微生物检验技术(094)(副高级)高级卫生专业技术资格考试试题及解答参考(2025年)

2025年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术

(094)(副高级)自测试题及解答参考

一、单项选择题(本大题有25小题，每小题1分，共25分)

1、下列哪种方法最适合用于检测结核分枝杆菌的耐药性？

A.直接比例法

B.E-test法

C.微量肉汤稀释法

D.PCR-熔解曲线分析

【答案】D.PCR-熔解曲线分析

【解析】PCR-熔解曲线分析可以快速检测结核分枝杆菌的基因突变，从而判断其对

特定抗结核药物的敏感性或耐药性，而其他选项虽然也可用于微生物的药敏试验，但对

于结核分枝杆菌来说，PCR方法更为高效且准确。

2、在细菌鉴定过程中，使用APT系统时，关键的操作步骤是什么？

A.将细菌接种于API测试条中的各个小孔内

B.确保所有的孔都加入了适当的培养基

C.在37°C下温育一定时间

D.使用比色卡进行结果读取

【答案】A.将细菌接种于API测试条中的各个小孔内

【解析】API(AnalyticalProfileIndex)系统是一种广泛使用的细菌鉴定方法,

其中最重要的一步就是正确地将待测菌株接种到API测试条的各个含有不同生叱反应

底物的小孔内，这样才能保证后续的反应能够发生，从而得到准确的结果。其余步骤虽

然也重要，但并非最关键的操作步骤。

3、题干：在进行细菌培养时，下列哪项操作会导致培养失败？

A.使用过期培养基

B.将培养皿放置在适宜温度的培养箱中

C.使用无菌技术操作

D.正确添加细菌样本

答案：A

解析：使用过期培养基会导致培养基的营养成分发生改变，影响细菌的生长，从而

可能导致培养失败。其他选项均属于正确的细菌培养操作。

4、题干：在微生物检验过程中，下列哪项操作可以降低污染率？

A.使用未消毒的培养皿

B.在显微镜下观察样本时，用手指触碰显微镜的镜头

C.在操作过程中，穿戴无菌手套

D.将已处理的样本直接放在空气中暴露

答案：C

解析：穿戴无菌手套可以防止操作者的手部细菌污染样本，降低污染率。其他选项

均可能导致样本被污染。

5、下列哪种方法最适合用于检测结核分枝杆菌的耐药性？

A.荧光定量PCR

B.Vitek自动鉴定系统

C.线性探针技术

D.比浊法

E.绝对浓度法

答案：C

解析：结核分枝杆菌的耐药性检测通常使用线性探针技术，因为它能够快速准确

地检测出结核菌是否对抗结核药物产生耐药性，而其他选项则更多地应用于细菌的定性

或定量分析上。

6、在进行细菌的抗生素敏感性测试时，哪种方法是通过测定抗生素抑制细菌生长

的最低浓度来实现的？

A.琼脂稀释法

B.纸片扩散法

C.E-test条法

D.直接凝集试验

E.间接免疫荧光法

答案：A

解析：琼脂稀释法是一种确定最小抑菌浓度(MIC)的方法，它通过制备一系列已知

浓度范围的抗生素琼脂平板，接种测试菌株后观察其在不同浓度下的生长情况，从而得

出MIC值。其他方法虽然也能提供敏感性信息或直接检测病原体，但不是通过测定最小

抑菌浓度来完成的。

7、题干：在微生物检验中，用于分离纯化细菌的常用方法不包括以下哪一项？

A、平板划线法

B、稀释涂布法

C、显微镜直接镜检

D、琼脂斜面培养

答案：C

解析：显微镜直接镜检是一种用于观察微生物形态的方法，而不是用于分离纯化细

菌的方法。平板划线法、稀释涂布法和琼脂斜面培养都是常用的细菌分离纯化方法。因

此，选项C是不正确的。

8、题干：关于微生物的抵抗力，以下哪种说法是错误的？

A、细菌芽抱对热、干燥、化学消毒剂有很强的抵抗力

B、病毒在低温下比在高温下更稳定

C、细菌的芽抱在土壤中可以存活数十年

D、多数细菌在37℃下生长最快

答案：B

解析：病毒在高温下通常比在低温下更不稳定，因为高温可以破坏病毒的蛋白质结

构，导致病毒失活。因此，选项B的说法是错误的。其他选项A、C、D都是正确的：细

萌芽泡确实对多种环境因素有很强的抵抗力，芽泡在JL壤中可以存活数十年，而多数细

菌在37℃下生长最快。

9、在微生物学中，用于区分大肠杆菌与其它肠道细菌的IMViC试验中的代表

哪一项生化反应？

A.口引噪试验

B.甲基红试验

C.靛基质试验

D.枸檬酸盐利用试验

答案：B

解析：IMViC试验是用于鉴定肠道杆菌的一组生化试验，依次为呵咪(Indole)试

验、甲基红(MethylRed)试验、VP(Voges-Proskauer)试验和枸椽酸盐(Citrate)

