DB43-T 2884-2023 铅锌重金属污染耐性阔叶木本植物筛选技术规程

ICSCCS67.080.20B3143湖南省地方标准DB43/T28842023铅锌重金属污染耐性阔叶木本植物筛选技术规程codeofpracticeforthescreeningoftolerantbroad-leaveswoodyplantsunderheavymetalleadandzincpollutions2023-12-20发布2024-03-20实施湖南省市场监督管理局发布DB43/T288420235土壤和苗木27质量控制49耐性分析5DB43/T28842023前言本文件按照GB/T1.12020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由湖南省林业局提出。本文件由湖南省林业标准化技术委员会归口。本文件起草单位:湖南农业大学、国家林业和草原局中南调查规划院、郴州市林业综合服务中心。本文件主要起草人:朱凡、黄鑫浩、楚春晖、许洪扬、于志民、蒋晓辉、孔琳雅。DB43/T28842023铅锌重金属污染耐性阔叶木本植物筛选技术规程本文件规定了铅锌重金属污染耐性阔叶木本植物筛选的试剂和设备、土壤和苗木、筛选流程、质量控制、筛选值计算方法、耐性分析、档案管理等要求。本文件适用于铅锌重金属污染耐性阔叶木本植物的筛选。下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T17138土壤质量铜、锌的测定火焰原子吸收分光光度法GB/T17141土壤质量铅、镉的测定石墨炉原子吸收分光光度法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1铅锌污染胁迫Ieadandzincpollutionstress因过量重金属铅锌污染引起植物的生理性伤害。3.2耐性阔叶木本植物tolerantbroadleaveswoodyplants在过量重金属铅锌污染土壤中维持生长发育的阔叶木本植物。4试剂和设备4.1水和试剂4.1.1水所用水达到GB/T6682规定的三级水要求。4.1.2氯化铅分析纯。4.1.3氯化锌分析纯。4.1.4盐酸DB43/T28842023密度p=1.19g/ml,优级纯。4.1.5高浓度铅锌混合溶液准确称取12.0805g氯化铅(见4.1.2)和10.4253g氯化锌(见4.1.3)于1.0L的烧杯中,加水500mL,再加入10mL盐酸(见4.1.4),微热溶解。冷却后转移至1.0L容量瓶中,用水定容至标线,摇匀。溶液中铅质量浓度为9.0g/L、锌质量浓度为5.0g/L置于0℃~4℃的冰箱中密闭保存,有效期为56d。4.1.6中浓度铅锌混合溶液准确称取8.0537g氯化铅(见4.1.2)和5.2127g氯化锌(见4.1.3)于1.0L的烧杯中,加水500mL,再加入10mL盐酸(见4.1.4),微热溶解。冷却后转移至1.0L容量瓶中,用水定容至标线,摇匀。溶液中铅质量浓度为6.0g/L、锌质量浓度为2.5g/L置于0℃~4℃的冰箱中密闭保存,有效期为56d4.1.7低浓度铅锌混合溶液准确称取4.0268g氯化铅(见4.1.2)和4.1701g氯化锌(见4.1.3)于1.0L的烧杯中,加水500mL,再加入10mL盐酸(见4.1.4),微热溶解。冷却后转移至1.0L容量瓶中,用水定容至标线,摇匀。溶液中铅质量浓度为3.0g/L、锌质量浓度为2.0g/L。置于0℃~4℃的冰箱中密闭保存,有效期为56d4.2仪器设备4.2.1光合仪便携式红外二氧化碳气体分析仪。配备02000mol/m2·s连续变化的LED红蓝光源,二氧化碳量程03000mo1/mol,水测量范围075mmo1/mol,光合有效辐射量程03000mol/m2.S。4.2.2叶绿素荧光仪便携式叶绿素荧光测定仪。红色作用光波长625nm655nm,蓝色作用光波长470nm475nm,光合有效辐射量程07000mol/m·S。4.2.3叶绿素相对含量测定仪便携式叶绿素相对含量(SPAD1.0SPAD单位。5土壤和苗木5.1土壤土壤、河沙按体积比配制,混拌均匀,分装于花盆中,每个花盆装土5.