食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定-编制说明

标准起草的基本情况本项目由国家卫生计生委提出并立项，由北京市营养源研究所负责修订，本项目在《食品安全国家标准整合项目计划（2014年-2015年）》的项目号为ZHENGHE-2014-328。标准起草单位为北京市营养源研究所。协作单位为：国家粮食储备局西安油脂科学研究设计院。主要修订人为何梅、李东、陈月晓、王猛、崔亚娟、高宝华、唐凌轩、赵菁菁。北京市营养源研究所接受制定任务后，成立由实验室专业技术人员组成的研制小组，全面负责标准的研制计划和工作安排。成员由正高1人、副高2人等8人组成。根据《中华人民共和国标准化法》，GB/T1.1-2000《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》、GB/T1.2-2000《标准化工作导则第2部分：标准的制定方法》、GB/T1.4-2001《标准编写规则第4部分：化学分析方法》等制订本标准。制标小组为做好标准的制定工作，广泛收集国内外有关的检测技术资料、检测标准、限量指标，以及相关的法律、法规，与国家粮食储备局西安油脂科学研究设计院组成协作组，召开了有关座谈会，听取各方建议。在研制过程中，遵循科学性、实用性和前瞻性等原则，尊重客观规律，融合科学理论和标准化方法，考虑到我国食品卫生标准分析方法应逐步与国际接轨，以及分析方法应有较强的可操作性的要求，确定了标准制定的关键环节，对本项目作了以下主要修订：1.将国内现有相关标准的名称统一整合为《食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定》；2.对现行相关标准中的检测范围、原理、试剂材料、仪器设备、操作步骤、结果计算及精密度进行了整合修订。标准的重要内容及主要修改情况（一）标准中各项主要技术修改内容的依据表1拟整合标准列表发布单位标准号标准名称1原中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会发布GB/T5009.168-2003食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定2中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会发布GB/T22223-2008食品中总脂肪、饱和脂肪（酸）、不饱和脂肪（酸）的测定水解提取-气相色谱法3原中华人民共和国卫生部发布GB5413.27-2010食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定4中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会发布GB/T9695.2-2008肉与肉制品脂肪酸测定5中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会发布GB/T17376-2008动植物油脂脂肪酸甲酯制备6中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会发布GB/T17377-2008动植物油脂脂肪酸甲酯的气相色谱分析7中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布SN/T2922-2011出口食品中EPA和DHA的测定气相色谱法8国家技术监督局发布NY/T91-1988（GB10219-88）油菜籽中油的芥酸的测定气相色谱法此次需要整合修订的标准共有8项，在尽量保留现行标准文本内容的基础上进行整合修订。目前国内相关标准存在检测范围不明确、分类依据模糊以及交叉重复严重等问题，此次修订标准的主要任务是建立一套范围依据明确，操作步骤统一的一套标准化检测方法。是多项标准整合形成单项食品安全国家标准的多对一的整合，对相同被测指标和具有类似性质的不同被测指标同时存在多个检验方法进行方法检测原理、检测范围、操作步骤、仪器设备等内容的整合，避免交叉、重复现象。本标准将以上标准进行了整合，主要修订如下：现行GB/T22223-2008标准中涉及的样品类别较全面，方法成熟，应用较广，因此此次整合是在此基础上开展整理完善。删除了GB/T5009.168-2003、GB/T17377和GB10219-88中玻璃柱或不锈钢柱的使用，统一为目前使用比较广泛的毛细管色谱柱。综合各个标准的检测范围，确定整合后为适用于各类食品中脂肪酸含量的测定。将样品前处理分为两个大部分:水解-提取脂肪三氟化硼甲醇酯化法和乙酰氯甲醇法。其中水解-提取过程根据样品类别的不同分别有酸水解、碱水解、酸碱水解三种；乙酰氯甲醇法仅适用于乳及乳制品，且要求样品含水量＜5%。目前标准中出现的甲酯化方法包括：碱性条件下三氟化硼甲醇法，三甲基氢氧化硫法，盐酸甲醇法。其中GB/T17376中规定的三种甲酯化方法是等同采用了ISO5509：2000《动植物油脂脂肪酸甲酯制备》，其中三甲基氢氧化硫法的甲酯化反应是在进样口中，于高温条件下进行，不推荐使用极性固定相，与本方法所采用的强极性固定相不匹配，且在国标中没有使用。参考AOAC和AOCS中普遍使用三氟化硼酯化法，少数国内标准方法中使用了盐酸甲醇法，因此水解提取法中将甲酯化方法统一为应用较为普遍的三氟化硼-甲醇法。乙酰氯甲醇法保留原方法。GB/T5009.16-2003食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定和GB/T9695.2-2008肉与肉制品脂肪酸测定中，先称取足够多的样品进行脂肪提取，然后在提取出的脂肪中称取适量油脂进行皂化甲酯化。由于在粗脂肪提取过程及脂肪再称量过程中容易产生误差，对于定量计算食品中脂肪酸绝对含量产生较大误差。因此删除了这种脂肪提取方法，归纳入水解提取法中。现行标准中的定量方法有内标法、外标法、归一化法，整合后的标准中分别对三种定量计算的方法做了描述。目前国际上如美国、英国、韩国、日本、澳大利亚等国家对脂肪酸结果表达方式以g/100g为主，因此内标法和外标法统一以g/100g表述，归一化法以%表述。内标法是通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等变化所引起的误差，色谱条件对结果影响不大，准确度、精度较高，可克服进样量的误差对测量结果的影响，对于多成分的脂肪酸测定方法建议以内标法测定为主。若采用内标法，可根据实际工作需要选择内标，对于组分不确定的样品，第一次检测时不要加内标物。观察在内标物峰位置处是否有干扰峰出现，如果存在，加内标检测时要对内标物峰进行必要的校正或选择其他物质作为内标，常见使用的内标有C11:0甘油三酯，C13:0甘油三酯，C19:0甘油三酯，C23:0甘油三酯等，标准中内标以十一碳酸甘油三酯为例。