利用试验。其中，“M”代表的是甲基红试验，用于检测细菌分解葡萄糖时是否产生过

量的丙酮酸，进而转化为乳酸和其他副产物，导致培养基pH值降低。

10-,下列哪种方法是基于核酸序列分析来鉴定微生物的？

A.血清学试验

B.生化反应测试

C.16SrRNA基因测序

D.质谱分析法

答案：C

解析：16SrRNA基因测序是一种分子生物学方法，通过扩增并测序微生物的16s

核糖体RNA基因来确定其分类地位。这种方法基于遗传信息,提供了高精度的物种鉴定,

并且能够识别那些传统培养方法无法生长的微生物。其他选项如血清学试验、生化反应

测试和质谱分析法等，虽然也有助于微生物鉴定，但它们主要依赖于抗原-抗体反应、

代谢特征或者蛋白质指纹图谱，并非直接基于核酸序列。

11、在进行细菌形态学检查时，以下哪种方法最常用于观察细菌的形态？

A.显微镜直接观察

B.涂片染色后显微镜观察

C.电镜观察

D.培养后观察

答案：B

解析：细菌形态学检查通常通过涂片染色后，使用显微镜观察细菌的形态。这种方

法可以清晰地看到细菌的大小、形状、排列和染色特性，是微生物检验中最常用的观察

方法。

12、在细菌培养过程中，以下哪种情况最可能是由于培养条件不当导致的？

A.培养基变质

B.培养皿密封不严

C.培养温度过高

D.培养时间过长

答案：B

解析：培养皿密封不严会导致外界微生物进入培养皿，从而污染培养物。这是培养

条件不当最常见的情况之一。其他选项可能导致培养结果异常，但不是由于培养条件不

当直接引起的。

13、下列哪种方法最适合用于鉴定肠道致病菌与非致病菌？

A.生化反应测试B.血清学反应C.抗酸染色D.革兰氏染色

答案：A

解析：生化反应测试可以区分肠道致病菌与非致病菌，因为它们在代谢产物上存在

差异，如口引躲试验、甲基红试验等可以帮助区分。

14、在进行细菌药敏试验时，哪种方法是基于扩散原理来测定抗生素对细菌的抑制

作用？

A.纸片扩散法B.微量肉汤稀释法C.自动化仪器法D.E-test梯度法

答案：A

解析：纸片扩散法（又称Kirby-Bauer试验）是通过测量抗生素纸片周围抑菌圈的

大小来评估细菌对抗生素的敏感性，属于基于扩散原理的方法。

15、以下哪项不是微生物检验技术中常用的培养基？

A.普通琼脂培养基

B.血琼脂培养基

C.麦康凯培养基

D.高盐培养基

答案：D

解析：普通琼脂培养基、血琼脂培养基和麦康凯培养基都是微生物检验技术中常用

的培养基。高盐培养基虽然也是培养基的一种，但在微生物检验技术中不常用，主要用

于某些耐盐微生物的分离培养。

16、在进行细菌形态学观察时，以下哪种方法不是常用的染色方法？

A.革兰染色法

B.抗酸染色法

C.酵母染色法

D.银染法

答案：C

解析：革兰染色法、抗酸染色法和银染法都是微生物检验技术中常用的染色方法,

用于观察细菌的形态和结沟。酵母染色法不是常用的染色方法，主要用于真菌的观察。

17、微生物检验技术中，以下哪项不是微生物培养的必备条件？

A、适宜的培养基

B、适宜的温度

C、适宜的pH

D、氧气

答案：D

解析：微生物培养的必备条件包括适宜的培养基、适宜的温度、适宜的pH等，但

并非所有微生物都需要氧气。例如，厌氧菌在无氧条件下才能生长。因此，氧气不是微

生物培养的必备条件。

18-.在微生物检验中，以下哪种方法可以用于快速检测细菌耐药性？

A、纸片扩散法

B、最小抑菌浓度法

C、琼脂稀释法

D、平板计数法

答案：B

解析：最小抑菌浓度法(MinimumInhibitoryConcentration,MIC)是一种快速

检测细菌耐药性的方法。该方法通过观察细菌在不同浓度抗生素下的生长情况，确定抑

制细菌生长的最小抗生素浓度。而纸片扩散法、琼脂稀释法和平板计数法主要用于检测

微生物的生长和繁殖。

19、以下哪种物质不属于细菌的细胞壁成分？

A.葡聚糖

B.蛋白质

C.脂肪

D.胶质

答案：C

解析：细菌的细胞壁主要由肽聚糖(也称为肽糖聚糖)、蛋白质和少量的脂质构成。

胶质不是细菌细胞壁的成分。肽聚糖是细菌细胞壁的主要结构成分，它是由糖类和氨基

酸通过肽键连接而成的大分子。

20、在进行微生物分离培养时，以下哪种方法最适合分离革兰氏阴性细菌？

A.血琼脂平板法

B.麦康凯平板法

C.沙门氏平板法

D.肠杆菌平板法

答案：B

解析：麦康凯平板法是一种选择性培养基，主要用于分离和鉴定肠道中的革兰氏阴

