧型，所以不会分布在空气中C．培养基上生长的菌落直径与溶钙圈直径比值小的菌落即为目标菌落D．胆固醇既可为乳酸菌的生长提供氮源，也可参与动物细胞膜的组成【答案】C〖祥解〗酸笋制作的原理是：乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。【详析】A、乳酸菌是厌氧菌，发酵过程中不产生气体，不需要定期排气，A错误；B、在自然界中，乳酸菌分布广泛，空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内都分布有乳酸菌，B错误；C、乳酸菌发酵产生的乳酸能与CaCO3发生反应，使CaCO3分解成可溶性物质乳酸钙和CO2，导致菌落周围出现溶钙圈，故溶钙圈直径与菌落直径的比值可代表微生物溶解CaCO3的能力大小，比值越大微生物溶解CaCO3的能力越大，培养基上生长的菌落直径与溶钙圈直径比值小的菌落即为目标菌落，C正确；D、胆固醇属于脂质，含有C、H、O元素，主要为微生物的生长提供碳源，胆固醇是构成动物细胞膜的重要成分，D错误。故选C。2．亚硝酸细菌为一类可将NH3氧化为HNO2的化能自养细菌，因其常常和其他细菌伴生在一起难以纯化。下图为从某污水厂污泥中分离、筛选和鉴定亚硝酸细菌的示意图，相关叙述错误的是（）A．过程①接种9个平板，目的是在合适的浓度下筛选出相应的单菌落B．过程②挑取单个菌落接种到斜面上保存，并在试管底部做好标记C．过程③进行平板划线，可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面D．与富集培养基相比，筛选亚硝酸细菌的培养基中应不含有机碳源【答案】B〖祥解〗微生物常见的接种的方法：①平板划线法：通过接种环在固体培养基表面连续划线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落，这种接种方法称为平板划线法。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详析】A、过程①接种9个平板，目的是在合适的浓度下筛选出相应的单菌落，同一浓度下接种了3个平板的目的是排除偶然因素的影响，实现平行重复，A正确；B、过程②挑取单个菌落接种到斜面上保存，并在试管壁上做好标记，B错误；C、过程③进行平板划线，可将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，进而可以获得单个菌落，C正确；D、亚硝酸细菌为一类可将NH3氧化为HNO2的化能自养细菌，因此，与富集培养基相比，筛选亚硝酸细菌的培养基中应不含有机碳源，D正确。故选B。3．某酿酒厂以无核黄皮果为辅料研制出黄皮甜米酒，该酒具有消食、润肺和清热解毒等功效。制作黄皮甜米酒的工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（）A．对糯米进行蒸煮可利用高温杀死杂菌，并有利于细胞破裂释放糖类用于发酵B．甜酒曲中的根霉能产生糖化酶，将淀粉依次水解为蔗糖、葡萄糖C．酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，代谢物的生成在后发酵阶段完成D．黄皮甜米酒口感好、酒精度低，适宜长期大量饮用【答案】A〖祥解〗发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵。【详析】A、对糯米进行蒸煮的主要目的是使淀粉颗粒吸水膨胀并糊化，便于淀粉酶的作用，同时也可利用高温能杀死原料中的杂菌，并有利于细胞破裂释放糖类用于发酵，A正确；B、甜酒曲中的根霉能产生糖化酶，将淀粉依次水解为麦芽糖、葡萄糖，B错误；C、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，C错误；D、黄皮甜米酒虽然口感好、酒精度低，但不适宜长期大量饮用，D错误。故选A。4．南通某学校生物研究小组以蝴蝶兰为材料开展了植物组织培养试验，过程如下图。相关叙述错误的是（）A．取带芽花梗作外植体，是因为芽可产生生长素而更易成活B．花梗插入培养基前要用无水酒精和次氯酸钠进行消毒处理C．过程c、d和e使用的培养基中所含的物质比例存在差异D．过程f“炼苗”目的在于提高组培苗对外界环境条件的适应性【答案】B〖祥解〗组织培养的过程：（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可直接进行扦插生根。（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。激素比值的变化，对生根还是生芽是不同的。当细胞分裂素大于生长素时，促进芽的分化；当细胞分裂素小于生长素时，促进根的分化。【详析】A、芽属于幼嫩部位，能产生生长素，因此取带芽花梗作外植体更易成活，A正确；B、花梗插入培养基前要用体积分数为70%的酒精和体积分数为5%左右的次氯酸钠进行消毒处理，B错误；C、过程c、d和e属于脱分化、再分化和幼苗的生长发育，使用的培养基中所含的物质如激素比例存在差异，C正确；D、过程f“炼苗”是由于试管苗长得弱小，光合能力弱，适应性差，因此需要移栽到野外使其逐渐适应室外环境，提高组培苗对外界环境条件的适应性，D正确。故选B。5．为培育“高产耐盐碱”的水稻植株，某研究小组利用植物体细胞杂交技术设计了如下实验流程图。已知耐盐、高产性状分别受细胞质基因和细胞核基因控制，相关叙述错误的是（）A．①过程可通过观察原生质体的结构与颜色来判断其融合情况B．②过程体现了植物细胞全能性，它是植物体细胞杂交的理论基础C．失活处理后，原生质体A2的细胞质和原生质体B2的细胞核失活D．去壁处理需用到纤维素酶和果胶酶混合酶液，酶液渗透压可略高于细胞液【答案】C〖祥解〗植物体细胞杂交技术：（1）植物体细胞杂交技术：是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。（2）过程：①诱导融合的方法：物理法；化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成；③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。