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152024-03-15发布本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定本文件由内蒙古自治区马铃薯标准化技术委员会(SAM/TC4I马铃薯镰刀属真菌病害检测技术规程本文件规定了马铃薯镰刀属真菌病害检测的原理、仪器设备和用具、形态检验、致病性测定、PCR学特征,回接致病性测定及PCR反应结果为鉴定依据,将上述各项措施综合形成一套超净工作台、显微镜、高压灭菌锅、光照培养箱、PCR仪、离心机、凝胶电泳仪、漩涡震荡仪、水接种针、手术刀、镊子、挑针、载玻片、盖玻片、滴管、离心管、培养皿、三角瓶、酒精灯。12切,或切取表皮凹陷病斑处进行观察,观察是否出现维管束褐变,块茎中空或腐烂并伴随白色菌丝层。酒精消毒30s,用无菌滤纸吸干,在0.1%次氯酸钠浸泡2min,再用无菌水冲洗3次。待组织干燥后置于8.2对照设置以菌株DNA为模板,利用镰刀菌属真菌的特扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增出长度介于700bp~750bp之间的清晰单一条带,与阳性3A.1培养基配方),A.3病害症状45(资料性)镰刀属真菌形态B.1镰刀属真菌孢子形态图见图B.1。图B.1镰刀属真菌孢子形态图B
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