性细菌，特别是大肠杆菌和沙门氏菌。麦康凯平板含有乳糖和胆盐，能够抑制革兰氏阳

性细菌的生长，而有利于革兰氏阴性细菌的生长。血琼脂平板法、沙门氏平板法和肠杆

菌平板法则不是专门针对革兰氏阴性细菌的分离方法。

21、以下哪种细菌是引起肺炎的主要病原菌？

A.铜绿假单胞菌

B.链球菌属

C.嗜肺军团菌

D.肺炎克雷伯菌

答案：B

解析：肺炎链球菌是引起肺炎的主要病原菌之一，属于链球菌属，主要通过呼吸道

传播。铜绿假单胞菌、嗜肺军团菌和肺炎克雷伯菌虽然也可引起肺炎，但不是主要病原

菌°

22、在进行细菌分离培养时，以下哪种方法可以有效抑制杂菌生长？

A.高温灭菌

B.抗生素添加

C.酶处理

D.紫外线照射

答案：B

解析：在细菌分离培养过程中，添加抗生素可以有效抑制非目标菌的生长，从而提

高目标菌的分离纯度。高温灭菌、酶处理和紫外线照射虽然也有一定的消毒作月，但不

能有效抑制杂菌生长。

23、题干：以下哪种细菌对消毒剂具有抵抗力？

A.革兰氏阳性球菌

B.革兰氏阴性杆菌

C.结晶紫杆菌

D.革兰氏阳性杆菌

答案：D

解析：革兰氏阳性杆菌对消毒剂通常具有较好的抵抗力，这是因为它们的细胞壁结

构较为厚实，能够抵抗消毒剂的破坏作用。而革兰氏阴性杆菌的细胞壁较为薄弱，更容

易被消毒剂破坏。

24、题干：在进行微生物分离培养时，以下哪种操作步躲是错误的？

A.对培养皿进行灭菌处理

B.在无菌条件下接种样品

C.将接种后的培养皿倒置放置

D.将培养皿直接暴露在空气中放置

答案：D

解析：在进行微生物分离培养时，将培养皿直接暴露在空气中放置是错误的操作步

骤。因为这样容易导致空气中微生物的污染，影响实验结果的准确性。正确的做法是在

无菌条件下接种样品，并对培养皿进行灭菌处理，然后将接种后的培养皿倒置放置，以

防止冷凝水滴落影响培养物。

25、以下哪项不属于细菌的形态学特征？

A.形状

B.大小

C.色素

D.抗原

答案：D

解析：细菌的形态学特征主要包括细菌的形状（如球形、杆形、螺旋形等）、大小

以及细菌表面的结构（如荚膜、鞭毛等）。色素是细菌的一种代谢产物，而非形态学特

征。因此，选项D不属于细菌的形态学特征。

二、多项选择题（本大题有20小题，每小题1分，共20分）

1、以下哪些微生物属于革兰氏阳性菌？（）

A、葡萄球菌

B、链球菌

C、大肠杆菌

D、肺炎克雷伯菌

答案：AB

解析：革兰氏阳性菌是指能够抵抗革兰氏染色方法中的革兰氏碘液染色，保留紫色

染料的细菌。葡萄球菌和链球菌都属于革兰氏阳性菌。大肠杆菌和肺炎克雷伯菌属于革

兰氏阴性菌，它们的细胞壁结构不同于革兰氏阳性菌。因此，正确答案是A、Bo

2、以下哪些指标可以用于判断微生物检验结果的质量？（）

A、重复性

B-.准确性

C、灵敏度

D、特异性

答案：ABCD

解析：微生物检验结果的质量可以通过以下指标来判断：

A、重复性：指在相同条件下多次进行检测所得结果的一致性。

B、准确性：指检测结果与实际值之间的接近程度。

C、灵敏度：指检测方法能够检测到的最小浓度或数量。

D、特异性：指检测方法对目标微生物的识别能力，即非目标微生物不会产生假阳

性结果。

因此，正确答案是A、B、C、Do

3、关于微生物检验技术中的培养基制备，以下说法正确的是：

A.培养基的pH值对微生物的生长有重要影响

B.培养基中的营养成分应充足且平衡

C.培养基中的抑菌剂可以抑制杂菌的生长

D.培养基的制备过程中应避免污染

答案：ABCD

解析：A项正确，培养基的pH值对微生物的生长有重要影响，不同微生物时pH值

的适应性不同。B项正确，培养基中的营养成分为微生物的生长提供必要的物质基础，

应充足且平衡。C项正确，培养基中的抑菌剂可以抑制或杀死不需要的杂菌，确保目标

微生物的生长。D项正确，培养基的制备过程中应严格按照无菌操作原则进行，避免污

染。

4..在微生物分离纯化过程中，以下哪些方法可以用于鉴定微生物？

A.观察菌落形态

B.进行生化试验

C.制作菌落印片

D.利用分子生物学技术

答案：ABD

解析：A项正确，通过观察菌落的大小、形状、.频色、表面和边缘等特征，可以对

微生物进行初步鉴定。B项正确，通过微生物的生化反应，如糖发酵试验、氧化酶试验

等，可以进一步鉴定微生物。C项错误，菌落印片主要是用于观察菌落的特征，而不是

鉴定微生物。D项正确，分子生物学技术如PCR、基囚测序等可以提供微生物的遗传信

息，用于准确鉴定微生物。

5、下列哪项不是微生物实验室常用的消毒方法？