AOAC和AOCS中脂肪酸测定的定量方法中主要以内标法为主，可根据实际需要选择内标。选择内标的原则：a)内标物为检测样品中不含有的纯物质；b)与待测成分有良好分离；c)加入内标的量应与被测组分含量相接近；d)内标出峰的位置应与被测组分出峰位置相接近，或者在被测组分出峰位置中间。国外有关法律、法规和标准情况的说明AOAC和AOCS脂肪酸测定方法AOCSOfficialMethodCe2-66preparationofmethylestersoffattyacids三氟化硼甲醇AOCSOfficialMethodCh1-91（Reapproved1997）PreparationofMethylEstersofLong-ChainFattyAcidsAOCSOfficialMethodCe1h-05(Approved2005)Determinationofcis-,trans-,Saturated,MonounsaturatedandPolyunsaturatedFattyAcidsinVegetableorNon-ruminantAnimalOilsandFatsbyCapillaryGLCGLC-FID参考AOCSOfficialMethodCe2-66内标C21:0TAGAOCSOfficialMethodCe1k-07（Revised2007）DirectMethylationofLipidsfortheDeterminationoftotalfat，Saturated，cis-Monounsaturated，cis-polyunsaturated，andtransFattyAcidsbyChromatographyGLC-FID参考AOCSOfficialMethodCe2-66内标C21:0TAGAOCSRecommendedPracticeCh2a-94（Approved1997）transUnsaturatedFattyAcidsbyCapillaryGC-FID归一化法AOCSOfficialMethodCh2-91（Reapproved1997）DeterminationofFattyAcidsinOliveOilsbyCapillaryGLCGLC-FID参考AOCSOfficialMethodCe2-66等AOCSRecommendedPracticeCe1j-07（New2007）Determinationofcis-,trans-,Saturated,Monounsaturated,andPolyunsaturatedFattyAcidsinDairyandRuminantFatsbyCapillaryGLCGLC-FID内标C13:0TAGAOCSOfficialMethodCe1i-07（Revised2007）DeterminationofSaturated,cis-Monounsaturated,andcis-PolyunsaturatedFattyAcidsinMarineandOtherOilsContainingLong-ChainPolyunsaturatedFattyAcids(PUFAs)byCapillaryGLCGLC-FID内标（C23:0TAG）AOCSOfficialMethodCe1f-96（Reapproved1997•Revised2001）Determinationofcis-andtrans-FattyAcidsinHydrogenatedandRefinedOilsandFatsbyCapillaryGLCGLC-FID内标AOCSOfficialMethodCe1d-91（Surplus1997）Determinationofn-3andn-6UnsaturatedFattyAcidsinVegetableOilsbyCapillaryGLCGLC-FID参考AOCSOfficialMethodCe2-66等归一化法AOCSOfficialMethodCe1c-89（Surplus1997）FattyAcidCompositionbyGLCcis,cisandtransIsomersGLC-FID参考AOCSOfficialMethodCe2-66等归一化法AOCSOfficialMethodCe1b-89（Reapproved1997•Revised2005）FattyAcidCompositionbyGLCMarineOilsGLC-FID归一，内标C23:0甲酯AOCSOfficialMethodCd14b-93（Surplus1997）FattyAcidCompositionofPartiallyHydrogenatedOilsACombinedGLC–IRMethodGLC-IRAOCSOfficialMethodCe1-62fattyacidcompositionbygaschromatographyGC-TCorFID参考AOCSOfficialMethodCe2-66AOACOfficialMethod969.33FattyAcidsinOilsandFatsPreparationofMethylEstersBoronTrifluorideMethodFirstAction1969三氟化硼AOACOfficialMethod996.06Fat(Total,Saturated,andUnsaturated)inFoodsHydrolyticExtractionGasChromatographicMethodFirstAction1996Revised2001GC-FID三氟化硼甲苯内标（C11TG）AOACOfficialMethod985.21TotaltransFattyAcidIsomersinMargarinesGasChromatographicMethodFirstAction1985FinalAction1992GC-FIDAOACOfficialMethod991.39FattyAcidsinEncapsulatedFishOilsandFishOilMethylandEthylEstersGasChromatographicMethodFirstAction1991FinalAction1995GC-FIDAOACOfficialMethod969.33AOACOfficialMethod963.22MethylEstersofFattyAcidsinOilsandFatsGasChromatographicMethodFirstAction1963FinalAction1984GC-FIDAOACOfficialMethod994.14IsolatedtransUnsaturatedFattyAcidContentinPartiallyHydrogenatedFatsInfraredSpectrophotometricMethodFirstAction1994FinalAction1998红外分光光度ISO15304:2002Animalandvegetablefatsandoils-