油脂化学检验油脂不皂化物的测定04课件

油脂化学检验

主讲教师：王凤玲农产品食品检验员——油脂不皂化物的测定2油脂不皂化物测定学习目标1.了解不皂化物的定义和测定原理2.熟悉不皂化物测定所需的仪器和用具3.能够配制实验所需试剂及药品安全常识4.掌握测定操作和结果计算等技能5.根据检验结果，判断油脂品质。3油脂不皂化物测定相关知识1.油脂不皂化物的定义油脂不皂化物是指在油脂皂化时不与碱起作用，不溶于水的物质。规定的操作条件下,试样用氢氧化钾皂化后的全部生成物，用一种特定的溶剂提取，蒸发溶剂，干燥后的残留物。2.油脂中的不皂化物包括天然类脂物,如:甾醇、高分子脂肪醇及烯类化合物等。任何在103℃的温度下被溶剂提取的不挥发的有机杂质(如矿物油)。4油脂不皂化物测定相关知识3.测定方法我国动植物油脂国家标准中有两种测定方法（1）GB/T5535.1—2008乙醚提取法（2）GB/T5535.2—2008己烷提取法

适用于所有油脂，不适用于蜡脂5油脂不皂化物的测定乙醚提取法

油脂与氢氧化钾-乙醇溶液在煮沸回流情况

下进行皂化,用乙醚从皂化液中提取不皂化物,

蒸发溶剂并对残留物干燥后称量。

一.测定原理6油脂不皂化物的测定乙醚提取法二、试剂1.乙醚

不含过氧化物和残留物。2.丙酮3.氢氧化钾-乙醇溶液c(koH）≈1mol/L。

在50mL水中溶解60g氢氧化钾,然后用乙醇

95%(体积分数)稀释至1L。溶液应为无色或浅黄色。4.氢氧化钾水溶液c(kOH)≈0.5mol/L。5.酚酞指示剂溶液10g/L的95%(体积分数)乙醇溶液。7油脂不皂化物的测定乙醚提取法三.仪器与设备1.圆底烧瓶

带标准磨口的250mL圆底烧瓶。2.回流冷凝管

具有与烧瓶配套的磨口。3.500mL分液漏斗使用聚四氟乙烯活塞和塞子。4.水浴锅5.电烘箱

可控制温度在(103±2)℃。8油脂不皂化物的测定乙醚提取法四.操作流程称样→加氢氧化钾-乙醇溶液→回流皂化→加水旋摇→冷却→转移→提取→洗涤乙醚提取液→蒸发溶剂→残留物干燥→称量→结果计算9油脂不皂化物的测定乙醚提取法五.测定步骤1.称样称取约5g试样,精确至0.01g，放入250mL烧瓶中。2.皂化

加50mL氢氧化钾乙醇溶液和一些沸石。将烧瓶与回流冷凝管连接好后煮沸回流1h。停止加热，从回流管顶部加100mL水并旋转摇动。如果提取的不皂化物用于测定生育酚,则必须添加联苯三酚且尽快地完成操作(30min以内)。10油脂不皂化物的测定乙醚提取法3.不皂化物的提取冷却后转移皂化液到500mL分液漏斗，用100mL乙醚分几次洗涤烧瓶和沸石，并将洗涤液倒入分液漏斗。盖好塞子,倒转分液漏斗，用力摇1min，小心打开活塞,间歇地释放内部压力。静置分层后,将下层皂液尽量完全放入第二只分液漏斗中。如果形成乳化液，可加少量乙醇或浓氢氧化钾或氯化钠溶液进行破乳。采用相同的方法,每次用100mL乙醚再提取皂化液两次，收集3次乙醚提取液放入装有40mL水的分液漏斗中。11油脂不皂化物的测定乙醚提取法4.乙醚提取液的洗涤

轻轻转动装有提取液和40mL水的分液漏斗。

(剧烈的摇动可能会形成乳化液）等到完全分层后弃去下面水层。用40mL水再洗涤乙醚溶液两次，每次都要剧烈振摇。且在分层后弃去下面水层。

排出洗涤液时需留2mL,然后沿其轴线旋转分液漏斗,等待几分钟让保留的水层分离。弃去水层，当乙醚溶液到达旋塞口时关闭旋塞。12油脂不皂化物的测定乙醚提取法用40mL氢氧化钾水溶液、40mL水相连续洗涤乙醚溶液后，再用40mL氢氧化钾水溶液进行洗涤，然后用40m水洗涤至少两次以上。继续用水洗涤,直到加入1滴酚酞溶液至洗涤液后,不再呈粉红色为止。13油脂不皂化物的测定乙醚提取法

5.蒸发溶剂

通过分液漏斗的上口，小心地将乙醚溶液全部转移至250mL烧瓶中,此烧瓶需预先于(103士2)℃的烘箱中干燥,冷却后称量,精确至0.1mg，在沸水浴上蒸馏回收溶剂。加入5mL丙酮,在沸水浴上转动时倾斜握住烧瓶,在缓缓的空气流下，将挥发性溶剂完全蒸发。14油脂不皂化物的测定乙醚提取法6.残留物的干燥和测定（1）将烧瓶水平放置在(103士2)℃的烘箱中,干燥15min。然后放在干燥器中冷却，取出称量，精确至0.1mg。