A.高压蒸汽灭菌

B.紫外线照射

C.75%乙醇消毒

D.2%碘酊消毒

E.0.1%甲醛熏蒸

答案：E

解析：微生物实验室常用的消毒方法包括高压蒸汽灭菌、紫外线照射、75%乙醇消

毒和2%碘酊消毒等。甲醛熏蒸虽然也是一种消毒方法，但由于甲醛具有强烈的毒性和

刺激性，通常不用于微生物实验室的常规消毒。因此，E选项。.现甲醛熏蒸不是微生物

实验室常用的消毒方法。

6-.以下哪些微生物属于革兰氏阳性菌？

A.酵母菌

B.肠球菌

C.链球菌

D.葡萄球菌

E.乳酸菌

答案：B、C、D、E

解析：革兰氏阳性菌是指革兰氏染色后，菌体呈蓝色的细菌。肠球菌、链球菌、葡

萄球菌和乳酸菌都属于革兰氏阳性菌。酵母菌属于真菌，不属于细菌，因此不是革兰氏

阳性菌。所以正确答案是B、C、D、Eo

7、关于细菌分离纯化的常用方法，以下哪些描述是正确的？

A.培养基的选择应根据待分离细菌的特性来确定

B.培养基的pH值应与待分离细菌的最适生长pH值一致

C.培养基中添加抗生素是为了抑制杂菌的生长

D.培养基中的营养素应丰富，以便细菌生长繁殖

E.培养基的制备过程应严格无菌操作

答案：A、B、C、D、E

解析：细菌分离纯化的关键在于选择合适的培养基和操作方法。A选项正确，因为

不同的细菌对培养基的要求不同；B选项正确，因为不同的细菌有不同的最适生.长pH

值；C选项正确，因为抗生素可以抑制杂菌的生长，有利于目标细菌的生长；D选项正

确，因为丰富的营养素有助于细菌的生长繁殖；E选项正确，因为无菌操作可以防止杂

菌污染。

8、以下哪些方法可以用于微生物的鉴定？

A.培养基的菌落特征观察

B.生物化学试验

C.分子生物学技术

D.形态学观察

E.生化试验

答案：A、C、D、E

解析：微生物的鉴定通常需要综合运用多种方法。A选项正确，因为菌落特征是鉴

定微生物的重要依据；B选项正确，因为生物化学试验可以检测微生物的代谢产物和酶

活性；C选项正确，囚为分子生物学技术可以检测微生物的基因序列；D选项正确，囚

为形态学观察可以帮助识别微生物的形态特征；E选项正确，因为生化试验可以检测微

生物的代谢途径。综合运用这些方法可以提高微生物鉴定的准确性。

9、以下哪些是微生物检验中常用的培养基？

A.营养培养基

B.选择培养基

C.增菌培养基

D.鉴定培养基

E.储存培养基

答案：ABCD

解析：在微生物检验中，常用的培养基包括营养培养基、选择培养基、增菌培养基

和鉴定培养基。营养培养基用于培养大多数微生物；选择培养基用于选择性地培养某一

类微生物；增菌培养基用于增加微生物的数量；鉴定培养基则用于鉴定微生物的种类。

储存培养基虽然也很重要，但不属于常规的检验过程中使用的培养基类型。

10、微生物检验过程中，以下哪些步骤属于无菌操作？

A.抽取样品

B.制备样品

C.接种培养基

D.观察结果

E.结果记录

答案：ABC

解析：在微生物检验过程中，无菌操作是防止外来微生物污染的关键步骤。以下步

骤属于无菌操作：

A.抽取样品：在取样过程中需要确保样品不受外界微生物的污染。

B.制备样品：在制备样品时，如研磨、稀释等，需要严格的无菌操作。

C.接种培养基：将样品接种到培养基上时，必须确保接种工具和操作环境无菌。

D.观察结果：虽然观察结果本身不涉及操作，但观察过程中需避免用手直接接触

培养基。

E.结果记录：结果记录属于实验室记录工作，通常不涉及无菌操作。

11、微生物检验技术中，以下哪些方法可以用于细菌的分离纯化？（）

A.涂片染色法

B.稀释涂布平板法

C.气液界面法

D.培养基稀释法

E.压力蒸汽灭菌法

答案：B,D

解析：

A.涂片染色法主要用于观察微生物的形态和结沟，不是分离纯化的方法。

B.稀释涂布平板法是一种常用的分离纯化细菌的方法，通过将样品稀释后涂布在

固体培养基上，可以得到单个菌落。

C.气液界面法是一种特殊的培养方法，用于研究某些微生物在气液界面的特殊代

谢活动，不是分离纯化的方法。

D.培养基稀释法是将样品稀释后接种到培养基上，通过稀释度控制，可以得到单

个菌落，是分离纯化的方法之一。

E.压力蒸汽灭菌法是一种消毒方法，用于杀灭或去除微生物，不是分离纯化的方

法。

12、在微生物检验中，以下哪些指标可以用来评估培养基的质量？（）

A.培养基的pH值

B.培养基的溶解度

C.培养基的渗透压

D.培养基的成分浓度

E.培养基的稳定性

答案：A,B,C,D,E

解析:

