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饲料中阿散酸、洛克沙胂的测定高效液相色谱法2013-08-15发布2013-08-15发布湖南省质量技术监督局发布I前言 Ⅱ 2规范性引用文件 13原理 4试剂和材料 5仪器和设备 26采样和试样制备 27测定步骤 28结果计算 2 3附录A(资料性附录)阿散酸、洛克沙胂高效液相色谱图 4本标准按GB/T1.1-2009的规则编制。本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。本标准起草单位：湖南省兽药饲料监察所、湖南省畜禽水产品质量检验检测中心。本标准主要起草人：陈福华、隆雪明、易建希、谭美英、胡保国、魏群、何红艳、魏唯、邓均红。1凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682国家实验室用水规格和试验方法4试剂和材料4.2柠檬酸。4.5甲醇水(1:1)溶液：取50mL水与50mL甲醇混合均匀，使用前配制。4.6离子对试剂缓冲液：准确称2.02g庚烷磺酸钠和2.10g柠檬酸，加入约980mL水溶解，用磷酸调pH至2.1后，定容至1L备用。4.7流动相：离子对试剂缓冲液+甲醇=92+8(v+v)。4.8微孔滤膜：0.22μm,有机4.10洛克沙胂对照品，纯度≥98.5%。4.11阿散酸标准储备液：称取阿散酸对照品0.025g(精确至0.01mg),用一级水溶解并定容至25.0mL,即为1.0mg/mL的阿散酸标准储备液。置冰箱中(2～8)℃保存，有效期为12个月。4.12洛克沙胂标准储备液：称取洛克沙胂对照品0.025g(精确至0.01mg),用一级水溶解并定容至25.0mL,即为1.0mg/mL的阿散酸标准储备液。置于冰箱中(2～8)℃保存，有效期为12个月。2洛克沙肿为：0.8ug/mL、4.0ug/mL、16.0ug/mL、32.0ug/mL、40.0ug/mL、80.0ug/mL。5.2分析天平：感量0.01mg和0.001g。5.4pH计：精度为0.02。6采样和试样制备6.1采样步骤：按GB/T14699.1的规定执行。6.2试样的制备：按GB/T20195的规定执行。称取饲料试样5g(精确至0.001g),置于50mL离心管中，加入20mL甲醇水(1:1)溶液，涡旋混合，于10000r/min离心5min,上清液移入50mL容量瓶中；重复提取一次，合并上清液，用甲醇水 色谱柱：C18柱(250mm×4.6mm,5μm)或相当者。流速：0.8mL/min。酸、洛克沙胂高效液相色谱图参见附录A。阿散酸、洛克沙胂标准工作液色谱图参见附录A中图A.1,饲料中添加阿散酸、洛克沙胂标准物质色谱图参见附录A中图A.2。以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标作单点或多点校准。试样中阿散酸、洛克沙胂的含量由色谱数3Cs——标准工作液中阿散酸、洛克沙胂的浓度，单位为微克/毫升(μg/mL);计算结果需扣除空白试样，测定结果用两次平行测定的算术平均值表阿散酸、洛克沙胂在饲料中的定量限分别为2mg/kg、8mg/kg。本方法阿

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