按上述方法间隔15min重复干燥,直至两次称量质量相差不超过1.5mg。如果3次干燥后还不恒质,则不皂化物可能被污染,需重新进行测定。15油脂不皂化物的测定乙醚提取法（2）当需要对残留物中的游离脂肪酸进行校正时，将称量后的残留物溶于4mL乙醚中，然后加入20mL预先中和到使酚酞指示液呈淡粉色的乙醇。用0.1mol/L氢氧化钾-乙醇溶液滴定到相同的终点颜色。以油酸来计算游离脂肪酸的质量,并以此校正残留物的质量。16

油脂不皂化物的测定乙醚提取法7.测定次数：同一试样需进行两次测定。8.空白试验用相同的步骤及相同量的所有试剂，但不加试样进行空白试验，如果残留物超过1.5mg,需对试剂和方法进行检查。17油脂不皂化物的测定乙醚提取法

18油脂不皂化物的测定乙醚提取法m3----游离脂肪酸的质量如果需要,等于0.28VC，g;

其中:V----滴定所用标准氢氧化钾乙醇溶液的体积,mL;C----氢氧化钾-乙醇标准溶液的准确浓度,mol/L;19油脂不皂化物的测定己烷提取法

油脂与氢氧化钾-乙醇溶液在煮沸回流情况

下进行皂化,用己烷或石油醚从肥皂液中提取

不皂物,蒸发溶剂并对残留物干燥后称量。

一.测定原理20油脂不皂化物的测定己烷提取法二.试剂1.正已烷或沸程40~60℃的石油醚。溴价低于1,且不得含有杂质。2.10%(体积分数)乙醇溶液3.酚酞指示剂10g/L的95%(体积分数)乙醇溶液。4.氢氧化钾-乙醇溶液c（KOH）≈lmol/L。在50mL水中溶解60g氢氧化钾然后95%(体积分数)乙醇稀释至1000mL。溶液应为无色或浅黄色。21油脂不皂化物的测定己烷提取法三.仪器与设备1.圆底烧瓶

带标准磨口的250mL圆底烧瓶。2.回流冷凝管

具有与烧瓶配套的磨口。3.500mL分液漏斗使用聚四氟乙烯活塞和塞子。4.恒温水浴锅5.电烘箱

可控制温度在(103±2)℃。22油脂不皂化物的测定己烷提取法测定步骤1.取样

称约5g试样,精确至0.01g,放入

250mL烧瓶中。2.试样皂化

试样中加50mL氢氧化钾溶液和一些沸石,烧瓶与回流冷凝管连接好后煮沸,回流1h。停止加热，从回流管顶部加50mL.水并旋转摇动。23油脂不皂化物的测定己烷提取法3.不皂化物的提取冷却后转移皂化液到250mL分液漏斗,用

50mL己烷分几次洗涤烧瓶和沸石,并将洗涤液倒入分液漏斗。盖好塞子,用力摇1min,倒转分液漏斗，小心打开旋塞,间歇地释放内压。静置分液漏斗,至溶液分层后,尽量将下层皂液放入第二只分液漏斗中。如果形成乳化液,可加少量乙醇或浓氢氧化钾或氯化钠溶液进行破乳。24油脂不皂化物的测定己烷醚提取法用相同的方法,每次用50mL己烷对皂化液再提取两次。3次已烷提取液收集在同一分液漏斗中。25油脂不皂化物的测定己烷醚提取法4.己烷提取物的洗涤用乙醇溶液洗涤提取液3次,每次用量25mL,并剧烈摇动,洗涤后弃去乙醇水溶液,每次弃去洗涤液后,保持分液漏斗中剩2mL洗涤液,然后将分液漏斗沿其轴线旋转。静置数分钟,使剩余的乙醇水相进一步分离,然后弃去。当己烷溶液到达旋塞孔道时关闭旋塞。继续用乙醇水溶液洗涤。26油脂不皂化物的测定己烷醚提取法等到完全分层后弃去下面水层。用40mL水再洗涤乙醚溶液两次，每次都要剧烈振摇，且在分层后弃去下面水层。排出洗涤液时需留2mL，然后沿其轴线旋转分液漏斗，等待几分钟让保留的水层分离。弃去水层，直到洗涤液加人1滴酚酞溶液后不呈现粉红色为止。27油脂不皂化物的测定己烷醚提取法5.蒸发溶剂通过分液漏斗的上口小心地将溶液转移到准确称量至0.1mg的250mL烧瓶中,烧瓶需预先于103℃的烘箱中干燥冷却后称量。在沸水浴中蒸发溶剂。28油脂不皂化物的测定己烷醚提取法6.残留物的干燥和测定将烧瓶水平放置在103℃的烘箱中,干燥残留物15min之后。在干燥器中冷却,并精确称量至0.lmg。重复进行干燥,直至两次称量的质量相差不超过15mg。如果3次干燥后还不恒质,则不皂化物可能被污染,需重新进行测定。29

油脂不皂化物的测定己烷醚提取法若需用游离脂肪酸进行校正,则将称量后的

残留物溶于4mL正己烷中,然后加入20mL预先中和到使酚酞指示液呈淡粉色的乙醇。用0.1mol/L氢氧化钾-乙醇标准溶液滴定到终点。30油脂不皂化物的测定己烷醚提取法以油酸来计算游离脂肪酸的质量,并以此校正残留物的质量。同一试样需进行2次测定。需进行一个空白试验,用相同的步骤及相同量的所有试剂，但不加试样。如果残留物超过1.5mg，需检查测定方法和试剂。31油脂不皂化物的测定己烷提取法

32油脂不皂化物的测定己烷提取法其中:V----滴定所用标准氢氧化钾乙

醇溶液的体积,mL;C--氢氧化钾-乙醇标