【详析】A、由于叶绿体有颜色且有特定结构，①过程的细胞融合中可通过观察原生质体的结构与颜色来判断其融合情况，A正确；B、②过程是将杂种细胞经组织培养得到再生植株的过程，植物的组织培养体现了植物细胞全能性，它是植物体细胞杂交的理论基础之一，B正确；C、由于耐盐、高产性状分别受细胞质基因和细胞核基因控制，在促使原生质体融合前，需对原生质体进行失活处理，分别使原生质体A2的细胞核失活和原生质体B2的细胞质失活，C错误；D、用纤维素酶和果胶酶混合液酶解细胞壁获取原生质体时应置于较高渗透压溶液中（或等渗溶液）进行，可防止原生质体吸水胀破，D正确。故选C。6．下列有关植物组织培养技术的叙述，错误的是（）A．利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体B．经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞丧失分裂分化能力C．利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株D．培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向【答案】B〖祥解〗植物组织培养过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育成植株。植物组织培养技术有广泛的应用：植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详析】A、愈伤组织细胞处于分生状态，易受外界环境因素影响，因此利用植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体，A正确；B、经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞具有细胞全能性，在一定条件下可培育成植株个体，B错误；C、茎尖部位的病毒较少，花粉是植物的雄配子，染色体数目减半，故利用茎尖、花粉进行组织培养可分别获得脱毒苗和单倍体植株，C正确；D、决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，如培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向，D正确。故选B。7．我国科学家使用小分子化合物处理小鼠体细胞，成功获得诱导多能干细胞（iPS细胞），降低了通过导入原癌基因c-Myc等基因制备iPS细胞的潜在成瘤风险。下列叙述错误的是（）A．iPS细胞的潜在成瘤风险来自于c-Myc基因抑制了细胞的分裂分化B．单基因遗传病患者使用iPS细胞治疗后，体内仍可能携带致病基因C．人工制备的iPS细胞同时具备多方向分化的潜能和自我更新的能力D．使用非亲缘iPS细胞不能解决干细胞移植中HLA造成的免疫排斥【答案】A〖祥解〗一、诱导多能干细胞（iPS细胞）能够通过分裂进行自我更新，也能通过细胞分化形成多种不同类型的细胞。二、原癌基因表达的蛋白质是细胞正常的生长和增殖所必需的，这类基因一旦突变或过量表达而导致相应蛋白质活性过强，就可能引起细胞癌变。相反，抑癌基因表达的蛋白质能抑制细胞的生长和增殖，或者促进细胞凋亡，这类基因一旦突变而导致相应蛋白质活性减弱或失去活性，也可能引起细胞癌变。【详析】A、原癌基因表达的蛋白质是细胞正常的生长和增殖所必需的，因此原癌基因c-Myc等基因会促进细胞的分裂，A错误；B、单基因遗传病患者使用iPS细胞治疗后，只是利用了iPS细胞分化出正常细胞来替代病变细胞，但体内依旧携带致病基因，B正确；C、iPS细胞为诱导多能干细胞，能够通过分裂进行自我更新，也能通过细胞分化形成多种不同类型的细胞，因此同时具备多向分化潜能和自我更新能力，C正确；D、非亲缘iPS细胞HLA不同，使用非亲缘iPS细胞不能解决干细胞移植中HLA造成的免疫排斥，D正确。故选A。8．科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，基本流程如图所示。下列相关叙述正确的是（）A．注射的特定抗原是正常肺细胞和肺癌细胞共有的大分子B．与植物原生质体融合相比，步骤①可用灭活的病毒诱导细胞融合C．步骤③中体外培养杂交瘤细胞时应提供95％O2和5％CO2的气体环境D．抗体—肺癌药物偶联物中的a能特异性结合并杀死肿瘤细胞【答案】B〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详析】A、题意显示，科研人员研发出单克隆抗体—肺癌药物偶联物，以减少肺癌药物对正常细胞的伤害，据此可推测，该单抗制备过程中需要注射的特定抗原是肺癌细胞特有的大分子，A错误；B、步骤①为B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，可用灭活的病毒诱导细胞融，是动物细胞特有的方法，B正确；C.步骤③中体外培养杂交瘤细胞时应提供95％空气和5％CO2的气体环境，C错误；D、抗体—肺癌药物偶联物中b代表肺癌药物，a代表抗体，所以能杀伤肿瘤细胞的为b，D错误。故选B。9．下列关于生物技术操作或应用的叙述错误的是（）A．动物细胞培养时常拧松培养瓶瓶盖，以避免杂菌污染并确保细胞所需的气体供应B．核移植时常通过显微操作法去除卵母细胞的核，此操作需刺穿透明带C．克隆动物和试管动物培育过程中均需获取卵母细胞和进行胚胎移植D．胚胎分割技术中的胚胎可以来源于核移植，提高了胚胎的利用率和成活率【答案】D〖祥解〗动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。【详析】A、细胞培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，这与培养箱内的气体可以进入细胞培养皿或培养瓶中，保证细胞对气体的需求，同时避免杂菌污染，A正确；B、核移植时常通过显微操作法去除卵母细胞的核，显微操作去核法是在刺破透明带或卵母细胞质膜的情况下，去除卵母细胞核，B正确；C、克隆动物和试管动物培育过程中均需获取卵母细胞和进行胚胎移植，C正确；D、胚胎分割技术中的胚胎可以来源于核移植，能提高胚胎的利用率，不能提高成活率，D错误。故选D。10．下图为某二倍体哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图。