A.培养基的pH值是微生物生长的重要环境因素，培养基的pH值应适宜微生物的

生长。

B.培养基的溶解度影响微生物对营养物质的吸收，溶解度低可能导致微生物生长

不良。

C.培养基的渗透压影响微生物细胞内外水分平衡，渗透压过高或过低都可能影响

微生物的生长。

D.培养基的成分浓度是微生物生长所需营养物质的重要指标，成分浓度不适宜可

能导致微生物无法正常生长。

E.培养基的稳定性指培养基在储存和使用过程中保持其性质不变的能力，稳定性

差的培养基可能导致微生物生长异常或污染。

13、以下哪些属于微生物检验技术中的无菌技术操作？（）

A、定期对实验室环境进行消毒

B、操作前洗手并戴口罩

C、使用一次性无菌手套

D、对微生物样本进行高温灭菌

E、操作过程中避免触碰工作台面

答案：ABCD

解析：微生物检验技术中的无菌技术操作主要包括以下几方面：定期对实验室环境

进行消毒以保持实验室的无菌状态；操作前洗手并戴口罩，防止手部细菌污染；使用一

次性无菌手套，减少操作过程中的交叉污染；对微生物样本进行高温灭菌，确保样本的

无菌性；操作过程中避免触碰工作台面，防止细菌污染。因此，选项A、B、C、D均属

于微生物检验技术中的无菌技术操作。选项E虽然也是实验室操作中需要注意的事项，

但并不属于无菌技术操作范畴。

14、以下哪些微生物检验技术属于分子生物学技术？（）

A、涂片镜检

B-.PCR技术

C、荧光定量PCR

D、免疫荧光技术

E、生物化学鉴定

答案：BCD

解析：分子生物学技术在微生物检验中的应用非常广泛，以下列举了几种属于分子

生物学技术的微生物检验方法：

B、PCR技术（聚合酶锥反应）：通过扩增特定的DNA片段，快速检测微生物的存在。

C、荧光定量PCR：在PCR技术的基础上，结合荧光标记，实时监测PCR反应过程

中DNA扩增的动态变化，实现对微生物数量和类型的定量检测。

D、免疫荧光技术：利用荧光标记的抗体检测微生物，具有快速、灵敏、特异等优

点。

选项A、涂片镜检属于传统的微生物检验方法，不属于分子生物学技术。选项E、

生物化学鉴定是通过微生物的生化特性进行鉴定，虽然与分子生物学有一定的交叉，但

并不属于分子生物学技术范畴。因此，选项BCD属于分子生物学技术。

15、关于微生物检验技术中，以下哪些方法可用于细菌的分离纯化？（）

A.稀释涂布平板法

B.柱层析法

C.培养基过滤法

D.水浴加热法

答案：A、C

解析：细菌的分离纯化通常采用稀释涂布平板法（A）和培养基过滤法（C）两种方

法。稀释涂布平板法通过稀释样品，使单个细菌在平板上生长，从而分离纯化；培养基

过滤法则是利用细菌能通过微孔滤膜，而较大的杂质和细胞则不能通过，达到分离纯化

的目的。柱层析法和水浴加热法不是用于细菌分离纯化的方法。

16、以下哪些微生物属于条件致病菌？（）

A.白假丝酵母菌

B.大肠杆菌

C.金黄色葡萄球菌

D.铜绿假单胞菌

答案：A、C、D

解析：条件致病菌是指在一定条件下，如人体免疫力下降时，原本对人体无害的微

生物会引发感染。白假丝酵母菌（A）、金黄色箱萄球菌（C）和铜绿假单胞菌（D）都属

于条件致病菌。大肠杆菌（B）在一般情况下是人体肠道正常菌群的一部分，但在特定

条件下，如侵入人体其他部位或免疫力下降时，也可能导致感染。

17、微生物检验技术中，以下哪些是常用的微生物分离纯化方法？（）

A.涂片法

B.培养法

C.滤膜法

D.分层培养法

E.流式细胞术

答案：B、C、D

解析：在微生物检验技术中，常用的微生物分离纯化方法包括培养法、滤膜法和分

层培养法。培养法是通过培养基的适宜条件促进微生物生长，从而进行分离和纯化；滤

膜法是将含有微生物的样品通过滤膜，微生物被截留在滤膜上，便于分离和纯化；分层

培养法是利用微生物对不同培养基成分的需求差异，通过分层培养来分离纯化。涂片法

主要用于微生物的形态观察，流式细胞术则是一种细胞分析技术，不用于微生物的分离

纯化。

18、以下哪些是微生物检验中常用的鉴定方法？（）

A.培养特性鉴定

B.生物化学鉴定

C.生化反应鉴定

D.形态学鉴定

E.分子生物学鉴定

答案：A、B、D、E

解析：微生物检验中常用的鉴定方法包括培养特性鉴定、生物化学鉴定、形态学鉴

定和分子生物学鉴定。培养特性鉴定是通过观察微生物在培养基上的生长特征来鉴定微

生物；生物化学鉴定是通过微生物的代谢产物、酶活性等生物化学特性来鉴定微生物；

形态学鉴定是通过观察微生物的形态、结构等特征来鉴定微生物；分子生物学鉴定是利

用分子生物学技术，如PCR、基因测序等手段来鉴定微生物。生化反应鉴定通常包含在

生物化学鉴定中。

19、关于革兰氏染色法，下列叙述哪些是正确的？

A.革兰氏阳性菌在显微镜下呈现紫色

B.革兰氏阴性菌在显微镜下呈现红色

C.脱色步骤使用的是75%的酒精

D.结晶紫是复染用的染料

E.碘液用于媒染，增强初染效果

【答案】ABE

【解析】革兰氏染色是一种重要的细菌鉴别方法，阳性菌由于细胞壁结构较厚，肽

聚糖含量较高，在脱色过程中不易丧失初染的结晶紫-碘复合物，因而保留紫色；而阴

性菌则因为细胞壁结构不同容易失去该复合物，经番红复染后呈红色。脱色剂通常使用

的是95%酒精而非75%,并且复染用的通常是番红而不是结晶紫。

20、在进行细菌的药敏试验时，以下哪种方法不是常用的测定抗生素敏感性的方

法？

A.纸片扩散法（Kirby-Bauer法）

B.微量肉汤稀释法

C.E-test法

D.抗生素梯度法

E.琼脂稀释法

【答案】D

【解析】纸片扩散法（Kirby-Bauer法）、微量肉汤稀释法、E-test法以及琼脂稀

释法都是临床实验室常用的测定抗生素对细菌敏感性的方法。而“抗生素梯度法”并非

•种标准命名的方法，也不属于常规使用的药敏试验方法之-o正确答案是D选项。

三、共用题干单项选择题（用普通单选题替代，15题，共15分）

1、在微生物检验中，用于检测细菌细胞壁成分的染色方法是（）

A.革兰氏染色

B.抗酸染色

C.芽胞染色

D.荚膜染色

答案：A

解析：革兰氏染色法是微生物学中常用的染色方法，主要用于鉴定细菌是否为革兰

氏阳性菌或革兰氏阴性菌。通过染色后，革兰氏阳性菌细胞壁厚，染色后不易脱色，呈

现紫色；革兰氏阴性菌细胞壁薄，染色后易脱色，需要再次染色呈现红色。

