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巴西蜂胶和中国蜂胶对比检测报告*******蜂产品研究中心2015年11月20日样品来源及描述1.巴西蜂胶:Bioessens1:绿色蜂胶,块状;Bioessens2:棕绿色,块状;Bioessens3:棕色,块状。2.中国蜂胶:深棕色,块状。二、样品处理将蜂胶至于4℃三、测定方法1.提取率的测定方法参考GBT24283—2009(5.3.2)标准测定。具体如下:1.1原理称量乙醇不溶物质量,用减量法计算其占样品质量的百分比。1.2试剂和材料a)乙醇:分析纯(≥95%);b)定量滤纸φ12.5cm。1.3仪器a)天平(感量0.001g);b)100ml烧杯;c)电热鼓风干燥箱;析柱活塞将黄酮洗脱于25ml容量瓶中,用甲醇定容至25ml。此液置1cm比色皿中于波长360nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品,用标准曲线法定量。b)芦丁标准曲线:分别吸取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,置1cm比色皿中于波长360nm测定吸收值,绘制标准工作曲线,计算回归方程。2.4计算和结果表示按式(2)计算:X2=(2)式中:X2——试样中总黄酮的含量,单位为毫克/每百克(mg/100g);A——由标准曲线算得被测液中黄酮量,单位为微克(μg);V2——试样定容总体积,单位为毫升(ml);V1——吸取的上清液体积,单位为毫升(ml);m3——试样质量,单位为克(g)。计算结果保留二位有效数字。3.抗氧化测定方法3.1材料与试剂a)DPPH(90%,Sigma生产);b)甲醇:分析纯(≥95%);3.2仪器UV75IGD紫外/可见光分光光度计(上海分析仪器厂)。3.3方法步骤a)配置浓度均为1mg/ml的四种蜂胶的甲醇溶液:准确称取0.1g蜂胶提取物于容量瓶中,用甲醇定容至100ml待用。b)配制浓度为0.025mg/ml的DPPH溶液:准确称取0.0025gDPPH试剂,用甲醇溶解并定容至100ml待用。c)分光光度法评价不同蜂胶对DPPH·自由基的清除作用:参考larrauri[1]和yokozawa[2]的方法进行改进。分别吸取0.05、0.15、0.25ml的四种蜂胶溶液(1mg/ml),加入0.025mg/ml的DPPH甲醇溶液4ml,室温下避光放置30min后于517nm处测定吸光值。在相同条件下作平行试验。3.4计算与结果DPPH·的清除率通过下式计算:清除率(﹪)=(A0-A)/A0×100﹪式中:A0—空白试剂吸光值;A—不同梯度溶液吸光值。四、结果1.巴西蜂胶与中国蜂胶的乙醇提取率样品提取率中国蜂胶57.77%Bioessens159.42%Bioessens255.64%Bioessens360.08%2.巴西蜂胶与中国蜂胶的总黄酮含量样品总黄酮含量(%)中国蜂胶23.3bioessens18.81bioessens210.12bioessens310.383.巴西蜂胶和中国蜂胶对DPPH自由基的清除率清除率(%)0.05mL0.15mL0.25mL中国蜂胶40.490861.196371.6258Bioessens138.803762.730171.319Bioessens239.417261.503170.3988Bioessens333.895762.423371.9325参考文献:[1].LarrauriJA,SanchezMorenoC,SauraCalixtoF.Effectofextractsfromredandwhitegrapepomacepeels[J].AgricFoodChem,1998,46:2143.[2]YokozawaT,DongE,NatagawaT,etal.Invitroandinvi
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