下列叙述错误的是（）A．哺乳动物卵细胞的发生是在雌性动物的卵巢中开始的B．受精作用促进次级卵母细胞完成减数第二次分裂C．当卵细胞质膜和透明带之间出现两个极体、雌雄原核融合，表示受精作用完成D．精子接触透明带时，透明带会发生生理反应从而阻止多精入卵【答案】D〖祥解〗题图分析：图中细胞Ⅰ为卵原细胞，细胞Ⅱ为经过复制的初级卵母细胞，细胞Ⅲ可表示次级卵母细胞，细胞Ⅳ是经过受精作用形成的受精卵，受精卵进行的是有丝分裂。【详析】A、哺乳动物卵细胞的发生是在雌性动物的卵巢中开始的，A正确；B、受精作用促进次级卵母细胞排出第二极体完成减数第二次分裂，进而形成了雌原核，为受精做准备，B正确；C、受精完成的标志是雌雄原核融合，当卵细胞质膜和透明带之间出现两个极体、雌雄原核融合，表示受精作用完成，C正确；D、在精子接触卵细胞膜时，会发生透明带反应，能防止多个精子入卵，D错误。故选D。11．胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术，该技术流程如图。已知雄性奶牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列，依据该重复序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系（SRY-PCR）。下列叙述错误的是（）A．体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到两个极体说明受精成功B．活体采卵前诱导母牛超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞C．取滋养层细胞进行SRY-PCR，应选择结果为阳性的胚胎进行移植D．受体母牛不会发生免疫排斥反应，所以移植前不需要进行免疫检查【答案】C〖祥解〗体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。（1）卵母细胞的采集和培养：①主要方法是用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后从输卵管中冲取卵子。②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。（2）精子的采集和获能：①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。【详析】A、当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体或者雌、雄原核时，说明卵子已经完成了受精，A正确；B、活体采卵前诱导母牛超数排卵所注射的激素是促性腺激素只能作用于性腺，所以只能作用于特定细胞，B正确；C、取滋养层细胞进行SRY-PCR，结果为阳性的胚胎说明其含有Y染色体，为雄性，为多获得可以生产牛奶的奶牛应该选择结果为阴性的胚胎进行移植，C错误；D、受体不会对外来胚胎发生免疫排斥，因此不需要进行免疫检查，D正确。故选C。12．为了降低免疫排斥反应，研究者借助CRISPR/Cas9技术对移植的猪心脏进行了基因编辑。CRISPR/Cas9系统主要由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白两部分组成，sgRNA可引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割、其机制如图所示。下列说法错误的是（）A．Cas9蛋白作用于磷酸二酯键B．sgRNA通过与目标DNA碱基互补配对引导Cas9蛋白到位C．sgRNA会因错误结合而出现“脱靶”现象，一般sgRNA序列越短，脱靶率越低D．经过改造的转基因猪，可以利用核移植、胚胎分割得到更多的可移植器官供体【答案】C〖祥解〗基因工程中的操作工具及其作用：①“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶），能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。②“分子缝合针”——DNA连接酶，E·coliDNA连接酶，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合黏性末端和平末端。③“分子运输车”——载体。移植的器官会被人的免疫系统视作抗原加以攻击，使用免疫抑制剂可以减轻免疫排斥反应。【详析】A、由于DNA和RNA之间可进行碱基互补配对，因而sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，Cas9蛋白作用于磷酸二酯键进而可以将目标基因剪切下来，A正确；B、由于DNA和RNA之间可进行碱基互补配对，因而sgRNA可以特异性识别目标DNA分子，进而引导Cas9蛋白到特定基因位点进行切割，B正确；C、sgRNA序列越短，DNA分子上与其互补的特定序列会越多，错误结合概率越高，C错误；D、经过改造的转基因猪，可以利用核移植，胚胎分割得到更多的可移植器官供体，D正确。故选C。13．如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列叙述错误的是（）A．导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞B．利用农杆菌转化法可将含有目的基因的T－DNA整合到植物受体细胞的染色体DNA上C．扩增目的基因时，利用TaqDNA聚合酶从引物a、b的3＇端进行子链合成D．若某基因是从人的细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因中不含启动子序列【答案】A〖祥解〗将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。基因表达载体常包括目的基因、启动子、终止子、标记基因。标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。【详析】A、导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞不是