2、在微生物检验中，用于检测细菌细胞膜成分的染色方法是（）

A.革兰氏染色

B.抗酸染色

C.芽泡染色

D.荧光染色

答案：D

解析：荧光染色是一种常用的微生物检验染色方法，通过特定的荧光染料染色后，

可以检测细菌细胞膜等细胞结构。在荧光显微镜下观察，细菌等微生物的细胞结构会呈

现出荧光颜色，从而可以进行观察和鉴定。革兰氏染色、抗酸染色和芽胞染色主要用于

检测细菌的细胞壁、细胞壁成分和芽抱等结构。

3、若在某患者的痰液标本中分离到了一种革兰氏阴性杆菌，经初步鉴定为铜绿假

单胞菌（Pseudomonasaeruginosa），以下哪种抗生素通常不是用于治疗该菌引起的感

染？

A.头抱他喔

B.万古霉素

C.环丙沙星

D.亚胺培南

E.哌拉西林/他喋巴坦

答案：B.万古霉素

解析：万古霉素是一种糖肽类抗生素，主要用于治疗耐药的革兰氏阳性菌感染，特

别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。而铜绿假单胞菌属于革兰氏阴性杆菌，通常对

万古霉素不敏感，因此不是治疗首选。

4、在对上述分离出的铜绿假单胞菌进行药敏试验时，发现其对碳青霉烯类抗生素

耐药。这提示该菌株可能存在哪种机制的耐药性？

A.内酰胺酶产生

B.主动外排泵过度表达

C.药物作用靶点改变

D.生物膜形成

E.以上都有可能

答案：E.以上都有可能

解析：铜绿假单胞菌可通过多种机制发展出对碳青霉烯类抗生素的耐药性，包括但

不限于8-内酰胺酶的产生、主动外排泵的过度表达以及药物作用靶点的改变。止匕外，

生物膜的形成也是导致其在某些情况下对抗生素耐药的重要因素。因此，在面对实际病

例时，需要综合考虑多种耐药机制的可能性。

5、在进行细菌分离纯化时，以下哪种方法最常用于初步分离和纯化？

A.血琼脂平板法

B.培养基直接涂片法

C.涂片染色镜检法

D.微生物滤膜法

答案：A

解析：血琼脂平板法是细菌分离纯化的常用方法，因为它可以提供丰富的营养物质,

有助于细菌的生长，并且血液中的抗生素可以抑制某些细菌的生长，从而有助于分离出

目标细菌。其他选项如培养基直接涂片法、涂片染色镜检法主要用于细菌的初步鉴定，

而微生物滤膜法则用于微生物的过滤和分离，但不是最常用于初步分离和纯化的方法。

6、在微生物检验中，以下哪种指标通常用于评估培养基的质量？

A.pH值

B.氧气含量

C.营养成分含量

D.水分含量

答案：A

解析：在微生物检验中，pH值是评估培养基质量的重要指标之一。合适的pH值对

于微生物的生长至关重要，因为不同的微生物对pH值有不同的要求。培养基的pH值不

适宜可能导致微生物生长缓慢或无法生长。氧气含量、营养成分含量和水分含量虽然也

对微生物生长有影响，但它们通常不作为直接评估培养基质量的主要指标。

7、在对某疑似布鲁氏菌病患者的血液样本进行培养时，发现细菌生长缓慢，需培

养3-4天后才可见明显菌落。进一步鉴定过程中发现此细菌氧化醮阳性，不分解尿素。

根据以上信息，最有可能的病原体是：

A、布鲁氏菌

B、大肠埃希菌

C、金黄色葡萄球菌

D、铜绿假单胞菌

【答案】A、布鲁氏菌

【解析】布鲁氏菌是一种革兰氏阴性短小杆菌，其特征包括缓慢生长，通常需几天

时间才能形成可见的菌落。此外，布鲁氏菌的生化反应特性之一是氧化酶阳性，而且它

们通常不分解尿素。这些恃性均与题目描述相符，因此选项A正确。

8、在处理一例疑似结核病患者的痰液标本时，实验室人员使用抗酸染色法，发现

有抗酸杆菌存在。结合临床症状以及该病原体的常见形态特征，下列哪种抗生素最适合

作为一线治疗药物？

A、青霉素G

B、异烟月并

C、庆大霉素

D、头泡曲松

【答案】B、异烟肮

【解析】抗酸染色阳性的杆菌很可能是结核分枝杆菌，这是引起结核病的主要病原

体。治疗结核病的标准方案包括多种药物，其中异烟拼是作为一线治疗药物广泛使用的

抗生素之一。青霉素G等B-内酰胺类抗生素对于抗酸杆菌通常无效。因此，正确答案

为B。

9、在进行细菌分离培养时，以下哪种培养基适用于革兰氏阴性菌的分离？

A,血琼脂平板

B.麦康凯琼脂平板

C.沙保罗琼脂平板

D.巧克力琼脂平板

答案：B

解析：麦康凯琼脂平板是一种选择性培养基，主要用于分离和培养革兰氏阴性菌，

特别是肠道细菌。它含有乳糖和胆盐，可以抑制革兰氏阳性菌的生长，而革兰氏阴性菌

则可以生长。

10、在微生物检验中，以下哪种方法可以用于检测细菌的B-内酰胺酶活性？

A.氧化酶试验

B.凝固酶试验

C.抑制酶试验

D.革兰氏染色

答案：C

解析：抑制酶试验Cnhibitortest）是一种检测细菌B-内酰胺酶活性的方法。

在这种试验中，细菌的代谢产物会与内酰胺酶结合，从而抑制其活性。如果细菌能

够产生内酰胺酶，那么在加入内酰胺类药物后，其生长会受到抑制。因此，抑制

酶试验可以用来检测细菌对B-内酰胺类药物的耐药性。

11、为进一步确认是否为沙门氏菌感染，实验室应优先选择下列哪种生化鉴定方

法？

A、口引噪试验

B、尿素酶试验

C、H2s产生试验

D、明胶液化试验

答案：C

解析：沙门氏菌的一个典型特征是在培养过程中能够分解含硫氨基酸产生硫化氢

(H2S),这可以通过加入铅或铁离子的培养基中观察黑色沉淀形成来检测。因此，H2S

产生试验对于沙门氏菌的鉴定尤为重要。

12、如果实验室需要快速准确地鉴定沙门氏菌的具体血清型，最合适的分子生物学

技术是什么？

A、PCR扩增16SrRNA基因

B、脉冲场凝胶电泳(PFGE)

C、多重PCR

D、特异性血清型鉴定基因的实时荧光定量PCR

答案：D

解析：特异性血清型鉴定基因的实时荧光定量PCR不仅能够提供快速的结果，而

且具有高度的特异性和敏感性，可以用来直接从临床样本中检测特定的沙门氏菌血清型,

从而帮助医生更早地确定治疗方案。

13、在进行细菌形态学观察时，以下哪种染色方法最常用于细菌的初步鉴定？

A.革兰染色法

B.美蓝染色法

C.抗酸染色法

D.瑞氏染色法

答案：A

解析：革兰染色法是最常用的细菌形态学染色方法，通过观察细菌的革兰染色反应,

可以初步区分细菌为革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌，这对细菌的初步鉴定具有重要意义。