土壤、河沙按体积比配制,混拌均匀,分装于花盆中,每个花盆装土5.0kg。树苗移栽前1d2d,用600倍~800倍的多菌灵溶液淋透土壤。2DB43/T288420235.2树苗选用2年生裸根苗,苗高、地径保持一致,相差不应超过5%。树苗宜选择根系发达、生长迅速、抗逆性强的本土植物。5.3基肥每盆施N、P、K含量分别为15%、15%、15%的复合肥0.15kg。5.4移栽移栽前将树苗的根部放入盛有0.05%的高锰酸钾溶液的盆中,消毒20min30min。每盆栽苗1株,浇透定根水。5.5水分根据土壤墒情、苗木生长发育状况等进行浇水。5.6除草及时拔除杂草。6筛选流程6.1胁迫处理6.1.1高浓度铅锌污染胁迫移栽90d后,用高浓度铅锌混合溶液(见4.1.5)500mL分2次间隔1d进行浇灌,每次250ml处理6盆。浇灌时以植株为中心,均匀浇灌到植株周围的土壤中,避免将溶液直接接触到植物基部和干。6.1.2中浓度铅锌污染胁迫用中浓度铅锌混合溶液(见4.1.6)按照6.1.1操作。6.1.3低浓度铅锌污染胁迫用低浓度铅锌混合溶液(见4.1.7)按照6.1.1操作。6.2叶片光合能力测定方法6.2.1测定时间和样品数量胁迫处理后15d96.2.2pn)测定8:00~11:00;的面积;34），），6.3土壤采样与测定将不同花盆中的土混合。用木勺分别采集每个花盆土样，每个样品的重量不少于1.0kg，装入规格为8筛选值计算方法根据土壤铅或锌含量、叶片Pn或Fv/Fm值建立二元一次拟合方程。从土壤铅含量—叶片Pn值二元一次方程和土壤锌含量—叶片Pn值二元一次方程中分别计算出Pn的最大值，取平均值，记作光合速率的最大值maxPn。从土壤铅含量—叶片Fv/Fm值二元一次方程和土壤锌含量—叶片Fv/Fm值F=+·························································(1)4DB43/T288420236.2.3360umol/mol,空气流速0.5L/min,相对湿度50%;1次pn在1次pn以内,光合仪的"稳定参数(stable)"测量值。a)选择天气晴朗的上午8:00~11:00或下午2:30~5:00;子探头嵌入暗适应夹并拉开遮光片;次Fv/Fm6.2.4叶绿素相对含量(SPAD)测定叶绿素相对含量(SPAD)的测定方法如下:选择天气晴朗的上午8:00~11:00或下午2:30~5:00;测定时夹住叶片(避开叶片主脉及叶缘),每片叶子测3次,取平均值作为1次SPAD值。6.3土壤采样与测定6.3.1土壤采样将不同花盆中的土混合。用木勺分别采集每个花盆土样,每个样品的重量不少于1.0kg,装入规格为7cmX10cm的聚乙烯塑料袋密封编号存放。土样风干后通过0.149mm尼龙筛,装入密封袋中备用。6.3.2土壤中铅、锌含量测定铅测定按照GB/T17141规定执行,锌测定按照GB/T17138规定执行。7质量控制根据土壤铅或锌含量、叶片P,或Fv/Fm值建立二元一次拟合方程。从土壤铅含量叶片P,值二元一次方程和土壤锌含量叶片pi,值二元一次方程中分别计算出P,的从土壤铅含量叶片Fv/Fm值二元一次方程和土壤锌含量叶片Fv/Fm出Fv/Fm的最大值,取平均值,记作最大光化学效率的最大值maxFv/Fm。F+=maxFv/Fm-FV/FmmaxFv/Fm+mqxpn-pnmaxpn5F——筛选值），6铅锌重金属污染耐性阔叶木本植物筛选技术过程记录表铅锌重金属污染耐性阔叶木本植物筛选技术过程记录筛选过程记录PnFv/FmSPAD5DB43/T28842023式中F筛选值maxFv/Fm最大光化学效率的最大值;Fv/Fm最大光化学效率(见6.2.3);maxpn光合速率的最大值,单位为微摩尔每平方米秒(mo1/m·Spn光合速率(见6.2.2),单位为微摩尔每平方米秒(mol/m·S)。9耐性分析根据筛选值F和SPAD值,进行耐性分析。F值大于等于0.57且SPAD值小于等于32.2,判定该木本植物对铅锌耐性弱;F值小于等于0.4且SPAD值大于等于35.0,判定该木本植物对铅锌耐性强。10档案管理应建立完整的技术档案,包括铅锌污染胁迫处理过程、苗木生长状况、