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T/NAIA034—枸杞中酚酸化合物含量的测定高效DeterminationofphenolicacidcompoundsContentinLyciumbarbarumL.byHigh-performanceliquidchromatography2021-03-16发 2021-04-01实宁夏化学分析测试协 发前GB/T1.1-20201本文件规定了枸杞中9GB/T6682NY/T2012NY/T3290除非另有说明，在分析中仅使用确认为色谱纯的试剂和GB/T668230mL40mL70mL60mL30%~40%10381mL超纯水，加入37%119mL没食子酸标准品（CAS149-91-7，HPLC98%）香豆酸标准品（CAS500-05-0，HPLC98%）原儿茶醛标准品（CAS139-85-5，HPLC≥98）儿茶素标准品（CAS154-23-4，HPLC98%）绿原酸标准品（CAS327-97-9，HPLC98%）咖啡酸标准品（CAS331-39-5，HPLC98%）表儿茶素标准品（CAS490-46-0，HPLC≥98）丁香酸标准品（CAS530-57-4，HPLC≥98）阿魏酸标准品（HPLC98≥%）10mL0.5mg/mL，于-20℃冰箱中贮存。0.01g0.0001g水浴锅：0-100℃0.45µm枸杞样品于-18℃冷冻冰箱中保存。试验时将样品取出，采用四分法，混合均匀后缩分至100g，立即用高速万能粉碎机粉碎，置于样品瓶中，-18℃冷冻备用。取枸杞粉末以体积浓度为30%-40%的乙醇溶液按体积分数为样品总重量的10倍量进行提取，室温下振荡提取2h，振荡液于水浴中回流1.5h-2h，回流后的样液趁热过滤到浓缩瓶中过滤，残留物用乙醇洗涤2-3次，乙醇用量控制在2-3mL，合并收集提取液，用提取剂定容至50mL棕色容量瓶中。提取液一并于100mL旋转蒸发瓶中，在40℃减压浓缩，蒸馏后用浓度为10%的盐酸调节pH值为2.5-3.0。酸化液中加入20mL乙酸乙酯萃取，分离有机溶剂层，然后经减压浓缩去除残留的乙酸乙酯，用2mL无水乙醇复溶后过0.45μm微孔滤色谱柱：LP-C18型商品柱（25cm×4cmI.D.），流速：1.0mL/min柱温：30.0℃检测波长：280nm进样量：10μL11时间/A相（0.1%磷酸水溶液B相（乙腈用甲醇将酚酸标准储备液（4.11）按不同倍数稀释，制备系列混合酚酸标准工作液，各酚酸浓度依次为0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mg/L，以质量浓度x（mg/L）为横坐标，以相应的响应峰面积y为纵坐标绘制标准曲线（酚酸溶液标准色谱图见附录）。枸杞样品中酚酸的含量按公式（1）XCV1000 n在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%当枸杞样品为2.0g时，没食子酸、咖啡酸、原儿茶醛、绿原

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