其他选项虽然也是细菌染色方法，但用途不如革兰染色法广泛。

14、在微生物实验室中，以下哪项措施不属于预防实验室生物安全风险的有效措

施？

A.对实验室人员进行生物安全培训

B.使用生物安全柜进行实验操作

C.实验结束后及时关闭实验室门窗

D.定期对实验室进行消毒

答案：C

解析：预防实验室生物安全风险的有效措施包括对实验室人员进行生物安全培训、

使用生物安全柜进行实验操作、定期对实验室进行消毒等。关闭实验室门窗虽然可以防

止外界环境中的生物因子进入实验室，但并不是预防实验室生物安全风险的有效措施。

正确的做法是确保实验室环境清洁、通风良好，并采取其他生物安全措施。

15、在一项关于医院感染控制的研究中，研究人员从ICU病房采集了多种临床样本，

包括血液、尿液、痰液以及伤口分泌物等，经过一系列的培养与鉴定，确定了一种多重

耐药的革兰氏阴性杆菌为感染源。该菌株对临床上常用的抗生素如头抱菌素类、唾诺酮

类、氨基糖苗类均表现出耐药性，但对多粘菌素保持敏感。根据以上描述，最有可能的

病原体是什么？

A.金黄色葡萄球菌

B.肺炎克雷伯菌

C.铜绿假单胞菌

D.大肠埃希菌

E.鲍曼不动杆菌

答案：E.鲍曼不动杆菌

解析：

鲍曼不动杆菌是一种常见的医院获得性感染病原体，尤其是对于重症监护室（ICU）

患者。这种细菌的特点是能够快速发展出对抗生素的耐药性，特别是在头抱菌素类、噗

诺酮类和氨基糖苗类抗生素方面。尽管如此，鲍曼不动杆菌通常对多粘菌素类药物仍然

敏感。根据题目描述中的抗生素耐药谱及敏感性特征，鲍曼不动杆菌是最有可能的病原

体。其他选项虽然也是潜在的多重耐药病原体，但是它们的耐药模式和本题描述的情况

不太一致。

四、案例分析题（11题选8,共40分）

第一题

【临床案例材料】

患者李某，男，56岁，因持续高热、咳嗽及呼吸困难等症状入院治疗。患者自述

近两周内曾前往热带地区旅行，并有食用未煮熟的淡水鱼史。入院时，体温39.5°C,

心率110次/分，呼吸频率28次/分，血压120/80nimHg。肺部听诊可闻及湿性啰音。

胸部X光片显示双侧下肺野呈斑片状浸润影。血常规检查示白细胞计数升高，中性粒细

胞比例增加。痰液样本送检至微生物实验室进行细菌学检查。

实验室检测结果

1.痰液样本直接涂片镜检发现大量多形核白细胞，革兰染色见革兰阴性杆茴。

2.痰液样本接种于血平板及巧克力平板培养后，37。C厌氧条件下培养48小时后,

观察到灰色、光滑湿润的小菌落。

3.菌落经质谱鉴定为嗜肺军团菌(Legionellapneumophila)o

4.进一步通过PCR方法确认了该菌株携带与水源相关的特定基因序列。

根据上述信息，请回答下列问题：

1、患者李某最可能感染的病原体是什么？

A.结核分枝杆菌

B.嗜肺军团菌

C.大肠埃希菌

D.铜绿假单胞菌

2、以下哪种检测方法对于确认患者感染嗜肺军团菌具有决定性意义？

A.直接涂片镜检

B.血平板培养

C.质谱鉴定

D.PCR方法检测特定基因序列

3、基于患者李某的临床表现及实验室检测结果，以下哪项不是合理的治疗建议？

A.使用喳诺酮类抗生素治疗

B.提供支持性治疗如吸氧

C.对患者进行隔离以防传播

D.推荐患者饮用未处理的天然水以增强免疫力

参考答案：

1、B.嗜肺军团菌

2、D.PCR方法检测特定基因序列

3、D.推荐患者饮用未处理的天然水以增强免疫力（此选项显然是不合理的医疗

建议，正确做法应当是根据诊断结果采取合适的抗生素治疗和其他支持性疗法）

第二题

临床案例材料

患者，男性，56岁，因持续高热、咳嗽、咳痰两周入院。患者自述两周前出现发

热症状，体温最高达39.5°C,伴有干咳及黄绿色脓痰。入院前一周开始出现呼吸困难,

夜间加重。患者有长期吸烟史，并且患有慢性阻塞性肺疾病（COPD）0体格检查发现双

肺底可闻及湿啰音，胸部X光片显示右下肺野存在浸润性阴影。实验室检查：白细胞计

数升高至15X1CT9/L,中性粒细胞比例85%,C即（C反应蛋白）水平显著增高。痰液

样本送检进行微生物学检测。

检验结果

痰液样本通过革兰氏染色后发现大量革兰阴性杆菌，初步鉴定为铜绿假单胞菌。进

一步使用V1TEK2全自动细菌鉴定系统进行确认，并进行了药敏试验。结果显示该菌株

对头抱他咤、哌拉西林/他喋巴坦敏感，但对环丙沙星耐药。

根据以上信息，请回答下列问题：

1、患者最可能的诊断是什么？

A.急性上呼吸道感染

B.社区获得性肺炎

C.医院获得性肺炎（HAP）

D.慢性支气管炎急性发作

【答案】C.医院获得性肺炎（HAP）

2、在实验室中，初步鉴定铜绿假单胞菌的主要依据是什么？

A.革兰氏染色结果

B.VITEK2系统的鉴定结果

C.环丙沙星耐药性

D.头泡他咤敏感性

【答案】A.革兰氏染色结果

3、如果患者对所有抗生素均表现出耐药性，下一步最佳的治疗策略是什么？

A.继续使用目前抗生素治疗方案

B.停止所有抗生素治疗，等待自然恢复

C.调整抗生素治疗方案，考虑使用联合疗法

D.开始抗真菌治疗

【答案】C.调整抗生素治疗方案，考虑使用联合疗法

注意：上述案例及数据均为虚构，用于模拟练习。在实际医疗环境中，所有诊疗决

定应基于详细的临床评估和实验室结果。

第三题

【临床案例材料】

患者，男性，45岁，因发热、咳嗽、乏力5天，伴腰痛2天入院。患者既往有慢

性肾炎病史。入院时体温39.2℃,脉搏112次/分，呼吸24次/分,血压150/90mniHg。

查体：双肺呼吸音粗，未闻及干湿性啰音；心脏听诊无异常；腹部平软，无压痛、反跳

痛，肝、脾未触及肿大；双肾区有叩击痛。

实验室检查：血常规：白细胞计数8.5X1（T9/L，中性粒细胞比例0.80,淋巴细胞

比例0.20：红细胞沉降率60mni/h；尿常规：蛋白尿（+）,红细胞3〜5/HP,白细胞10〜

15/HPo

影像学检查：胸部CT示双肺纹理增粗；腹部B超示双肾多发囊肿。

【案例分析】

1、根据患者的临床表现和实验室检查结果，最可能的诊断是什么？

A.肺炎

B.尿路感染

C.肾炎

D.肺结核

答案：C

2、为明确诊断，下列哪项检查最有助于确诊？

A.血培养

B.尿培养

C.肾活检

D.胸部CT复查

答案：B

3、针对该患者，以下哪项治疗措施不适宜？

A.抗生素治疗

B.利尿治疗

C.血压控制

D.肾脏替代治疗

答案：D

第四题

一、临床案例材料:

