实验八血型鉴定及交叉配血试验

试验八

血型鉴定及交叉配血试验1医学课件ppt（一）ABO血型鉴定1．试验原理红细胞膜上具有血型糖蛋白，作为抗原，也称为凝集原；ABO血型就是根据红细胞表面抗本来确定的，根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。血清中具有对应的特异性抗体称为凝集素。凝集原和对应的凝集素特异性结合，使红细胞凝集成团，进而引起红细胞破裂，产生溶血。ABO血型鉴定的原理是运用红细胞凝集试验，将待测血液分别与已知含A抗体和B抗体的原则血清混合，观测与否发生凝集现象，判断待测血液红细胞上有何种抗原，由此确定待测血液的血型。2医学课件pptABO血型分类3医学课件pptABO血型正反定型成果4医学课件ppt（一）ABO血型鉴定2．血型鉴定措施标识凹载玻片：左上角写A，右上角写B。分别吸取原则A血清和原则B血清各1滴滴于双凹载玻片左端和右端。采血针刺破左手无名指尖，待血液出来后，用2支毛细滴管吸取血液，分别加入到玻片左、右两侧的血清内，并用牙签搅拌，使原则血清与血液混匀。（切勿混用毛细滴管和牙签！）手持玻片转动多次，转动时玻片应保持在一种水平面上，然后置室温下5min后观测成果。肉眼观测：假如外观略呈花边状或锯齿状，看上去有沉淀，则多为凝集；假如血滴呈均匀状态，边缘整洁，则多为不凝集。深入在低倍镜下观测：在低倍镜下，假如观测到红细胞凝集成团，或尚有少数游离细胞，则为凝集现象；假如红细胞均为游离状态，则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象鉴定血型。5医学课件ppt取洁净载玻片滴加定型剂消毒取血消毒取血消毒观测记录成果试验环节6医学课件ppt①②抗A抗B7医学课件ppt③用70－75％的酒精消毒取血部位消毒取血部位8医学课件ppt用针扎一下消毒部位，使血冒出，立即滴一滴血液在抗A或B上。④抗A抗B9医学课件ppt再用70－75％的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位，然后再取一滴血液于抗B或A上。

抗A抗B⑤10医学课件ppt观测有无凝集，并按下表鉴定成果。血型抗A试剂抗B试剂ABOAB+--+-+-+展现均匀的淡红色时，表明不凝集，用“一”号表达。在试剂里凝结成絮团状，形成鲜明的对比，表明凝集，用“十”号表达。11医学课件ppt主侧配血用患者血清与供者红细胞进行试验次测配血供血者血清与患者红细胞进行试验患者献血者主侧次侧（二）交叉配血试验12医学课件ppt交叉配血的规定主侧配血规定：绝对不可以有凝集或溶血现象。次测配血规定：供血者血清加受血者红细胞在容许范围内，可以有凝集现象，但不可以有溶血。凝集不凝集13医学课件ppt交叉配血的目的交叉配血试验是输血前必要的环节，重要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。重要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。尽量保证对人和一种病人来说，输了供血者的血不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间。14医学课件ppt交叉配血试验措施盐水介质配血酶介质配血菠萝酶，无花果酶，木瓜酶抗球蛋白介质配血经典措施，加LISS（低离子介质溶液）的措施聚凝胺介质配血凝胶措施配血15医学课件ppt盐水介质配血措施患者献血者主侧次侧离心当作果阳性阴性16医学课件ppt抗球蛋白配血措施患者献血者主侧次侧37℃

37℃水浴30分钟三洗

17医学课件ppt抗球蛋白措施配血措施加抗球蛋白离心当作果阳性阴性抗球蛋白试剂上海市血液中心血18医学课件ppt酶介质配血措施酶上海市血液中心血主次侧均加酶患者献血者主侧次侧19医学课件ppt酶介质配血措施离心当作果阳性阴性37℃

37℃水浴30分钟20医学课件ppt二、Rh定型1、使用盐水介质试剂用LIM配制的红细胞悬液，可以替代由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质试剂中进行Rh定型，两者定型措施和效果均相似。21医学课件ppt聚凝胺(Polybrene)配血措施患者献血者主侧次侧

室温放置1分钟Polybrene上海市血液中心血主次侧均