患者，男，35岁，因发热、咳嗽、咳痰3天入院。患者3天前出现发热，最高体

温39C,伴有咳嗽、咳痰，痰液呈黄色，无明显脓性。患者既往有慢性支气管炎病史。

体检:体温39.2C,脉搏110次/分，呼吸20次/分，血压130/80mmHg。双肺呼吸音粗,

可闻及干湿啰音。实验室检查：血常规：白细胞计数10.5X1C/9/L,中性粒细胞比例

85%.胸部X光片：两肺纹理增多，肺泡性浸润。

1、根据患者病情，下列哪项检查最有助于确定病原菌？

A、痰培养

B、血清抗体检测

C、胸部CT

D、肺部穿刺活检

答案：A

2、以下哪种药物对该患者病情最适用？

A、青霉素

B、头狗嚏月亏

C、阿奇霉素

D、利福平

答案：B

3、在微生物检验过程中，以下哪项操作可能导致结果不准确？

A、样本采集后立即进行检验

B、样本采集后放在室温下保存

C、样本采集后用无菌生理盐水稀释

D、样本采集后进行高压蒸汽灭菌

答案：B

第五题

【临床案例材料】

患者，男性，45岁，因持续性发热、咳嗽、乏力伴尿频、尿急、尿痛等症状就诊。

患者既往有慢性前列腺炎病史。入院体检：体温38.5℃,脉搏110次/分，呼吸20次/

分，血压120/80nunHgo肺部听诊未闻及干湿啰音，腹部触诊前列腺肿大，有压痛。实

验室检查：白细胞计数15.0XKT9/L,中性粒细胞比例85%,尿常规检查显示脓尿，细

菌培养结果为大肠埃希菌生长。

【案例分析题】

1、根据患者的临床表现和实验室检查结果，最可能的诊断为：

A、肺炎

B、急性膀胱炎

C、慢性前列腺炎急性发作

D、肾盂肾炎

答案：C、慢性前列腺炎急性发作

2、以下哪项检查对确诊慢性前列腺炎急性发作最为关键：

A、胸部X光片

B、尿常规检查

C、前列腺液细菌培养

D、血清学检查

答案：C、前列腺液细菌培养

3、针对该患者的治疗方案，以下哪项措施是错误的:

A、使用敏感抗生素治疗

B、给予解热镇痛药

C、鼓励多饮水，增加尿量

D、禁止性生活

答案：D、禁止性生活（在慢性前列腺炎急性发作期间，适当性生活可以帮助前列

腺液的排出，但需注意性伴侣的卫生，避免交叉感染。）

第六题

【案例材料】

患者，男性，45岁，因持续性发热、咳嗽、乏刀、食欲不振3天入院。患者3天

前开始出现发热，体温最高达39℃,伴有咳嗽、乏刀，无明显的咳痰、胸痛。患者既

往有慢性支气管炎病史，近半年内曾因呼吸道感染使用过抗生素。入院时体检：体温

39.2℃,脉搏120次/分，呼吸22次/分,血压120/80mmHg0肺部听诊:双肺呼吸音粗,

可闻及干湿性啰音。血常规检查：白细胞计数12.0X1CT9/L,中性粒细胞比例85%。胸

部X光片显示：两肺纹理增粗，有散在的斑点状阴影。

【案例分析题】

1、根据患者的临床表现和实验室检查结果，最可能的诊断是：

A、肺炎链球菌肺炎

B、肺炎支原体肺炎

C、肺炎克雷伯菌肺炎

D、肺结核

答案：A、肺炎链球菌肺炎

2、以下哪项微生物检验方法对于确诊该患者病情最有帮助?

A、痰涂片革兰染色

B、痰培养

C、血液培养

D、尿培养

答案：B、痰培养

3、以下哪项抗生素治疗对该患者可能有效？

A、青霉素

B、阿莫西林

C、左氧氟沙星

D、克拉霉素

答案：A、青霉素；B、阿莫西林；C、左氧氟沙星；D、克拉霉素（以上四种抗生素

均可能有效，具体使用需根据药敏试验结果选择）

第七题

【临床案例材料】

患者，男性，56岁，因持续高热、咳嗽、咳痰并伴有呼吸困难等症状入院。患者

自述症状已持续一周，并在社区诊所接受了初步抗生素治疗，但效果不佳。体检发现患

者有明显的肺部啰音，胸部X光片显示右下肺野有浸润阴影。实验室检查显示白细胞计

数升高，C反应蛋白水平显著增高。痰液样本通过革兰氏染色后显微镜检，发现大量革

兰氏阴性杆菌。进一步培养分离出疑似铜绿假单胞菌的菌落。根据患者的临床表现及实

验室检查结果，考虑为重症肺炎。

【问题】

1、为了明确诊断，下列哪一项检测最有助于确认该患者感染的是铜绿假单胞菌？

A.生化鉴定试验

B.血清学试验

C.抗酸染色

D.氧化酶试验与特定生长条件下的色素产生情况

E.肥达氏反应

答案：D

2、在制定治疗方案时，考虑到铜绿假单胞菌可能存在的耐药性，以下哪种抗生素

不应作为首选？

A.头抱他呢

B.阿莫西林/克拉维酸钾

C.环丙沙星

D.哌拉西林/他噗巴坦

E.亚胺培南

答案：B

3、患者在接受抗生素治疗过程中，若出现以下哪种情况，则提示可能存在抗生素

相关性腹泻的风险？

A.体温进一步升高

B.白细胞计数下降

C.腹泻，且粪便中检测到艰难梭菌毒素

D.呼吸困难加剧

E.C反应蛋白水平继续上升

答案：C

第八题

一、临床案例材料：

患者，男，45岁，主诉：发热、咳嗽、乏力一周。患者一周前开始出现发热，最

高体温达39.5C,伴有咳嗽、乏力等症状。患者既往有慢性支气管炎病史，无特殊药

物过敏史。查休：休温39.5C,脉搏120次/分，呼吸20次/分，血压120/80m:nHg。双

肺呼吸音粗，可闻及干湿啰音。实验室检查：白细胞计数15.0X10"’1•・中峥细跑比例皿淋巴碘

计1⑻。94，c反应蛋白20mg/L。

1、根据上述临床案例，以下哪项检查有助于微生物检验？

A、痰液涂片镜检

B、血液细菌培养

C、尿细菌培养

D、大便细菌培养

答案：AB

2、以下哪项微生物可